Título: Desenvolvimento de Embriões Bubalinos (Bubalus bubalis) Cultivas in vitro em
Diferentes Meios.
Autor: Jedna Kato Dantas
Este trabalho teve como objetivos: (1) determinar o melhor meio de cultivo para o embrião
bubalino associado às células epiteliais do oviduto em suspensão ou células da glanulosa
folicular, visando o desenvolvimento até o estágio de blastocisto; (2) coletar dados
referentes à biometria ovariana; (3) analisar as taxas de recuperação ovocitária, MIV e FIV.
Ovários bubalinos foras coletados em abatedouro e transportados até o Laboratório para
Biometria, os folículos foram obtidos com seringa (20ml) e agulha (40x12), os os ovócitos
foram levados ao fluxa laminar para seleção e lavagem antes da MIV, onde permaneciam
por 24 horas. As células epiteliais do oviduto foram coletadas por raspagem, lavadas e
cultivadas em meio de tuba por 24 horas, até a colocação nas gotas de cultivo (B2,
TCM199, CR2). O sêmen congelado foi separado por centrifugação durante 20 minutos em
coluna de gradiente de Percoll (45 e 90%) e lavado três vezes em meio TALP-Stock por 10
minutos, a 200 G. A concentração espermática foi ajustada para 1.000.000 sptz/ml e
incubados para capacitação em meio de FIV por 2 horas; quando eram adicionados
ovócitos já maduros. Após 18 a 24 horas, os zigotos foram pipetados para desnudamento e
divididos nos grupos experimentais: G1 - B2+Ovid, G2 – TCM199+Ovid; G3 –
CR2+Ovid; G4 – B199+Gran; G5 – CR2+Gran. A clivagem era analisada após 72 horas de
cultivo, com a primeira renovação do meio (feeding), e novas análises a cada 48 horas,
junto com os feedings. Os resultados quanto à biometria ovariana foram 2,53+-0,33 de
comprimento; 1,52+-0,32 de largura; 1,32+-0,29cm de espessura e 3,70+-1,09g de peso. As
médias do numero de folículos, ovócitos recuperados e ovócitos viáveis por ovário foram
respectivamente 4,62+-1,41; 2,89+-1,06; 1,52+-0,69. as taxas FIV e MIV foram de 67% e
91%, respectivamente. As taxas de clivagem em G1 a G5 foram de 34,41; 28,52; 51,61;
27,92; e 35,66% (p>0,05) e de mórula / blastocisto foram de 12,95 (a,c); 6,16 (a); 23,49 (c);
18,02 (a,b) e 18,88 (b) % respectivamente (p>0,05). A análise estatística dos resultados não
mostrou diferença significante entre os grupos quanto à taxa de clivagem, porém o G3
mostrou resultado superior (p<0,05) na obtenção de blastocisto, seguido de G5, quando
comparados aos outros grupos.
Palavras chaves: Bubalino, Fertilização in vitro, Cultivo in vitro, Embrião.
Ano: 2002
Páginas: 58
Banca:
Dr. Otávio Mitio Ohashi (Departamento de Biologia - UFPA)
Dr. Pietro Sampaio Baruselli (Departamento de Reprodução Animal - USP)
Dr. José Luiza do Nascimento (Departamento de Fisiologia – UFPA)
Dra. Diva Anelie de Araújo Guimarães (Departamento de Biologia – UFPA)