Roteiro de aula prática 1º ano Prática 2: Microscopia Pergunta: Qual a utilidade de um microscópio? Objetivo: Conhecer a estrutura do microscópio óptico, detalhando cada parte e aprender a utilizá-lo. I) Introdução No estudo das ciências biológicas é muito importante o uso do microscópio óptico. Este é um equipamento utilizado para observação de objetos de dimensões muito reduzidas, impossíveis de serem examinados com detalhes a olho nu. O microscópio é composto por um sistema óptico formado por uma série de lentes e um sistema mecânico que sustenta esse sistema de lentes. O poder de resolução é a capacidade de fornecer imagens nítidas, com detalhes. O aumento referese ao tamanho da imagem em relação ao objeto. Limite de resolução é a menor distância entre dois pontos de modo que ainda apareçam individualizados. O limite de resolução do olho humano normal é de aproximadamente 0,1mm do microscópio óptico é de 0,25μm. Figura 1 - Esquema de um microscópio óptico monocular II) Materiais Prática 1 - Microscópio óptico; lâminas e lamínulas; uma letra impressa bem pequena. Prática 2 - Microscópio óptico; lâminas e lamínulas; palito de fósforo; solução salina; azul de metileno. Prática 3 - Microscópio óptico; lâminas e lamínulas; suspensão de grão-de-pólen; solução salina. III) Procedimentos Prática 1 - Aprendendo a focalizar e analisar as características da imagem formada Antes de qualquer observação ao microscópio é preciso focalizar a imagem, para isto: 1 - Verifique se a objetiva de menor aumento está encaixada; 2 - Pegue a lâmina a ser observada, no caso a lâmina com uma letra impressa, segure-a pelas bordas e verifique se a lamínula está voltada para cima; 3 - Levante a platina movimentando o controle macrométrico até seu ponto máximo; 4 - Acenda a luz do microscópio e ajuste a intensidade da luz para próximo de 4; 5 - Agora, observando através das oculares e utilizando o controle macrométrico, abaixe lentamente a platina, até que o material a ser observado seja visto. Assim que isso ocorrer, corrija a focalização utilizando o micrométrico; 6 - Explore o material e passe para a objetiva de 20x e faça o ajuste de focalização, utilizando apenas o controle micrométrico; 7 - Repita o mesmo procedimento da objetiva de 20x com a de 40x; 8 – Observe a posição da imagem da letra formada pelo microscópio, principalmente com as objetivas de 10x e 20x; 9 - Terminada a observação, reduza a intensidade da luz até 1, desligue a lâmpada, gire o revólver para encaixar a objetiva de menor aumento passando pela objetiva de 20x e retire a lâmina. Comentários: Com o auxilio da figura, demonstre cada uma das partes do microscópio e suas respectivas funções. Atente-se para que todos os alunos sigam, rigorosamente, passo a passo o procedimento. Prática 2 - Células da mucosa oral 1 - Pegue uma lâmina e pingue uma gota de solução salina; 2 - Com a parte de madeira do palito de fósforo faça uma suave raspagem na mucosa bucal; 3 - Transfira o material para a gota de solução salina sobre a lâmina; 4 - Cubra com a lamínula e inicie a focalização do material; 5 - Após a observação com a lente objetiva de 40x, volte a lente objetiva de 10x e retire a lamina do microscópio; 6 - Coloque uma gota de corante azul de metileno em uma das bordas da lamínula; 7 - Encoste um pedaço de papel de filtro no lado oposto ao da gota de corante. O papel absorverá a solução salina, permitindo que o corante passe para o espaço entre a lâmina e a lamínula; 8 - Aguarde alguns minutos e observe o material ao microscópio. Comentários: Lembre-se que antes da lâmina ser corada, o aluno terá dificuldade em focalizar. Aproveite a oportunidade para falar sobre a afinidade do azul de metileno que cora núcleo, citoplasma e membrana plasmática. Prática 3 - Visualização dos grãos de pólen 1 - Agite o frasco contendo a suspensão de grãos de pólen; 2 - Com um conta-gotas, coloque uma gota da suspensão sobre uma lâmina, cobrindo-a com uma lamínula; 3 - Observe este material ao microscópio, utilizando a lente objetiva de 10X. Centralize um grão de pólen de cor amarelo brilhante e proceda a observação utilizando as lentes objetivas de 20X e 40X. Comentário: O objetivo de trabalhar essa pratica é dar a noção de profundidade nas imagens formadas no microscópio, permitindo uma melhor exploração do material. IV) Para pensar: 1 - Quais são os cuidados que devem ser tomados no manuseio de um microscópio? Não tocar nas lentes, rodar os canhões na base do revólver e com cuidado, não desligar sem reduzir a intensidade da luz, etc. 2 - Quais seriam as limitações na biologia na ausência do microscópio? A ausência do microscópio impediria, além de conhecermos a infinidade de organismos microscópicos, o conhecimento de muitas estruturas e processos descritos e usados nas explicações e produção de conhecimento de organismos vivos, objeto de estudo da biologia. 3 - Todas as células são microscópicas? Não. EX: ovo das aves, alga Nitela e alvéolos do endocarpo da laranja. V) Referências -Figura1– Esquema de um microscópio óptico monocular Disponível em: http://campus.fortunecity.com. Acessado em: maio de 2010. -Wikipedia - A enciclopédia livre. Microscopia. Disponível em: http://pt.wikipedia.org. Acessado em: fevereiro de 20011. -Apostila prática de biologia celular-2008. Universidade Federal de Viçosa.