COLETA, DISTENSÃO E COLORAÇÃO DE SANGUE HEMATOLOGIA PROF. ADRIANO ANTES DA COLETA... IDENTIFICAÇÃO DO PACIENTE: conferir nome, sobrenome e data de nascimento Identificar o tubo antes da coleta Uso de EPI: luvas para a coleta e avental Todas as amostras de sangue devem ser consideradas como potencialmente infectantes! NA COLETA... Escolha da veia para fazer a flebotomia (punção)... Para a antissepsia da pele no local da punção: álcool 70% Garrote mantido até o fim da coleta Punção capilar em bebês Punção com agulha e seringa Punção com sistema a vácuo Punção capilar em adultos APÓS A COLETA A AGULHA... E... Aplicar pressão digital sobre o local puncionado, com algodão ou gaze, mantendo-se o braço esticado na horizontal, por 3 a 4 minutos. Anticoagulante preferido para o hemograma: Etilenoaminotetracético (EDTA) sódico ou potássico: um quelante de cálcio 1 a 2 mg de EDTA por ml de sangue. Permite uma mistura mais rápida e uma menor freqüência de coagulação indesejada. Não altera a morfologia celular. O anticoagulante heparina não é recomendado para hemograma, pois ela acaba destruindo os leucócitos. TRANSPORTE DA AMOSTRA... Em temperatura próxima a 5° C, com o mínimo de agitação. As distensões já realizadas em lâminas não devem ser transportadas refrigeradas , pois pode ocorrer hemólise pela umidade. PREPARO DA DISTENSÃO DE SANGUE EM LÂMINA... O ideal é fazer em até 6 horas após a coleta da amostra FIXAÇÃO DA DISTENSÃO DE SANGUE NA LÂMINA Para a fixação do sangue na lâmina antes da coloração é utilizado o álcool metílico. Dependendo do corante empregado não há a necessidade de fixador, pois o corante já é dissolvido no álcool metílico, por exemplo, a coloração de leishman. COLORAÇÃO DAS DISTENSÕES DE SANGUE EM LÂMINAS São utilizados corantes do tipo Romanowsky (ex: May-Grawald-Giemsa, Wright, Leishman) que contém uma mistura dos corantes: -Azur = cora o núcleo em azul - Eosina = cora o citoplasma em púrpura Azur – componente básico que cora em azul ou azul-violeta os ácidos nucléicos (fixa-se aos grupos fosfatos do DNA e RNA), as núcleoproteínas e aos grânulos dos basófilos. Eosina – corante ácido que cora em laranja a hemoglobina e os grânulos dos eosinófilos. basófilo eosinófilo