uma solução de micronutrientes, a 4 litros de água
destilada.
Retirou-se 3 litros para um garrafão, ao qual se
adicionou 10 mL de “inóculo células Microcystis”.
Procedeu-se à homogeneização da solução.
Colocou-se em banho maria, a uma temperatura de
25ºC aproximadamente, e ligou-se a bomba de
arejamento.
De seguida, colocou-se uma fonte de luz (60W)
direccionado para a cultura.
Objectivos
Este trabalho teve como objectivo determinar a curva
de crescimento de uma estirpe de cianobactéria da
espécie Microcystis aeruginosa produtora de
microcistinas, nomeadamente da variante mais
comum que é a microcistina-LR, realizando uma
cultura laboratorial, durante um período de 18 dias.
Introdução
As cianobactérias, também conhecidas como algas
azuis-verdes,
são
organismos
procarióticos
unicelulares, coloniais ou multicelulares filamentosos
que apresentam algumas características do grupo
Algae: parede celular, pigmentos fotossintéticos e
capacidade de realizar fotossíntese. Assim, as
cianobactérias são microorganismos que, para
sobreviverem, apenas necessitam de água, CO2,
alguns minerais e luz. Nos ecossistemas de água doce,
a maioria das cianobactérias faz parte do
fitoplâncton,
sendo
produtores
primários,
contribuindo assim para a produtividade primária do
ecossistema.
Com o aumento da poluição e crescente eutrofização
dos meios dulciaquícolas, tem vindo a verificar-se um
aumento
de
densidade
populacional
de
cianobactérias – florações, ou blooms, cada vez mais
frequente, em todo o mundo e ao longo de todo o
ano. Estes fenómenos têm causado desequilíbrios
ecológicos graves que estão muitas vezes associados
à eutrofização das massas de água. As florações ou
blooms referem-se às ocorrências de populações
fitoplanctónicas em densidades superiores à média,
em determinado local (ca. 20 000 cél./ml em águas de
recreio e para consumo humano).
Retirou-se 1mL de “inóculo células Microcystis” para
um copo de precipitação, adicionou-se duas gotas de
soluto de Lugol e homogeneizou-se.
Realizou-se a contagem do número de células em
câmara de Neubauer.
Durante o período de 18 dias, retirou-se diariamente,
com excepção do fim-de-semana, 1mL de células
Microcystis, posteriormente, fixadas com 2 gotas de
soluto de Lugol, e realizou-se a quantificação na
câmara de Neubauer.
Resultado e Discussão
1) Identificação de Microcystis aeruginosa ao
microscópio óptico.
Figura 1 – Fotografias de células Microcystis
aeruginosa (Ampliação 40x).
Figura 2 – Fotografias de células Microcystis
aeruginosa com soluto de Lugol (Ampliação 40x).
Material e Método
2) Contagem do número de células.
Preparou-se o meio de cultura Z8 por adição de uma
solução rica em azoto (solução A), uma solução rica
em fósforo (solução B), uma solução de Fe-EDTA e
Na tabela 1, apresentam-se os valores obtidos do
número de células ao longo de 18 dias com intervalos
de dois dias correspondentes ao fim-de-semana.
Tabela 1 – Dados referentes à contagem do número
de células ao longo de 18 dias.
Tempo (dias)
1
2
3
6
7
8
9
10
13
14
15
16
17
20
21
22
23
24
Número de células/mL
7
7
8
12
13
14
16
18
20
20
20
20
20
3
0
0
0
0
3) Curva de crescimento da Microcystis.
Gráfico 1 – Avaliação do desenvolvimento da
Microcystis num meio Z8.
Dos dados obtidos, observou-se inicialmente um
período curto (aproximadamente, 2 dias) em que não
ocorreu crescimento. Esta fase designa-se de período
de latência.
Posteriormente, cerca de 6 dias após a primeira
contagem, verificou-se um crescimento constante do
número de células no meio, sendo que esta fase
corresponde à fase exponencial duma curva típica de
cerscimento de bactérias.
Passados 13 dias, já se verifica uma ausência de
crescimento, que se poderá dever, por exemplo, a
uma redução de nutrientes disponíveis no meio.
Nesta fase, diversas limitações dão origem a
alterações bioquímicas, que vão ser sentidas na fase
seguinte – fase de morte.
Assim, cerca de 18 dias após o ínicio da experiência
verifica-se uma diminuição drástica no número de
células no meio, o que como anteriormente
explicado, corresponde à fase de morte das células
pois o metabolismo celular já não pode ser mantido.