FUNDAÇÃO OSWALDO CRUZ CONCURSO PÚBLICO 2010 – PESQUISADOR EM SAÚDE PÚBLICA PADRÕES DE RESPOSTAS DAS QUESTÕES DICURSIVAS Bioquímica Aplicada à Saúde (C4011) PADRÕES DE RESPOSTAS QUESTÃO 01 a) É esperado que o candidato cite pelo menos as etapas: 1- Transcrição gênica 2- Processamento do RNAm 3- Tradução do RNAm b) É esperado que o candidato cite durante a sua descrição, no contexto correto, no mínimo: Iniciação, alongamento, terminação, fatores de iniciação, fatores de alongamento, fatores de terminação, sítio de iniciação, códon de iniciação, ribossomo, subunidade ribossomal 40S e 60S, tRNA metionina iniciador. eIF2 é alvo central de regulação de tradução global nas células eucarióticas. A fosforilação da subunidade alfa de eIF2 por quinases específicas leva ao bloqueio da tradução. c) É esperado que o candidato seja capaz de fazer, no mínimo, a seguinte associação: A proteômica é um método que permite a identificação das proteínas totais de um determinado tipo celular em diferentes situações. Analisando-se a expressão global de proteínas de uma célula ou, grupo de células ou organismo, em determinada situação, pode-se descobrir redes de proteínas e marcadores moleculares associados com aquela situação específica. Não há aumento de pontuação se o candidato escrever mais sobre o assunto do que o especificado. QUESTÃO 02 I-O sequenciamento do genoma e consequente conhecimento da sequencia completa de todos genes no mesmo, são dados importantíssimos para se estudar melhor a biologia de um organismo. No entanto, estas informações não são suficientes para saber quais proteínas estão sendo realmente expressas na células em uma determinada condição e tempo. A proteômica é uma ferramenta excelente neste sentido, que se propõe a analisar, de forma global, o conjunto de proteínas expressas em uma célula ou tecido em um determinado momento. Os estudo de análise protômica complementam os dados de análise e sequenciamento de genomas e vice-versa, auxiliando na compreensão das redes de funcionamento e regulação celular, representando a ponte de ligação entre o genótipo e o fenótipo de um organismo’ O estudo da genômica abre as portas para os estudos de proteômica, permitindo que os dados de um sejam validados com os dados do outro. Quando a sequencia completa de uma genoma está disponível, a quantificação espectrométrica de massas de poucos fragmentos trípticos de uma proteína não conhecida, acompanhada do uso de algorítmos para comparar as massas peptídicas observadas com aquelas preditas para os fragmentos trípticos teóricos de todas as sequencias expressas são suficientes para permitir a identificação exata da proteína. A informação fornecida pela espectrometria de massas sobre a sequencia de aminoácidos de uma proteína, permite a busca por homologia do gene correspondente. II Os parasitos possuem um ciclo de vida complexo que requer expressão de proteínas especializadas para a vida tanto nos hospedeiros vertebrados quanto invertebrados, para a sobrevivência extracelular e/ou intracelular, para a invasão de diferentes tipos celulares e para a evasão do sistema imune do hospedeiro. A proteômica analisa, de forma global, o conjunto de proteínas expressas em uma célula ou tecido em um determinado momento. Sabendo que proteínas são expressas em diferentes estágios de vida do parasito, além da sua localização subcelular e modificações póstraducionais, podem ajudar a entender a complexa rede de comunicação entre essas proteínas e por consequencia, a diferença, ao nível molecular, que leva a apresentação de diversos estágios de vida nesses parasitos. QUESTÃO 03 O candidato pode citar qualquer protease de parasitos causadores de doenças negligenciadas transmitidas por insetos, contanto que a sua existência possa ser comprovada. Se o candidato citar a classe da protease e não um exemplo de protease Exermplos: GP63 (leishmanolisina) – Leishmania major Cruzipaína (cruzaina, GP57/51 ou cisteina protease) – Trypanosoma cruzi CatepsinaL-like A (CPA) – Leishmania mexicana CPB – Leishmania sp Plasmepsin IX e X - Plasmodium PfSUB1, PfSUB2 - Plasmodium falciparum Falcipaina 2 - Plasmodium SERAs – Plasmodium Oligopeptidase B Metalocaroboxipeptidase 1 – T. cruzi Cruzipsin I (CZP-I) Cruzipsin II (CZPII) II- O candidato pode citar qualquer protease como exemplo para descrever sua função bioquímica e citar seu alvo. (descrever a função bioquímica Ex. Cruzipaína –. FUNDAÇÃO OSWALDO CRUZ CONCURSO PÚBLICO 2010 – PESQUISADOR EM SAÚDE PÚBLICA PADRÕES DE RESPOSTAS DAS QUESTÕES DICURSIVAS Cruzipaína é uma cisteíno protease, e como o próprio nome diz, bioquimicamente tem como alvo, proteínas (assim como todas as outras proteases). As cisteíno proteases agem através de um grupamento tiol da cisteína na tríade catalítica (Cis-His-Asp)- e pelo desprotonamento de um aminoácido que contenha uma cadeia lateral básica, normalmente uma histidina para levar a hidrólise da proteína alvo. III-O candidato deve ser capaz de citar a função da protease de escolha e o mecanismo proposto no desenvolvimento da patogênese em humanos por esta protease (o candidato receberá 2 pontos pela função e 4 pontos pelo papel na patogênese, no último caso, 1 se citar em que estágio age, 1 se citar outras moléculas envolvidas e 2 se explicar como, ao agir da forma citada, ajuda no desenvolvimento da patogênese) – 6 pontos totais Ex. A cruzipaína está presente em todos os estágios de vida do parasito e a localização celular em cada estágio se traduz e mdiferentes funções biológicas no parasito. Uma hipótese recente interessante é que o T. cruzi ativa alternativamente macrófagos infectados através dos efeitos da cruzipaína (função). Essa ativação alternativa inclui aumento da atividade de arginase-1 e secreção de IL-10 e TGF-Beta. Esse fenótipo foi associado com um aumento do crescimento intracelular do parasito, assim como um aumento na sobrevivência, indicando a contribuição da cruzipaína para a manutenção da patogênese.