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SHBG
1. INTRODUÇÃO / FINALIDADE DO MÉTODO
A SHBG é uma proteína sintetizada a nível hepático, tendo como função o transporte plasmático de alguns
hormônios sexuais. Uma das propriedades mais importante do SHBG é sua alta afinidade por esteróides,
especificamente os C18, C19 e grupos 17-hidroxi. A ligação dos esteróides com SHBG é dependente de
temperatura e pH. Os três esteróides que tem maior avidez pelo SHBG são: dihidrotestosterona, testosterona
e estradiol. Uma quantidade muito pequena desses esteróides é encontrada livre no fluido biológico; a maior
parte está ligada ao SHBG e albumina. Estas duas frações, que são, livre e ligada, existem em um estado de
equilíbrio dinâmico. Quando os níveis de SHBG mudam, uma mudança notável ocorre em ambos estados do
hormônio (livre e ligado).
Ao longo da vida o SHBG aumenta até os 80 anos em ambos os sexos. Durante o ciclo menstrual, o SHBG não
parece variar muito, entretanto, de acordo com a literatura, a concentração de SHBG é elevada na fase lútea.
Durante a gestação o nível de SHBG aumenta rapidamente ate cerca da 30ª semana de gestação.
Muitos agentes ou condições afetam o nível de SHBG. Estrógenos e hormônios tireoideanos, causam um
aumento na concentração plasmática de SHBG, já andrógenos, hormônio do crescimento, prolactina, insulina,
obesidade e níveis aumentados lipídios, causam uma queda na concentração plasmática de SHBG.
2. NOME DO TESTE E SINONÍMIAS
SHBG, SGB, Proteína Ligadora de Hormônios Sexuais, Testosterona Livre.
3. ABRANGÊNCIA
Setor de Imunoquímica.
4. PRINCÍPIO DO MÉTODO
O SHBG IMMULITE 2000 é um imunoensaio enzimático competitivo e quimioluminescente de fase sólida. A
fase sólida (esfera) está revestida com anticorpo de coelho policlonal anti-SHBG. A fase líquida consiste em
fosfatase alcalina (intestino de vitelo) conjugada com SHBG.
A amostra do paciente e o reagente ficam incubando em conjunto com a esfera revestida durante 30 minutos.
Durante esse período, o SHBG é conjugado com enzimas do reagente por um número limitado de locais de
ligação do anticorpo na esfera. A amostra do paciente e o conjugado enzimático não ligados são eliminados
por sucessivas lavagens. Por último, o substrato quimioluminescente é adicionado ao tubo de reação que
contém a esfera, sendo produzido um sinal proporcional à quantidade de enzima ligada.
5. APLICAÇÃO CLÍNICA
O aumento do nível de SHBG ocorre em homens com hipogonadismo, hipertiroidismo, doença no fígado
causada por álcool, cirrose biliar primaria (em mulheres), anorexia nervosa (em mulheres) e a queda dos
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níveis de SHBG ocorrem em mixedema, hiperprolactinemia (em mulheres), acromegalia por terapia hormonal,
obesidade e hiperplasia adrenal congênita.
6. AMOSTRA
a) Tipo de amostra:
Usar soro. Não usar plasma pois o fibrinogênio pode causar aglutinação inespecífica.
b) Quantidade mínima de amostra necessária:
Quantidade ideal recomendado para o tubo.
c)
Restrições e critérios para rejeição de amostras:
Presença de hemólise, lipemia intensa ou turbidez acentuadas.
d) Condições de acondicionamento das amostras inclusive seu período de guarda:
Estável por até 2 dias se armazenado de 2º à 8ºC ou 30 dias em -20°C.
e) Procedimentos de tratamento ou pré-tratamento da amostra:
Não se aplica.
f)
Preparo do paciente:
Conforme o PO de Orientações de preparo e coleta de amostras biológicas (cód. PO-LB-CO-005).
g) Transporte da amostra:
Vide o PO Manuseio de Transporte de Amostras Biológicas (cód. PO-LB-CO-006).
7. BIOSSEGURANÇA
Utilizar o EPI (Equipamento de Proteção Individual) comum a toda área técnica sendo eles: jaleco, luva, pro-pé
e touca, conforme descrito no PO Orientações de Biossegurança (Cód. PO-LB-CQ-001) em vigor.
8. MATERIAIS E EQUIPAMENTOS
a) Equipamentos
IMMULITE 2000 – Siemens.
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Centrifuga
b) Materiais
Pipetas automáticas e ponteiras
Cubetas de reação
c) Reagentes:
Reagente principal
Pérolas de SHBG (L2SH12): esferasas revestidas com anticorpo monoclonal de murino anti-SHBG.
Reagente de SHBG (L2SHA2): Contém 11,5 mL de fosfatase alcalina (de intestino de vitela) conjugado com
Anticorpo policlonal de coelho anti-SHBG em tampão, com conservante.
OBS:
1) Os reagentes são estáveis ate a data de expiração, ou quando armazenada em +2°C a +8°C. Todos os
reagentes, calibradores e controles devem estar à temperatura ambiente para serem usados; conter a data de
recebimento no setor e a data de abertura para uso, com a rubrica do colaborador responsável;
2) os materiais e reagentes acima mencionados são solicitados ao responsável pelo almoxarifado. A
rastreabilidade dos produtos do Almoxarifado deve ser registrada no formulário Rastreabilidade de
Produtos/Reagentes (cod.LAB-017-VR01).
9. CALIBRAÇÃO
De acordo com o PE de Operação do IMULLITE 2000 E VERSACELL (Cód. PE-LB-IQ-003).
A calibração deve ser realizada quando houver troca de lote do calibrador, troca de lote do reagente, de
acordo com o especificado pelo fabricante, ou sempre que os limites de tolerância dos controles forem
ultrapassados, necessitando de calibração e ajuste.
10. CONTROLE DE QUALIDADE
a) Controle de Qualidade Interno
Conforme descrito no Plano da qualidade do setor de Imunoquimica (Cód. PQ-LB-IQ-001).
b) Controle de Qualidade Externo
Para o analito SHBG o laboratório participa de programas de proficiência nacionais PNCQ e CONTROLLAB.
Conforme Plano da qualidade do setor de Imunoquimica (Cód. PQ-LB-IQ-001)
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11. PROCEDIMENTO TÉCNICO
Ver procedimento de calibração e operação do PE do IMULLITE 2000 E VERSACELL (Cód. PE-LB-IQ-003).
a)Limites de detecção/ sensibilidade: 0,02 nmol/l.
b)Linearidade: 180 nmol/l.
c)Intervalo reportável (CRR): 0,02 a 180 nmol/l . Diluir a amostra até obter resultado dentro da linearidade. A
diluição deve ser feita com água destilada e repetir a medição. O valor encontrado deve ser multiplicado pelo
fator utilizado.
d)Valores críticos: Não se aplica.
e) Especificidade: não se aplica.
f) Carryover: Verificação do sistema interno de pipetagem, escolha de um soro alterado e analito seguido da
passagem do branco. Peridiocidade de 6 em 6 meses procedimento descrito no formulário Controle de
Carryover de Equipamento (cód. LAB-093-VR01).
12. CÁLCULOS
Os resultados são fornecidos pelo IMMULITE 2000, calculados em relação aos valores obtidos na curva de
calibração que utiliza um calibrador específico como padrão. Os resultados são fornecidos em valores
quantitativos na unidade nmol/L.
13. REGISTROS DOS RESULTADOS
Resultados interfaceados e armazenados pelo sistema Centralink, conforme PO SOFTWARE ADVIA
CENTRALINK (cód. PO-LB-CT-002).
14. PROCEDIMENTOS EM CASO DE RESULTADOS ANORMAIS
Verificam-se dados clínicos, medicamentos e histórico do paciente. Se necessário o ensaio é repetido e
informa-se no laudo analítico que o resultado foi repetido e confirmado na amostra. Comunicar ao medico
que solicitou por via telefônica, os resultados discrepantes e anotar no formulário Programa de Diagnóstico
Laboratorial Baseado em Evidências (cód. LAB-121-VR01).
15. VALORES DE REFERÊNCIA
Mulheres (não grávidas): 18 – 144 nmol/L.
Homens: 10 – 57 nmol/L.
Fonte: ELMLINGER, MW, et al. Reference ranges for serum concentrations of lutropin (LH), follitropin (FSH),
estradiol (E2), prolactin, progesterone sex hormone binding globulin (SHBG), cortisol and ferritin in neonates
children and young adults. Clin Chem Lab Med 2002;40(11):1151-1160.
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16. INTERFERÊNCIAS
Amostra lipêmicas (> 5000 mg/dL de triglicerídios), hemolisadas (> 384 mg/dL de hemoglobina) ou ictéricas (>
20 mg/dL de bilirrubina) interferem no diagnóstico.
Os fatores pré analíticos devem ser seguidos para garantia da exatidão do exame. A realização de questionário
prévio pode identificar os elementos pré analíticos que podem interferir nos resultados.
Problemas técnicos que possam ocorrer na realização da rotina dos exames devem ser analisados conforme
informações no plano da qualidade do setor de Bioquímica. Sempre que necessário os resultados serão
analisados de acordo com a indicação clinica e/ou história do paciente.
17. DOCUMENTOS DE REFERÊNCIA
a) Bibliografia
ELMLINGER, MW, et al. Reference ranges for serum concentrations of lutropin (LH), follitropin (FSH), estradiol
(E2), prolactin, progesterone sex hormone binding globulin (SHBG), cortisol and ferritin in neonates children
and young adults. Clin Chem Lab Med 2002;40(11):1151-1160.
BAHIA, Luciana et al. Interrelações entre SHBG e esteróides sexuais com medidas antropométricas, pressão
arterial e lipídeos em mulheres com e sem diabetes mellitus tipo 2. Arquivos Brasileiros Endocrinologia
Metabólica, v. 44, n.3, p. 239-247, 2000.
b) Documentos Complementares
IMMULITE 2000 SHBG, Instruções de uso, SIEMENS HEALTHCARE DIAGNOSTIC
PO de Orientação de Preparo e Coleta de Amostras Biológicas (cód. PO-LB-CO-005).
PO Manuseio de Transporte de Amostras Biológicas (cód. PO-LB-CO-006).
PO de Orientações de Biossegurança (cód. PO-LB-CQ-001)
Plano da qualidade do setor de Imunoquimica (Cód. PQ-LB-IQ-001)
PE de Operação do IMULLITE 2000 E VERSACELL (Cód. PE-LB-IQ-003).
PO Software ADVIA Centralink (cód. PO-LB-CT-002).
18. HISTÓRICO DAS REVISÕES
Pg.
Natureza da Revisão
Data da Revisão
Versão
Responsáveis
Procedimento adequado para atender ao item 5.3 da
versão 2013
01/08/2014
01
Fernanda Seixas
1-6
Procedimento adequado para atender ao item 5.3
da Norma PALC, versão 2013 Após Pré auditoria.
02/01/2015
02
Fernanda Seixas
1-6
Procedimento revisado e sem alterações.
02
Luciana Calmon
1-6
22/10/2015
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