O segredo da Vida...
Watson e Crick
A=T
C=G
DNA se replica
Originando duas moléculas filhas iguais.
Como copia...
Replicação de DNA
Ligação fosfodiester
A reação de polimerização é feita pela
DNA polimerase e necessita de
nucleotídeos trifosfatos, uma
extremidade “primer” ou iniciadora, que
possui a hidroxila 3’ livre e um molde ou
“template” para ser copiado.
“Bolha” de replicação
Replicação unidirecional
gera fragmentos:
Fragmentos de Okazaki
DNA polimerase I
tem função editorial
Seqüenciamento de
DNA
Princípios
Reação com ddNTP
Produtos da reação
Leitura da seqüência
Genoma de S. cerevisae
6200 genes
12.147.813 nucleotídios
Drosophila melanogaster
Caenorhabditis elegans
Terminado em 2000
Fluxo da informação
Transcrição
RNA polimerase é a
enzima responsável pela
transcrição
Sítios de reconhecimento
Tradução necessita
de adaptador
Que funciona pela
complementariedade
Complementariedade
Estrutura do DNA
Complementariedade
Ligação cooperativa
quando rompida o efeito é
marcante.
Estrutura da água
Pontes de hidrogênio
Evaporação de água
?
Temperatura oC
Evaporação de água
Temperatura oC
curva de transição
Estrutura do DNA
Complementariedade
Desnaturação de DNA
T’m
Temperatura oC
Conteúdo de CG
Desnaturação de DNA
T’m
Temperatura oC
Desnaturação em função
do conteúdo de GC
T’m
Hibridação
Calor
ou
pH
= desnaturação
Reassociação
Temperatura e força iônica
Reassociação depende da
concentração das seqüências
Cot
A velocidade de
reassociação depende da
complexidade do DNA
Cot
Três classes de
seqüências de DNA
Cot