Aplicabilidade do Fixador SAF à Técnica de TF-Test®
Visando preservar a morfologia de protozoários e prevenir o desenvolvimento de
alguns ovos e larvas de helmintos intestinais, as amostras fecais coletadas que não forem
entregues ao laboratório de imediato deverão preferencialmente ser preservadas. Vale
relatar que, fezes coletadas sem o uso de líquidos preservadores devem respeitar um tempo
de coleta e entrega ao laboratório, obedecendo os seguintes critérios: a) em caso de
amostras líquidas, o tempo para a realização do exame não deve ultrapassar a 30 minutos
após a coleta; b) já para amostras pastosas, estas devem ser examinadas em um tempo de
até uma hora após evacuação; e c) para amostras sólidas, podendo ser examinadas em um
período de até 24 horas da evacuação.
Vários são os líquidos preservadores empregados para a coleta de material fecal,
destacando-se entre eles: solução neutra de formalina; mertiolato-iodo-formaldeído (MIF);
acetato de sódio-ácido acético-formaldeído (SAF)*; álcool polivinílico (APV); schaudinn; e
fenol-álcool-etílico-formaldeído(PAF). Esses líquidos, quando empregados em rotinas
laboratoriais, apresentam vantagens e desvantagens, contudo, é a solução neutra de
formalina que mostra melhores resultados para o diagnóstico de protozoários e helmintos
intestinais, apesar de apresentar incompatibilidade para o uso de coloração permanente com
hematoxilina férrica, tricrômico e tionina (Garcia, 2001; De Carli, 2001).
Para o desenvolvimento da técnica de TF-Test® , o invento proposto amparou-se no
procedimento original de concentração de Telemann (Telemann, 1908) e variações
derivadas de Ritchie (Ritchie, 1948), Yang (Yang, 1977) e Young (Young, 1979). Vale
esclarecer que, nestas condições de variações, o procedimento de centrífugo-sedimentação
é praticado pela formalina-éter etílico ou pela formalina-acetato de etila. Por vários
motivos técnico/científicos, que não cabe aqui estender, o procedimento adotado para a
técnica de TF-Test® foi o de centrífugo-sedimentação pela formalina-acetato de etila.
Alguns Laboratórios de Análises Clínicas dão preferência em trabalhar o líquido
preservador SAF (Acetato de sódio – ácido acético – formaldeído) em suas rotinas
laboratoriais. Sendo assim, na tentativa de dar flexibilidade à técnica de TF-Test®,
decidimo-nos, amparado em melhorias praticadas por Yang e Scholten (Yang & Scholten,
1977), acrescentar à técnica o líquido preservador SAF em sua fase de coleta de amostras
fecais. O líquido preservador SAF foi originalmente descrito por Junod (Junod, 1972) e
desenvolvido posteriormente por outros autores. Apresenta um bom rendimento para o
diagnóstico de trofozoítos, cistos, oocistos e esporos de protozoários, além de ovos de
helmintos, por meio de esfregaços permantes e preparações concentradas a fresco. Todavia,
vale ressaltar que, alguns autores sugerem não ser um preservador apropriado para a
detecção de larvas de nematelmintos intestinais, que apresenta resultados regulares de
coloração quando corados pelo tricrômico, além de ser pouco recomendado para o uso com
métodos de coloração no diagnóstico de parasitos emergentes e oportunistas (De Carli,
2001). Há ainda autores que citam a incompatibilidade do SAF e coloração por tricrômico
(Garcia, 1999).
Seguindo critérios da literatura científica, quando utilizado na técnica de TF-Test® ,
o SAF deverá substituir a solução neutra de formalina no envase dos tubos coletoresusuário, sendo que, o restante do protocolo, seja ele, de coleta e de processamento
laboratorial, deverá permanecer o mesmo, como segue logo abaixo.
SAF* - Acetato de sódio triidratado – ácido acético glacial – formaldeído 37-40%
Técnica de TF-Test® com o emprego do líquido preservador SAF
Referências Bibliográficas
Carrol MJ. Collection and Preservation of Fecal Specimes: Collection of Fresh Specimes.
In: Insenberg HD, ed. Clinical Microbiology Procedures Handbook. Washington DC,
ASM Press, p.7.2.1.1-7.2.1.2. v.2, 1992.
De Carli GA. Parasitologia Clínica: Seleção de Métodos e Técnicas de Laboratório para o
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Garcia LS. Diagnostic Medical Parasitology. ASM, Washington DC, USA, 5th edition,
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1999.
Gomes JF, Hoshino-Shimizu S, Dias LCS, Araújo AJUS, Castilho VLP, Neves
FAMA. Evaluation of a Novel Kit (TF-Test) for the Diagnosis of Intestinal Parasitic
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Junod C. Technique coprologique nouvelle essentiellement destinée a la concentration des
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Rey L. Parasitologia. Guanabara Koogan, Rio de Janeiro, 4a edição, 2008.
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Telemann W. Eine methode zur erleichterung der auffindung von parasiteneiern in den
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Young KH, Bullock SL, Melvin DM et al. Ethyl acetate as substitute for diethyl ether in
the formalin-ether sedimentation procedure. J Clin Microbiol, 10:852-853, 1979.
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Acetato de Sódio – Ácido Acético – Formaldeído (SAF)