Fitohemaglutinina Purificada Fitohemaglutinina Purificada PT R30852801..........................2mg 1. UTILIZAÇÃO PREVISTA A fitohemaglutinina (PHA) é um agente mitogénico e tem sido utilizada em estudos que envolvem a permeabilidade das células. 2. RESUMO E EXPLICAÇÃO A fitohemaglutinina (PHA), derivada de extractos de sementes de Phaseolus vulgaris, foi utilizada durante muitos anos, devido às suas propriedades combinadas de causar eritroaglutinação e estimular a mitose progressiva de linfócitos na cultura de células. As actividades aglutinantes e mitogénicas parecem estar associadas às fracções de proteínas dos extractos parcialmente purificados, os quais têm propriedades físico-químicas suficientemente semelhantes para causar dificuldades nas tentativas de os separarem. Um outro factor que complica os procedimentos de fraccionamento tem sido o método lento e impreciso de ensaio para a actividade mitogénica. Os extractos relativamente purificados, seleccionados devido à sua capacidade de produzir boas imagens mitóticas (como na Fitohemaglutinina de Grau Reagente) têm provado ser inteiramente satisfatórios para utilização na cultura de linfócitos de rotina para estudos de cromossomas. A fitohemaglutinina (PHA) provou ser de interesse no estudo da resposta imunológica, cinética de linfócitos e dinâmica da medula óssea e, para estes fins é preferível que seja utilizada uma substância com qualidades de reprodutibilidade mais parecidas e potência conhecida. A Fitohemaglutinina Purificada é uma fracção de proteínas altamente refinada, liofilizada de extractos de sementes de Phaseolus spp. seleccionados, nos quais a actividade mitogénica específica e a relação de actividade mitogénica/hemoaglutinação têm sido aumentadas a um factor de cerca de 100/1 durante a purificação. 3. REAGENTE CONTEÚDO DO KIT Fitohemaglutinina (Purificada) 2 mg liofilizada DESCRIÇÃO, PREPARAÇÃO PARA UTILIZAÇÃO E CONDIÇÕES DE ARMAZENAMENTO RECOMENDADAS Consultar igualmente a secção Avisos e Precauções. O material liofilizado e congelado, quando armazenado entre 2 e 8°C, conservará a sua eficácia máxima pelo menos até à data indicada no rótulo do frasco. Uma fracção de proteína altamente refinada, liofilizada e congelada, de extractos de sementes de Phaseolus spp. seleccionados. Cada frasco contém o peso determinado de fitohemaglutinina (PHA), seco a partir de um pequeno volume de solução salina tamponada, sem conservantes. O reagente pode ser reconstituído para qualquer volume desejado em solução salina esterilizada (se tamponada, preferivelmente a um pH entre 6,5 e 8) ou água destilada, utilizando uma seringa hipodérmica descartável esterilizada. A tampa do frasco deve ser esterilizada limpando-a com éter e a agulha deverá perfurar a parte central da tampa de borracha e deve ser segurada na vertical durante a reconstituição. Se desejado, o risco de contaminação bacteriana da Fitohemaglutinina reconstituída pode ser minimizado adicionando algumas gotas de clorofórmio à solução: alternativamente, os antibióticos ou qualquer um dos conservantes usuais podem ser adicionados se a utilização proposta do reagente o permitir. O material reconstituído pode ser armazenado a uma temperatura entre -15°C e -25°C durante seis meses ou entre 2 e 8°C durante duas semanas, sem perda de actividade (na ausência de contaminação bacteriana). 4. AVISOS E PRECAUÇÕES Para uso profissional apenas. Consultar a folha de dados de segurança do fabricante e o rótulo do produto para obter mais informações sobre componentes potencialmente perigosos. INFORMAÇÕES SOBRE SAÚDE E SEGURANÇA 4.1.1 Evitar ingerir os reagentes. PRECAUÇÕES ANALÍTICAS 4.2.1 Não utilizar para além do prazo de validade indicado. Se desejado, o risco de contaminação bacteriana da Fitohemaglutinina reconstituída pode ser minimizado adicionando algumas gotas de clorofórmio à solução: alternativamente, poderão ser adicionados antibióticos ou qualquer um dos conservantes usuais se a utilização proposta dos reagentes o permitir. 4.2.2 Embora a Fitohemaglutinina Purificada possa ser utilizada para a cultura de linfócitos de rotina, as condições necessárias para a sua utilização bem-sucedida são muito mais rigorosas do que aquelas necessárias para os reagentes menos puros. Em particular, a concentração de fitohemaglutinina (PHA) que fornece uma estimulação de linfócitos máxima sem inibição ou toxicidade situamse dentro de limites muito restritos. A utilização de Fitohemaglutinina de Grau Reagente é recomendada para todos os fins que não requeiram especificamente uma apresentação mais refinada do mitogénio. Legenda dos Símbolos Número de Catálogo Consultar as instruções para utilização Limites de temperatura Código de lote Prazo de Validade Fabricante IFU X7806, Revisado abril 2013 Impresso no Reino Unido Remel Europe Ltd. Clipper Boulevard West, Crossways Dartford, Kent, DA2 6PT UK Para obter assistência técnica, entrar em contacto com o distribuidor local.