para inversão
de microtubos
SILVA JBC; QUEZEDO-DUVAL AM; SILVA DR. Equipamento
2008. Equipamento
para inversão
de microtubos. Horticultura Brasileira 26: S4642-S4646.
EQUIPAMENTO PARA INVERSÃO DE MICROTUBOS
1
2
3
João Bosco C. Silva , Alice Maria Quezado-Duval , Débora Regina Silva
1
Embrapa Hortaliças – Caixa postal 218, CEP 70.359.970 Brasília-DF e-mail: [email protected]; Eng.
o
2
a
a
3
Agr . Pesquisador fitotecnista, Eng . Agr . Pesquisadora de Fitopatologia, Estagiária de agronomia da FTB,
Brasília.
RESUMO
Entre os procedimentos para a
extração de DNA de amostras diversas está
a inversão contínua de tubos de
microcentrífuga, de maneira lenta, por um
período relativamente longo. A inversão
manual, além de não ser padronizada em
relação à intensidade do movimento,
freqüência e duração, impede que o
laboratorista aproveite este tempo para
realizar outras atividades. A mecanização do
procedimento permite a realização do
trabalho simultâneo com até cem amostras,
com total uniformidade de movimento e
controle do tempo. O equipamento para
inversão é constituído por suporte giratório
onde é fixada uma bandeja com os tubos. O
giro é executado por um motor elétrico com
redutor de velocidade, construído para girar a
40 rotações por minuto. A bandeja de tubos é
uma placa metálica contendo 100 furos com
diâmetro ligeiramente superior ao diâmetro do
tubo, mas inferior ao diâmetro da sua tampa
e distanciados entre si o suficiente para que
as tampas dos tubos não se toquem. Os tubos
são colocados verticalmente na bandeja e o
conjunto é inserido no suporte giratório. Duas
molas instaladas nas laterais do suporte
prendem a bandeja e impede a sua
movimentação durante o movimento. O motor
é instalado com eixo na horizontal e este
trespassa a estrutura de fixação, para fazer
girar o suporte contendo a bandeja de tubos.
Na instalação elétrica do motor, além do
interruptor de energia, um temporizador
controla o tempo de funcionamento do
aparelho. Todos os detalhes da construção do
equipamento estão disponíveis e as peças são
facilmente encontradas no mercado.
PALAVRAS-CHAVE: extração de DNA,
equipamento para Biologia Molecular.
ABSTRACT
Device for microtubes inversion
During DNA extraction of diverse
samples is mandatory a continuous tube
inversion steps, which spends a relative long
time. The manual inversion is not standardized
regarding the movement intensity, frequency
and duration, and prevents the laborer using
this time to carry out other activities. The device
allows the mechanization of the work
simultaneously with a hundred samples, with
complete uniformity of movement and control
of time. The equipment is made up of rotating
support which is fixed a tray containing tubes.
The rotation is done by an electric motor with a
speed reducer, running at 40 revolutions per
minute. The tray of tubes is a metal plate
containing 100 holes with a diameter slightly
greater than the diameter of the tube, but less
than the diameter of its cover and the distance
between holes enough for not touching the
cover of tubes. The tubes are placed vertically
in the tray and than is inserted into the rotating
support. Two springs installed on the sides of
the tray prevent their movement during the
movement. The engine is installed with the
Hortic. bras., v. 26, n. 2 (Suplemento - CD Rom), jul-ago. 2008
S 4642
Equipamento para inversão de microtubos
horizontal axis and it pass across the structure of
attachment, to rotate the tray containing into the
support of tubes. In the installation of electric motor,
besides the switch of energy, a timer controls the
time of operation of the device. All details of the
construction equipment are available and the parts
are easily found on the market.
KEYWORDS: DNA extraction, Molecular
Biology equipment.
INTRODUÇÃO
Entre os procedimentos para a extração de DNA de amostras diversas está a inversão
contínua de tubos de microcentrífuga, de maneira lenta, por um período relativamente longo
(Sambrook et al, 1989, Ausubel et al, 2002). A inversão manual, além de não ser padronizada
em relação à intensidade do movimento, freqüência e duração, impede que o laboratorista
aproveite este tempo para realizar outras atividades. A mecanização do procedimento permite
a realização do trabalho simultâneo com até cem amostras, com total uniformidade de
movimento e controle do tempo.
MATERIAL E MÉTODOS
O equipamento é constituído por suporte giratório onde é fixada uma bandeja com os
tubos de 2,5 mL de capacidade (Figura 1). O giro é executado por um motor elétrico com
redutor de velocidade, construído para girar o eixo a 40 rotações por minuto. A bandeja de
tubos é uma placa metálica contendo 100 furos com diâmetro ligeiramente superior ao diâmetro
do tubo, mas inferior ao diâmetro da sua tampa e distanciados entre si o suficiente para que
as tapas dos tubos não se toquem. Os tubos são colocados verticalmente na bandeja e o
conjunto é inserido no suporte giratório (figuras 1 e 2 ). O corpo do suporte cobre todos os
tubos e não permite que eles saiam dos furos durante o funcionamento do equipamento. Duas
molas instaladas nas laterais do suporte prendem a bandeja e também impede a sua
movimentação durante o funcionamento.
O motor (figura 3) é instalado com eixo na horizontal e este trespassa a estrutura de
fixação, para fazer girar o suporte contendo a bandeja de tubos. Na instalação elétrica do
motor, além do interruptor de energia, um temporizador (figura 4) controla o tempo de
funcionamento do aparelho. Para construção do equipamento é necessário: 1 – um motor
elétrico com redutor de velocidade modelo MG8562-Z43-AC; 2 – um temporizador
eletromecânico; 3 - um dimer, para controle de velocidade; 4 – um interruptor; 5 – cabo para
eletricidade com pino conector; 6 – chapa de aço inoxidável N.16.
A montagem é relativamente simples e as peças são facilmente encontradas em casas
de produtos elétricos. As dimensões e o posicionamento das peças estão especificadas no
desenho contido na figura 2, porém podem ser alteradas, conforme a conveniência.
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Utilizando materiais simples e de fácil acesso, esse equipamento é útil em laboratórios
que empregam técnicas moleculares, podendo ser adaptado para um maior número de
amostras, de acordo com a demanda da rotina dos mesmos.
Hortic. bras., v. 26, n. 2 (Suplemento - CD Rom), jul-ago. 2008
S 4643
Equipamento para inversão de microtubos
O equipamento esta sendo utilizado no laboratório de Fitopatologia da Embrapa
Hortaliças, em Brasília, DF, para a extração de DNA bacteriano, nas etapas onde ocorre a
homogeneização do conteúdo celular às substâncias extratoras (clorofórmio e fenol,
dependendo da etapa). Após essas etapas segue-se os procedimentos normais para
precipitação de interfaces em microcentrífuga. No referido laboratório, a realização das etapas
de inversão de tubos eram antes feitas manualmente com a utilização de cerca de 20 minutos
no total, gerando desconforto físico do laboratorista e maior tempo de exposição às substâncias
tóxicas. As amostras de DNA obtidas utilizando o equipamento, que proporciona precisão de
freqüência, velocidade e duração têm apresentado boa qualidade de pureza para análises
diversas e boa uniformidade aparente em conteúdo de DNA entre as várias amostras extraídas
no mesmo evento de extração.
Além do uso já avaliado, referido acima, o equipamento pode ser utilizado em outras
técnicas tais como:
Outros procedimentos de extração de ácidos nucléicos;
Ressuspensão de precipitados;
Dissolução de agregados de macromoléculas;
Purificação de partículas de vírus;
Preparação de espécimes para microscopia.
LITERATURA CITADA
AUSUBEL FM; BRENT R; KINGSTON, RE; MOORE DD; SEIDMAM JG; SMITH CL; VARKI;
WILDERMUTH MC. 2002. Current Protocols in Molecular Biology. Volume 2. Paperback.
SAMBROOK J; FRITSCH EF; MANIATIS T. 1989. Molecular cloning: a laboratory
manual. 2.ed. New York: Cold Spring Harbor. v.3.
Fotos: João Bosco
Figura 1. Equipamento para inversão de microtubos (device for inverting microtubes) – Brasília, Embrapa
Hortaliças,2008.
Hortic. bras., v. 26, n. 2 (Suplemento - CD Rom), jul-ago. 2008
S 4644
Equipamento para inversão de microtubos
Desenho – João Bosco
Figura 2. Esquema de construção do equipamento para inversão de microtubos (squema for construction
the device for microtubes inversion). Brasília, Embrapa Hortaliças, 2008.
www.maia.ind.br/micro_redutores.htm
Figura 3. Motor com redutor de velocidade (engine with speed reducer)
Hortic. bras., v. 26, n. 2 (Suplemento - CD Rom), jul-ago. 2008
S 4645
Equipamento para inversão de microtubos
www.coel.com.br/produtos.asp
Figura 4. Temporizador eletromecânico (electro mechanic timer)
Hortic. bras., v. 26, n. 2 (Suplemento - CD Rom), jul-ago. 2008
S 4646