BIOSCOT®
Anti-Lea Linha celular: GA2
Código do produto: NB
IgA monoclonal murina
Reagente de determinação de grupos sanguíneos
Para técnica em tubo
C
IVD
APLICAÇÃO
O Anti-Lea da BIOSCOT é um reagente de determinação de grupos
sanguíneos composto por IgA monoclonal murina (linha celular GA2),
que deteca o antigénio Lea testado pela técnica em tubo. Este reagente
foi concebido para ser utilizado por operadores com formação em
técnicas sorológicas.
INTRODUÇÃO
O sistema de grupos sanguíneos de Lewis
Tal como no caso dos antissoros de Lewis convencionais, a utilização
deste reagente monoclonal Anti-Lea de determinação de grupos
sanguíneos permite classificar os eritrócitos em um de três fenótipos,
Le(a+b-), Le(a-b+) e Le(a-b-). O fenótipo Le(a+b+) é extremamente raro,
mas existe na população geral.
A aglutinação dos eritrócitos com este reagente indica a presença do
antigénio adequado na superfície dos eritrócitos. Os antigénios de
Lewis também estão presentes no soro e em outros fluidos corporais.
As células de recém-nascidos não expressam os antigénios de Lewis
em quantidade suficiente para serem aglutinadas por este reagente e
serão, portanto, Le(a-b-).
PRINCÍPIO DO REAGENTE
Quando utilizado segundo a técnica recomendada, este reagente causa
aglutinação (formação de aglomerados) dos eritrócitos portadores do
antigénio específico (teste positivo). A não aglutinação dos eritrócitos
demonstra a ausência do antigénio específico (teste negativo).
Este reagente foi otimizado para ser utilizado pela técnica recomendada
sem posterior diluição ou adições.
Este produto é fornecido filtrado com um filtro de 0,22 μm.
MATERIAIS
O Anti-Lea, de código de produto NB, é constituído por anticorpos IgA
monoclonais murinos, provenientes da linha celular GA2, numa solução
tampão com potenciadores químicos macromoleculares. Este reagente
contém azida de sódio a 0,1% (p/v) e material de origem bovina.
Cada frasco (2 ml) contém material suficiente para aproximadamente
40 testes.
PRECAUÇÕES
1. Todos os produtos de origem sanguínea devem ser tratados como
potencialmente infeciosos. Deve ter-se cuidado na utilização e
eliminação de cada recipiente e do respetivo conteúdo.
2. Este reagente contém azida de sódio a 0,1% (p/v). A azida de
sódio pode ser tóxica por ingestão e pode reagir com a canalização
de chumbo ou de cobre, formando sais altamente explosivos. Ao
eliminar, deixe correr uma grande quantidade de água.
3. Este produto deve ser transparente. A turvação pode indicar
contaminação bacteriana. Este reagente não deve ser utilizado
caso exista precipitado, gel de fibrina ou partículas.
4. Este reagente destina-se apenas ao diagnóstico in vitro realizado
por profissionais.
5. A fonte do material bovino é aprovada pela USDA ou é proveniente
de fontes cuja informação de origem está disponível. Os animais
dadores foram inspecionados e certificados como estando isentos
de doenças e são considerados como tendo baixo risco de TSE
(encefalopatia espongiforme transmissível).
6. Este produto deve ser eliminado por imersão de um dia para o
outro em desinfetantes em concentrações adequadas ou por
esterilização em autoclave.
CONSELHO PARA OS UTILIZADORES
Recomenda-se o teste de um controlo positivo e um controlo negativo
em paralelo com cada lote de testes. Os testes têm de ser considerados
inválidos se os controlos não mostrarem as reações esperadas.
Não é necessário utilizar um controlo de reagente em simultâneo
com todos os testes que empregam este reagente. A utilização de um
controlo de reagente, tal como o Monoclonal Control da BIOSCOT
(código de produto: TT), apenas é recomendada na tipagem de
eritrócitos de doentes em que se tenha determinado a presença de
autoanticorpos ou anomalias de proteínas. Neste caso, deve testar-se o
controlo em simultâneo com o reagente.
Este reagente foi caracterizado através de procedimentos recomendados
nestas instruções de utilização, pelo que a sua adequação para
utilização em outras técnicas tem de ser determinada pelo utilizador.
Em caso de alterações no desempenho analítico do dispositivo ou de
danos na embalagem, por favor contacte o departamento de Garantia
da Qualidade (Quality Assurance) da Millipore (UK) Ltd.
CONSERVAÇÃO
Conserve o produto aberto/não aberto a uma temperatura de 2-8 °C até
ao fim do prazo de validade indicado no respetivo rótulo.
A conservação do produto a uma temperatura incorreta, como, por
exemplo, a uma temperatura superior, ou a congelação e descongelação
repetidas pode resultar em perda acelerada da atividade do reagente.
COLHEITA DE AMOSTRAS
Não é necessária preparação especial do doente antes da colheita
de amostras. A amostra deve ser colhida para recipientes com o
anticoagulante EDTA. A amostra deve ser testada o mais rapidamente
possível após a colheita. Se ocorrer um atraso nos testes, conserve a
amostra a uma temperatura de 2-8 °C. As amostras que apresentem
hemólise ou contaminação microbiana visível não devem ser testadas
com estes reagentes. A conservação das amostras a uma temperatura
incorreta pode originar resultados falsos positivos ou falsos negativos.
MATERIAIS NECESSÁRIOS MAS NÃO FORNECIDOS
Técnica em tubo:
Tubo de ensaio
Soro fisiológico isotónico/normal
Cronómetro
Centrifugadora (1500 g)
TÉCNICA RECOMENDADA
1. TÉCNICA EM TUBO
1.1 Prepare uma suspensão de eritrócitos de teste a 3-5% em soro
fisiológico normal/soro fisiológico isotónico.
1.2 Adicione 1 gota (50 μl) da suspensão de eritrócitos a testar num
tubo de ensaio devidamente identificado.
1.3 Adicione 1 gota (50 μl) de reagente Anti-Lea.
1.4 Centrifugue durante 20 segundos a 1500 g.
1.5 Agite suavemente o tubo para desalojar os eritrócitos e examine
macroscopicamente, verificando se existe aglutinação.
LIMITAÇÕES
Não se pode utilizar células modificadas por enzimas proteolíticas, pois
ocorre agregação não específica.
Com amostras de sangue mais antigas é possível que se obtenham
reações mais fracas.
Os eritrócitos que tenham um teste de antiglobulina direto (DAT) positivo
podem dar origem a resultados falsos. Recomenda-se a utilização
do controlo monoclonal da BIOSCOT (código do produto: TT) para a
deteção destes resultados potencialmente falsos positivos.
Poderão ocorrer resultados falsos negativos ou falsos positivos através
da contaminação de materiais de teste ou de qualquer desvio da técnica
recomendada.
CARACTERÍSTICAS DO DESEMPENHO
O reagente de determinação de grupos sanguíneos de código do
produto NB, IgA monoclonal murina Anti-Lea (linha de células GA2), foi
testado pela técnica recomendada com amostras clínicas, de dadores
e de recém-nascidos, colhidas em EDTA. A população de amostras foi
representativa dos principais fenótipos. O número total de testes (n)
e a sensibilidade e especificidade calculadas para esta técnica são
apresentados a seguir:
Anti-Lea Código do produto NB
TÉCNICA
Tubo
Sensibilidade
Especificidade
n
%
n
%
299
100
1318
100
Definições a partir das especificações técnicas comuns (CTS):
Sensibilidade do diagnóstico: A probabilidade de o dispositivo originar um
resultado positivo na presença do marcador-alvo.
Especificidade do diagnóstico:A probabilidade de o dispositivo originar um
resultado negativo na ausência do marcador-alvo.
BIBLIOGRAFIA
1. Guidelines for the Blood Transfusion Services in the United
Kingdom. 5th Edition 2001. The Stationary Office.
Millipore (UK) Ltd
Fleming Road
Kirkton Campus
Livingston, EH54 7BN
Reino Unido
Tel.: +44 (0)1506 404000 Fax: +44 (0)1506 404001
PI208/b
2014-09