Modified Human Tubal Fluid (HTF) Medium with Gentamicin Catalog No. 90126 100 mL, 500 mL Catalog No. 9717 5 L Powder For assisted reproductive procedures. Für betreute fortpflanzungsverfahren. Per tecniche di riproduzione assistita. Para utilización en técnicas de reproducción asistida. Pour les techniques de procréation médicalement assistée. Para utilização em técnicas de reprodução assistida. INTENDED USE mHTF is intended for use in assisted reproductive procedures which include retrieval, handling and transfer of gametes and embryos. QUALITY ASSURANCE mHTF is a culture medium which is membrane filtered and aseptically processed according to manufacturing procedures which have been validated to meet a sterility assurance level (SAL) of 10-3. Each lot of mHTF is tested for: Endotoxin by LAL methodology Biocompatibility by Mouse Embryo Assay Sterility by the current USP Sterility Test <71> All results are provided on a lot-specific Certificate of Analysis. BUFFER SYSTEM mHTF uses a buffering system composed of a 21 mM HEPES (N-2-Hydroxyethylpiperazine-N'-2-ethanesulfonic acid) and 4 mM Sodium Bicarbonate combination. This buffering system provides optimum pH maintenance over the physiologic range (7.2 to 7.4) and does not require the use of a CO2 incubator. PROTEIN SUPPLEMENTATION mHTF does not contain protein components. General laboratory practice includes supplementation when using this medium. The amount of protein supplementation may vary among laboratories and is dependent on the phase of processing/growing the gametes and embryos. Consult your individual laboratory protocols. English 1/3 DIRECTIONS FOR USE Preparation of powdered mHTF: To reconstitute powdered medium, empty entire contents of container into clean vessel that will hold a final volume of 5.0 liters. Add 5.0 liters of Water for A.R.T. Use (Irvine Scientific Catalog #9307) and mix thoroughly. Add in the following order: 15.14 mL of 60% Sodium Lactate solution 1.7 grams Sodium Bicarbonate Mix thoroughly. Check pH with a calibrated pH meter and adjust if desired. Sterile filter the final reconstituted product, using a 0.2µ filter, into sterile re-sealable containers. Store the unopened containers refrigerated at 2° to 8°C for up to 58 days. mHTF should be tightly capped when used in a CO2 incubator to avoid pH levels of 7.0 or less. The liquid mHTF Medium is then ready for use as a transport medium (prewarmed at 37° C if desired), for the collection of human gametes and for embryo transfer to the patient. This medium is also used for procedures at ambient atmosphere (due to the HEPES-buffering capabilities). These procedures include sperm washing and IntraCytoplasmic Sperm Injection (ICSI). For additional details on the use of this product, the laboratory should consult its own standard procedures and protocols which have been specifically developed and optimized for the individual medical facility. English 2/3 STORAGE INSTRUCTIONS AND STABILITY Store the unopened bottles refrigerated at 2º to 8ºC. Do not freeze or expose to temperatures greater than 39°C. mHTF is stable until the expiration date shown on the bottle label when stored as directed. PRECAUTIONS AND WARNINGS Do not use any bottle of medium which shows evidence of particulate matter or cloudiness. mHTF should be tightly capped when used in a CO2 incubator to avoid pH levels of 7.0 or less. To avoid problems with contamination, handle using aseptic techniques and discard any excess medium that remains in the bottle after the procedure is completed. mHTF contains the antibiotic: Gentamicin Sulfate. Appropriate precautions should be taken to ensure that the patient is not sensitized to this antibiotic. English 3/3 BESTIMMUNGSZWECK mHTF ist fuer die Verwendung in unterstützten reproduktiven Verfahren bestimmt, die die Wiederherstellung, die Behandlung und Übertragung von Keimzelle (gamete) und von Embryos umfassen. QUALITAETSSICHERUNG mHTF ist ein Kulturmedium, das Membrane-gefiltert wird und aseptisch entsprechend den Fertigungsverfahren verarbeitet ist, die validiert worden sind, um ein Sterilitätversicherungsniveau (SAL) von 10-3 zu treffen. Jedes Los der mHTF wird für folgendes erprobt: Endotoxin durch LAL Methode Biokompatibilitaet durch Mausembryo Probe. Sterilität (durch aktuellen USP Sterility Test <71>) Alle Resultate werden auf einem Los spezifischen Analysenzertifikat zur Verfuegung gestellt. PUFFERSYSTEM mHTF benutzt ein Puffersystem, das aus einer 21 mM HEPES (N-2-Hydroxyethylpiperazine-N’-2-ethanesulfonic Säure) besteht, und eine Kombination von 4 mM Natriumbikarbonat. Dieses Puffersystem liefert optimale pH Erhaltung über der physiologischen Umfang (7,2 bis 7,4) und erfordert nicht die Verwendung eines CO2 Inkubators. PROTEINERGAENZUNG mHTF enthält keine Proteinkomponenten. Allgemeine Laborpraxis umfaßt Ergänzung, wenn Sie dieses Medium verwenden. Die Menge der Proteinergänzung kann unter Labors schwanken und ist von der Entwicklungsphase der Keimzelle (gamete) und der Embryos abhängig. Beraten Sie Ihre einzelnen Laborprotokolle. Deutsch 1/3 GEBRAUCHSANLEITUNG Vorbereitung des pulverisierten mHTF: Wiederherzustellen pulverisiertes Medium, leeren gesamten Inhalt des Behälters in einen sauberen Behälter, der ein Endvolumen von 5,0 L hält. Fügen Sie 5,0 L Wasser für A.R.T hinzu. Verwenden Sie Irvine Scientific Katalog Nr. 9307 und mischen Sie gänzlich. Fügen Sie im folgenden Auftrag hinzu: 15.14 mL der 60% Natriumlaktatloesung 1.7 Gramm des Natriumbicarbonat Mischen Sie gaenzlich Überprüfen Sie den pH Wert mit einem kalibriertem pH-Metter und wenn falls gewuescht, adjustieren Sie es. Steril filtern Sie das abschließende wiederhergestellte Produkt mit einem Filter 0.2µ, in sterile wiederversiegelbare Behälter. Bewahren Sie bis 58 Tage die ungeoeffneten Behaelter im Kuehlschrank bei 2 bis 8 °C auf. Um die pH Niveaus von 7,0 oder kleiner zu vermeiden, sollte das mHTF nach dem Gebracuh in einem CO2 Inkubator fest mit einer Kappe bedeckt werden. Das flüssige mHTF Medium ist dann zum Gebrauch als Transportmittel (falls gewuenscht, vor-gewaermt bei 37°C), fuer die Ansammlung der humane Keimzelle (gamete) und die Embryoübertragung auf den Patienten bereit. Dieses Medium wird auch für Verfahren an der umgebenden Atmosphäre verwendet (wegen der HEPES-Pufferbetriebfähigkeiten). Diese Verfahren umfassen Samenzellenreinigung und IntraCytoplasmische SamenzellenInjektion (ICSI). Für zusätzliche Details über die Verwendung dieses Produktes, sollte das Labor seine eigenen Standardverfahren und Protokolle konsultieren, die spezifisch für den einzelnen medizinischen Service entwickelt worden und optimiert worden sind. Deutsch 2/3 LAGERBEDINGUNGEN UND STABILITAET Bewahren Sie die ungeoeffneten Flaschen im Kuehlschrank bei 2 bis 8 ºC auf. Frieren Sie sie nicht oder stellen Sie sie nicht in Temperaturen heraus, die groesser als 39 ºC sind. mHTF ist bis zum Verfallsdatum bestaendig, das auf dem Flaschenetikett gezeigt wird. Aufbewahrung wie angewiesen. VORSICHTSMASSNAHMEN UND WARNUNGEN Benutzen Sie keine Flasche des Mediums, wenn es Beweis der Feststoffe oder Truebung gibt. Um die pH Niveaus von 7,0 oder kleiner zu vermeiden, sollte das mHTF nach dem Gebracuh in einem CO2 Inkubator fest mit einer Kappe bedeckt werden. Um Probleme mit der Verschmutzung zu vermeiden, fassen Sie mit aseptischen Techniken an und werfen Sie jedes überschüssiges Medium weg, das in der Flasche bleibt nachdem das Verfahren durchgeführt ist. mHTF enthält das Antibiotikum Gentamicin Sulfat. Um zu sichern dass der Patient nicht zu diesem Antibiotikum sensibilisiert wird, sollten passende Vorsichtsmaßnahmen getroffen werden. Deutsch 3/3 ISTRUZIONI D’USO mHTF è indicato per l’uso nelle tecniche di riproduzione assistita inclusa la manipolazione dei gameti e degli embrioni. ASSICURAZIONE DI QUALITA mHTF è un terreno di coltura filtrato su membrana e preparato in condizioni di sterilità in accordo con le procedure produttive che sono validate per incontrare un livello di sicurezza di sterilità (SAL) di 10-3 . Ogni lotto di mHTF è testato per: Endotossine con la metodologia LAL Biocompatibilità in embrioni di topo Sterilità tramite il corrente test di sterilità USP <71> Tutti i risultati sono riportati in un Certificato di Analisi specifico per lotto SISTEMA TAMPONE mHTF utilizza un sistema tampone composto di una combinazione di 21 mM HEPES e 4 mM di Sodio Bicarbonato. Questo sistema tampone garantisce un ottimo mantenimento del pH intorno al range fisiologico (7,2 /7,4) e non richiede l’uso dell’incubatore CO2. SUPPLEMENTAZIONE PROTEICA mHTF non contiene componenti proteici. La normale pratica di laboratorio (E’ norma generale nella pratica di laboratorio aggiungere) aggiunge supplemento quando usa questo terreno. La quantità di proteine da supplementare può variare tra i laboratori e dipende dalla fase del processo/crescita del gamete e dell’embrione. Consultare il vostro individuale protocollo di lavoro. Italiano 1/3 ISTRUZIONI PER L’ USO Preparazione dell’mHTF in polvere: Per ricostituire il terreno in polvere , versare l’intero contenuto del flacone all’interno di un recipiente chiaro che contenga un volume finale di 5,0 litri. Addizionare 5,0 litri di acqua per A.R.T. (IRVINE SCIENTIFIC catalogo #9307) e sciogliere completamente. Addizionare nel seguente ordine : 15,14 ml di soluzione 60% di sodio lattato 1,7 grammi di sodio bicarbonato Sciogliere completamente. Controllare il pH con un pHmetro calibrato e aggiustare come si desidera. Filtrare il prodotto finale ricostituito usando un filtro da 0,2 µ , dentro contenitori sterili , risigillati. Stoccare i flaconi chiusi in refrigeratore a 2-8° C fino a 58 giorni. mHTF deve essere chiuso ermeticamente quando viene usato in un incubatore CO2 perevitare che il livello del pH sia minore di 7,0. Il terreno mHTF liquido è pronto all’uso come un mezzo di trasporto (riscaldare a 37° C se desiderato) per la raccolta di gameti umani e per il trasferimento embrionale in pazienti. Questo terreno è inoltre usato per le procedure in ambiente atmosferico (Ciò è dovuto alla capacità tampone dell’HEPES). Queste procedure includono il lavaggio dello sperma e Intracytoplasmatic Sperm Injection (ICSI). Per ulteriori dettagli sull’uso di questo prodotto, consultare le vostre proprie procedure di laboratorio e i protocolli che sono stati specificatamente sviluppati e ottimizzati per il vostro individuale programma medicale. Italiano 2/3 ISTRUZIONI DI STOCCAGIO E STABILITA Stoccare le bottiglie chiuse in refrigeratore a 2-8° C. Non congelare o esporre a temperature alte di 39° C. mHTF è stabile fino alla data di scadenza mostrata (riportata) sulla bottiglia quando stoccato direttamente. PRECAUZIONI E AVVERTIMENTI Non usare nessuna bottiglia di terreno che mostri evidenti sostanze particellari o torbidità . mHTF deve essere chiuso ermeticamente quando viene usato in un incubatore CO2 perevitare che il livello del pH sia minore di 7,0. Per evitare problemi di contaminazione, maneggiare usando tecniche in asepsi, e eliminare ogni eccesso di terreno che rimane nella bottiglia dopo che la procedura sia completata. mHTF contiene come antibiotico Gentamicina Solfato. Devono essere prese appropriate precauzioni per essere certi (avere la garanzia) che i pazienti non siano sensibilizzati a questo antibiotico. Italiano 3/3 APLICACIÓN El medio mHTF está diseñado para ser utilizado en Técnicas de Reproducción Asistida que incluyen la recuperación, manipulación y transferencia de gametos y embriones. CONTROL DE CALIDAD El Medio mHTF es un medio de cultivo filtrado a través de membrana y procesado en condiciones de esterilidad siguiendo unos procesos de manufacturación validados para conseguir un nivel de garantía de esterilidad (SAL) de 10-3. Cada lote de mHTF está testado para: Endotoxinas, por métodos LAL Biocompatibilidad por ensayos en embrión de ratón (MEA) Esterilidad, por el test de esterilidad USP <71> actual Todos los resultados están descritos en el Certificado de Análisis específico de cada lote, el cual se encuentra disponible bajo petición. SISTEMA DE TAMPONAMIENTO El Medio mHTF utiliza una combinación de 21mM HEPES (N-2hidroxietilpiperazina-N’-2-ácido etanesulfónico) y 4mM de bicarbonato sódico como sistema tampón. Este sistema proporciona un mantenimiento óptimo del pH en el rango fisiológico (7,2-7,4) y no necesita ser utilizado en un incubador de CO2. SUPLEMENTO PROTEICO El Medio mHTF no contiene componentes proteicos. Los protocolos generales de laboratorio incluyen la suplementación proteica al trabajar con este medio. La cantidad de suplemento proteico puede variar entre laboratorios y depende de la fase del proceso y/o desarrollo de los gametos y embriones. Consultar los protocolos propios de cada laboratorio. Español 1/3 INSTRUCCIONES DE USO Preparación del Medio mHTF en polvo: Para reconstituir el medio en polvo, vaciar el contenido completo del envase en un recipiente limpio que pueda contener un volumen de 5L. Añadir 5L de agua estéril apta para uso en técnicas de reproducción asistida (Irvine Scientific, Nº Catálogo 9307) y mezclar cuidadosamente. Añadir en el orden indicado: 15,14 mL de solución de lactato sódico al 60% 1,7 gr de bicarbonato sódico Mezclar cuidadosamente. Comprobar el pH con un pH metro calibrado y ajustar si se considera necesario. Filtrar el producto final reconstituido con un filtro estéril de 0,2µ m, en un envase estéril sellable. Conservar los envases cerrados refrigerados a 2ºC - 8ºC hasta 58 días. Las botellas con medio mHTF deben estar bien cerradas cuando se utilizan dentro de un incubador de CO2 para impedir descensos de pH a 7,0 o inferiores. EL medio mHTF líquido está preparado para ser usado como medio de transporte (precalentado a 37ºC si se desea), para la recuperación de gametos y para la transferencia de embriones a la paciente. Este medio está también indicado para procesos que se realicen en una atmósfera ambiental (gracias a la capacidad tamponadora del HEPES). Estos procesos incluyen el lavado de esperma y la inyección intracitoplasmática de esperma (ICSI). Para más detalles sobre la utilización de este producto, consulte los protocolos de trabajo de su propio laboratorio, los cuales han sido desarrollados y especialmente optimizados de acuerdo a su programa médico particular. Español 2/3 INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD Conserve las botellas cerradas refrigeradas entre 2ºC y 8ºC. No congele ni exponga a temperaturas superiores a 39ºC. El Medio mHTF es estable hasta la fecha de caducidad indicada en el envase, siempre que se conserve de acuerdo a las instrucciones recomendadas. PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS No utilice ninguna botella de medio con evidencias de contener partículas o turbidez. El mHTF debe estar en un recipiente herméticamente cerrado cuando se utilice dentro de un incubador de CO 2 para evitar valores de pH de 7,0 o inferiores. Para evitar problemas de contaminaciones, manipule el producto en condiciones de esterilidad y descarte el medio que quede en el envase al terminar cada proceso. El Medio mHTF contiene Sulfato de Gentamicina como antibiótico. Es conveniente adoptar las medidas necesarias para garantizar que la paciente no es sensible a este antibiótico. Español 3/3 UTILISATION mHTF est prévu à l’usage lors des procédés de procréation médicalement assistée incluant le recueil, la manipulation et le transfert des gamètes et des embryons. ASSURANCE QUALITÉ mHTF est un milieu de culture stérilisé par filtration et manipulé de façon aseptique selon des procédures de fabrication qui répondent au niveau 10-3 de stérilité (Sterility Assurance Level). Chaque lot de mHTF a subi les tests suivants : Le contenu en endotoxines par la méthode LAL. Test de bio-compatibilité par le test des embryons de souris. Stérilité par les tests de stérilité courants de la pharmacopée américaine (USP) <71> Les résultats de ces tests sont fournis dans un certificat d’analyses spécifique à chaque lot. SYSTÈME TAMPON mHTF utilise un système tampon composé de la combinaison de 21mM HEPES (N-2-Hydroxyethylpirerazine-N’-2-ethanesulfonic acid) et de 4mM bicarbonate de sodium. Ce système tampon offre un maintien optimum d’un pH d’ordre physiologique (7,2 à 7,4) et ne nécessite pas l’utilisation d’une étuve à CO2. ADDITION DE PROTÉINES mHTF ne contient pas de protéines. En pratique de laboratoire, ce milieu est généralement supplémenté en protéines. Le taux de protéines à ajouter varie selon les laboratoires et dépend du stade du traitement et/ou du développement des gamètes et des embryons. Consulter ses propres protocoles du laboratoire. Français 1/3 CONSEILS D’UTILISATION Préparation du mHTF en poudre: Pour reconstituer le milieu en poudre, vider le contenu entier du flacon dans un récipient propre de 5l. Ajouter 5l d’eau distillée (water for ART, Irvine Scientific, réf. 9307) et mélanger jusqu’à dissolution complète. Ajouter dans l’ordre : 15,14 ml de la solution lactate de sodium 60% 1,7 g de bicarbonate de sodium Mélanger jusqu’à dissolution complète. Vérifier le pH avec un pH mètre calibré et ajuster si nécessaire. Stériliser la solution ainsi obtenue en la filtrant à travers un filtre de 0,2 µ m dans un flacon stérile. Conserver les flacons fermés réfrigérés entre 2° et 8°C jusqu’à 58 jours. Si mHTF est préchauffée dans une étuve à CO2, les flacons devraient être hermétiquement fermés pour empêcher la baisse du pH en dessous de 7,0. Le milieu mHTF liquide est donc prêt à l’utilisation comme milieu de transport (préchauffé à 37°C si désiré) pour le recueil des gamètes humains et le transfert des embryons aux patientes. Ce milieu est aussi utilisé pour des procédés en atmosphère ambiante (grâce aux capacités du système tampon HEPES) comme le lavage du sperme ou l’injection intra-cytoplasmique des spermatozoïdes (ICSI). Pour plus de détails sur l’utilisation de ce produit, chaque laboratoire doit consulter ses propres procédures et protocoles spécialement développés et optimisés pour chaque indication médicale particulière. Français 2/3 CONSIGNES DE CONSERVATION ET STABILITÉ Conserver les flacons non entamés réfrigérés entre 2° et 8°C. Ne pas congeler ou exposer à des températures supérieures à 39°C. Conservé ainsi, ce produit est stable jusqu’à la date d’expiration indiquée sur les flacons. PRÉCAUTIONS ET MISE EN GARDE N’utiliser aucun flacon de milieu d’apparence trouble ou contenant des particules. Si mHTF est préchauffée dans une étuve à CO2, les flacons devraient être hermétiquement fermés pour empêcher la baisse du pH en dessous de 7,0. Pour éviter les problèmes de contamination, manipuler stérilement et ne pas réutiliser l’excès du milieu restant dans le fond des flacons entamés. mHTF contient l’antibiotique Sulfate de Gentamicine. Les précautions d’usage doivent être prises pour s’assurer que les patients ne présentent aucune sensibilité à cet antibiotique. Français 3/3 APLICAÇÃO O meio mHTF foi concebido para utilização em Técnicas de Reprodução Assistida que incluem a recolha, manipulação e transferência de gâmetas e embriões. CONTROLO DE QUALIDADE O meio mHTF é um meio de cultura filtrado através de membrana e processado em condições de esterilidade de acordo com os processos de manufactura validados para atingir um nível de garantia de esterilidade (SAL) de 10-3. Cada lote de meio mHTF é testado para: Endotoxinas, pelos métodos LAL Biocompatibilidade pelo Método do Embrião de Ratinho Esterilidade pelo teste de esterilidade actual da USP <71> Todos os resultados estão descritos no Certificado de Análise específico de cada lote. SISTEMA DE TAMPÃO O meio mHTF utiliza uma combinação de 21mM HEPES (N-2hidroxietilpiperazina-N’-2-ácido etanesulfónico) e 4mM de bicarbonato de sódio como sistema tampão. Este sistema proporciona a manutenção óptima do pH dentro dos parâmetros fisiológicos (7,2-7,4) e não necessita ser utilizado numa incubadora de CO2. SUPLEMENTO PROTEICO O meio mHTF não contém componentes proteicos. Os protocolos gerais de laboratório incluem a suplementação proteica ao trabalhar com este meio. A quantidade de suplemento proteico pode variar entre laboratórios e depende da fase do processo/ desenvolvimento dos gâmetas e embriões. Consultar os protocolos próprios de cada laboratório. Português 1/3 INSTRUÇÕES DE UTILIZAÇÃO Preparação do Meio mHTF em pó: Para reconstituir o meio em pó, verter o conteúdo total do frasco dentro de um recipiente limpo com uma capacidade de 5.0 litros. Adicionar 5.0 litros de água estéril apta para uso em técnicas de reprodução assistida. Utilize (Irvine Scientific Catálogo #9307) e agitar cuidadosamente. Adicionar na seguinte ordem: 15,14 mL de solução de lactato de sódio a 60% 1,7 gr de bicarbonato de sódio Agitar cuidadosamente. Comprovar o pH com um aparelho de medição de pH calibrado e ajustar se considerar necessário. Filtrar o produto final reconstituído com um filtro estéril de 0,2µm, num recipiente estéril selável. Conservar os recipientes fechados refrigerados entre 2ºC - 8ºC até 58 dias. Os recipientes com meio mHTF devem estar bem fechados quando se utilizam dentro de uma incubadora de CO2 para evitar valores de pH de 7,0 ou inferiores. O meio mHTF líquido está preparado para ser usado como meio de transporte (pré-aquecido a 37ºC se desejar), para a recuperação de gâmetas e para a transferência de embriões para a doente. Este meio está também indicado para processos que se realizem numa atmosfera ambiental (devido à capacidade tamponadora do HEPES). Estes processos incluem a lavagem dos espermatozóides e a Injecção Intracitoplasmática de Espermatozóides (ICSI). Para mais detalhes sobre a utilização deste produto, o laboratório deve consultar os seus próprios protocolos de trabalho, os quais foram desenvolvidos e optimizados especificamente de acordo com cada laboratório médico. Português 2/3 INSTRUÇÕES DE CONSERVAÇÃO E ESTABILIDADE Conserve os recipientes fechados refrigerados entre 2ºC e 8ºC. Não congele ou exponha a temperaturas superiores a 39ºC. O meio mHTF é estável até à data de expiração indicada no rótulo do recipiente, sempre que seja conservado de acordo com as instruções recomendadas. PRECAUÇÕES E ADVERTÊNCIAS Não utilize nenhum frasco de meio que apresente evidências de matéria em partículas ou turvação. O mHTF deve estar num recipiente bem fechado quando se utilize dentro de uma incubadora de CO2 para evitar valores de pH de 7,0 ou inferiores. Para evitar problemas de contaminação, manipule o produto em condições de esterilidade e descarte o meio que ficou em excesso no recipiente após o procedimento estar completo. O meio mHTF contém o antibiótico: Sulfato de Gentamicina. É conveniente adoptar as medidas necessárias para garantir que o doente não é sensível a este antibiótico. Português 3/3 European Representative MPIE Schutweg 13a 5145 NP Waalwijk, The Netherlands See instructions for use. 0050 2511 Daimler Street, Santa Ana, California 92705-5588 Telephone: 1 949 261 7800 • 1 800 437 5706 Fax: 1 949 261 6522 • www.irvinesci.com PN 40632 Rev. 4