Citogenética em quelônios
Tiago Lucena da Silva
Introdução
Introdução
Pleurodira:
Criptodira:
Chelidae e
Pelomedusidae
Testudinoidea,
Trionychoidea e
Chelonioidea
Introdução
Chelonoidis carbonaria
C. carbonaria X C. denticulata
Geochelone hesterna ( Aufemberg
1971)
Morfologia
Citogenética

Cromossomos de aves e
répteis são muito
variáveis em termo de
tamanho e
morfologia,caracterizan
do-se por cariótipos
assimétricos, composto
por macro e
microcromossomos

Cariótipo de quelônios
apresentam grande
quantidade de
microcromossomos,
variando a proporção
dos mesmos entre os
grupos, apresentam
grande variação do n
cromossômico, podendo
ser encontrado de 26
até 96 cromossomos
Material e métodos
1. É coletado 3 a 5 ml de sangue venoso (arterial) em seringa
heparinizada com o máximo de assepsia.
2. Semeado 1 ml de sangue no meio de cultura de cariótipo em
ambiente asséptico em fluxo laminar.
Composição do meio de cultura
Soro bovino fetal
Antibióticos
Fitohemaglutinina
Meio de cultura
3. O meio de cultura é mantido em estufa à 37ºC por 72 horas.
4. Duas horas antes de completar as 72 horas , adicionar duas gts.
de colchicina .
5. Completar 72 horas na estufa.
6. retirada da cultura.
Material e métodos
Bandamentos cromossômicos




Detectar alterações cromossômicas
Parear os cromossomos homólogos
Elaborar mapas cromossômicos por
meio da técnica de FiSH
Comparar cariótipos de espécies
próximas buscando detectar possíveis
rearranjos cromossômicos averiguar as
mudanças produzidas pelo processo
evolutivo
Bandamento G


Segmentos cromossômicos que se
condensam mais cedo na prófase
(bandas escuras)
Segmentos cromossômicos que se
condensam mais tarde na prófase
(bandas claras)
Bandamento G
Bandas G - Claras


Dna rico em
citosina e guanina
Muitos genes
Bandas G- Escuras


Dna rico em
adenina e timina
Poucos genes
Bandamento C





Localiza a heterocromatina constitutiva
Solução de Hidróxido de bário (Básica)
Solução salina a alta temperatura
Fragmentação do DNA cromossômico
(Eucromatina)
Bandas escuras correspondentes a
heterocromatina
AG-NOR




Regiões responsáveis pela transcrição de RNA
ribossomal
Marca apenas as RONs que foram transcritas
durante a interfase anterior a metáfase
analisada
Pode não demonstrar todas as RONs
Estudos de comportamento nucleolar durante o
ciclo celular
AG-NOR
FISH / HIBRIDAÇÃO IN SITU-HIS
CMA3
Material e métodos
metacentrico
Submetacentrico
Acrocentrico
Perguntas ?