MARTINS, P.C. et al. Efeito da temperatura ambiente sobre a viabilidade do sêmen de varrões.
PUBVET, Londrina, V. 5, N. 20, Ed. 167, Art. 1127, 2011.
PUBVET, Publicações em Medicina Veterinária e Zootecnia.
Efeito da temperatura ambiente sobre a viabilidade do sêmen de
varrões1
Poliana Carneiro Martins2; José Vanderlei Burim Galdeano3; Karen Martins
Leão4; Abner Alves Mesquita2; Felipe Rocha Silva5; Marco Antônio Pereira da
Silva6
1
Trabalho apresentado pela primeira autora como parte das exigências para
conclusão do curso de Medicina Veterinária da Universidade de Rio Verde
2
Médico(a) Veterinário(a) pela Universidade de Rio Verde;
3
Médico Veterinário, Prof. da Universidade de Rio Verde;
4
Médica Veterinária, Profa. Dra. do Instituto Federal de Educação Ciência e
Tecnologia Goiano – Campus Rio Verde;
5
Discente do curso de Zootecnia do Instituto Federal de Educação Ciência e
Tecnologia Goiano – Campus Rio Verde;
6
Zootecnista, Prof. Dr. do Instituto Federal de Educação Ciência e Tecnologia
Goiano – Campus Rio Verde. e-mail: [email protected]
Resumo
Os suínos mostram-se sensíveis às condições de calor e, em função disto,
podem ter sua eficiência reprodutiva alterada nos períodos de elevada
temperatura. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da temperatura
ambiental sobre a viabilidade do sêmen de varrões. Após a colheita, avaliou-se
motilidade total (%), motilidade progressiva (%), vigor (0-5), integridade de
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membrana (%) e percentual de espermatozóides anormais das amostras de
sêmen. Os animais foram submetidos a dois tratamentos: Tratamento I –
animais mantidos em gaiolas sob condições de temperatura dentro dos
padrões de conforto térmico; Tratamento II – animais mantidos em gaiolas sob
condições de temperatura fora dos padrões de conforto térmico. As amostras
de sêmen foram colocadas entre lâmina e lamínula aquecidas a 37°C para as
análises de MT (%), MP (%) e vigor (0-5). Para as avaliações de integridade de
membrana as lâminas foram coradas com o corante eosina-nigrosina. Para a
apreciação das patologias, as lâminas foram coradas com os corantes rosa
bengala e violeta gensiana. Em todos os casos, as lâminas foram observadas
no microscópio óptico em aumento de 40 x. Os resultados demonstraram que
houve efeito da temperatura sobre a viabilidade do sêmen dos animais
submetidos às diferentes condições térmicas, onde foi observado que altas
temperaturas podem resultar na redução da qualidade seminal.
Palavras–chave: Conforto térmico, Produção de suínos, Qualidade de sêmen.
Effect of the ambient temperature on the viability of the semen of
boars
Abstract
The pigs shown to be sensitive to conditions of heat and, as a result, may have
changed their reproductive efficiency during periods of high temperature. The
aim of this study was to evaluate the effect of environmental temperature on
seminal viability of boars. After harvest, we assessed total motility (%),
progressive motility (%), vigor (0-5), membrane integrity (%) and percentage
of abnormal sperm from semen samples. The animals were subjected to two
treatments: Treatment I - animals kept in cages under temperature conditions
within the standards of thermal comfort; Treatment II - animals kept in cages
under temperature conditions outside the standards of thermal comfort.
Semen samples were placed between slide and coverslip heated to 37 °C for
analysis of MT (%) MP (%) and vigor (0-5). Evaluations of membrane integrity
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slides were stained with the dye eosin-nigrosina. In assessing the pathology
slides were stained with dyes bengal rose and gensiana violet. In all cases, the
slides were observed under optical microscope at a magnification of 40 x. The
results showed a significant effect of temperature on seminal viability of
animals subjected to different thermal conditions, which revealed that high
temperatures can result in reduced semen quality.
Keywords: Thermal comfort, Swine production, Semen quality.
1 INTRODUÇÃO
A produção de suínos no Brasil alcançou elevados níveis de crescimento
nos últimos anos. De acordo com a Associação Brasileira de Criadores de
Suínos (2010) o consumo per capita de carne suína deverá atingir os
patamares de 14,5 kg em 2011, valor 1,5 kg maior do que o país vem
apresentando desde 2006. Para que tal fato se tornasse possível, a tecnologia
empregada na atividade precisou passar por transformações, fornecendo,
desta maneira, suporte para o desenvolvimento do setor.
A intensificação do sistema de criação é uma necessidade, o que obriga
os produtores a investirem na modernização das instalações, mão-de-obra
mais especializada e melhoramento genético do plantel, de forma a melhorar a
produtividade.
O desempenho reprodutivo é essencial quando se trata de assegurar
resultados satisfatórios que gerem lucros ao produtor. Por disponibilizarem o
material genético aos leitões, os reprodutores são de grande importância na
suinocultura, e aqueles que demonstram ter o melhor potencial genético
devem ser utilizados. Técnicas que otimizam os resultados reprodutivos vêm
sendo cada vez mais empregadas. A inseminação artificial (IA) é um recurso
muito utilizado atualmente; mas para que seja efetiva, o macho deve produzir
constantemente um bom número de espermatozóides com elevada capacidade
de fertilização.
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Vários são os fatores que interferem negativamente,de forma direta ou
indireta, sobre a produção animal, diminuindo seu rendimento, o que gera
prejuízos econômicos. Para que esta situação seja evitada, é necessário
conhecer as respostas fisiológicas dos animais quando expostos a esses
fatores, pois assim, medidas que minimizem os efeitos negativos podem ser
adotadas.
Parâmetros ambientais específicos para sobrevivência e produção
satisfatória são necessários, de maneira que estes podem influenciar de
diferentes formas o desempenho do animal, inclusive no âmbito reprodutivo.
Existem várias categorias de agentes estressores, entre os quais
convêm destacar aqueles de ordem ambiental, tais como temperaturas e
acústica desconfortáveis. Esses quesitos afetam o bem-estar do animal,
gerando uma situação de estresse que, por sua vez, resulta em reações
adaptativas do organismo, que busca alcançar a homeostase. O estresse
agudo provoca o aumento dos batimentos cardíacos, da taxa respiratória e da
circulação. Casos crônicos prejudicam o desenvolvimento, reprodução e o
estado de saúde.
Desde que a temperatura e umidade relativa sejam mantidas em
condições aceitáveis, os animais não apresentam problema com relação ao
alojamento. Para que o suíno esteja em conforto não é necessário que ele
esteja submetido estritamente às condições ambientais de seu habitat natural.
No entanto, devem ser consideradas as exigências do seu organismo, bem
como suas exigências sociais.
Pelas suas características, os suínos têm seu rendimento reduzido
quando encontrados em uma situação de calor excessivo. Por terem um
sistema termorregulador deficiente, alto metabolismo e espessa camada de
tecido adiposo, são bastante sensíveis a temperaturas elevadas. Por não
transpirarem há risco de morte por hipertermia.
Desta
forma,
quanto
maior
o
índice
de
conforto
térmico
reprodutores suínos, maiores serão seus níveis de bem-estar e vice-versa.
para
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Por piorar tanto o ganho de peso quanto quesitos reprodutivos e com
isso gerar aumento dos custos de produção, o estresse calórico deve ser
evitado.
O presente trabalho teve por objetivo avaliar o efeito da temperatura
ambiente sobre a viabilidade do sêmen de varrões.
2 REVISÃO DA LITERATURA
2.1 Efeito da temperatura sobre os suínos
Os animais, durante toda a sua vida, estão constantemente expostos a
agentes estressogênicos e embora todas as espécies animais possam ser
acometidas pela síndrome estresse, a suína parece ser a mais estressoceptiva
(BISPO e PEREIRA, 1994).
A temperatura é um dos elementos mais importantes a considerar no
condicionamento ambiental (PIFFER; PERDOMO; SOBESTIANSKY, 1998). O
tipo ideal de edificação deve ser definido fazendo-se um estudo detalhado do
clima da região e (ou) do local onde será implantada a exploração,
determinando as mais altas e baixas temperaturas ocorridas, a umidade do ar,
a direção e a intensidade do vento; pois assim é possível projetar instalações
com características construtivas capazes de minimizar os efeitos adversos do
clima sobre os suínos (EMBRAPA SUÍNOS E AVES, 2003).
Encarnação (1992) afirma que fatores climáticos como temperatura,
umidade do ar, radiação solar e ventos, além de outros, influenciam
diretamente o sistema neuro-endócrino e função reprodutiva dos animais
domésticos. Fatores ambientais externos e o microclima dentro das instalações
provocam efeitos diretos e indiretos sobre a produção de suínos, acarretando a
redução
da
produtividade,
com
consequentes
prejuízos
econômicos
à
exploração (SILVA; PANDORFI; PIEDADE, 2005). Schmidt & Borges (2010)
afirmam que muitas vezes, os animais são alojados em situações que não
propiciam um conforto térmico adequado e, assim, o potencial reprodutivo ou
produtivo destes animais não é expresso na totalidade.
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Os animais homeotérmicos possuem uma zona de termoneutralidade,
ou seja, uma faixa de temperatura ambiente na qual o animal não precisa
produzir ou perder temperatura corporal e seu metabolismo é mínimo,
caracterizando o conforto térmico, onde eles podem expressar seu máximo
potencial genético (BRIDI, 1988). De acordo com a literatura, quando a
temperatura ambiente encontra-se abaixo da de conforto, o animal precisa
produzir calor corporal (termogênese) e, quando esta acima dessa faixa, é
necessário perder calor para o ambiente (termólise); entretanto, quando a
temperatura ambiental ultrapassa as habilidades do animal em manter a
homeotermia, o organismo é
incapaz de
impedir a elevação de sua
temperatura interna, ocorrendo hipertermia; ou não consegue aporte de
energia térmica suficiente para compensar as perdas, levando à hipotermia
(BRIDI, 1988).
Segundo
Tavares
et
al.
(2000),
os
animais
expostos
ao
calor
apresentam menor ganho de peso, menor consumo de ração e pior eficiência
de utilização do alimento. Manno et al. (2005), ao observarem o efeito da
temperatura ambiente sobre o desempenho de suínos dos 15 as 30 kg,
constataram aumento da frequência respiratória, da temperatura retal e
influência negativa sobre a conversão alimentar e a deposição de proteína por
meio da redução do consumo de ração. Em ambientes de creche com
temperaturas acima de 30°C, há regularmente uma queda no consumo
alimentar de mais de 25% e seguramente o desempenho também fica
seriamente comprometido (SOS SUÍNOS, 2009).
Suínos mantidos sob estresse por calor permanecem menos tempo na
posição em pé, mais tempo na posição deitado, menos tempo em alimentação,
fuçando, e mais tempo dormindo (KIEFER et al., 2010).
O efeito do estresse térmico sobre o ganho de peso não está limitado à
redução da ingestão de alimento (MANNO et al.,2006). Kiefer et al. (2009)
citam que ele pode provocar distúrbios de comportamento e altera a fisiologia
dos suínos em fase de crescimento. Com o aumento da temperatura verifica-se
intensificação da circulação em consequência à vasodilatação; há perda de
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água, surgindo uma solicitação de líquidos; o volume da urina se reduz, e essa
redução pode ser tal que dê margem à formação de cálculos urinários
(FURTADO e ARAÚJO FILHO, 2002).
Bernardes (2009) aponta que suínos confinados em um ambiente de
criação intensiva respondem com elevados níveis de ruídos quando expostos a
condições térmicas desconfortantes.
Ambientes
negativamente
térmicos
que
características
provocam
quantitativas
estresse
da
pelo
carcaça
calor
de
afetam
suínos
em
terminação (KIEFER et al., 2010). Fagundes et al. (2009), ao avaliar as
características de carcaça suínas, observaram que a espessura do músculo
longissimus thoracis foi 16 mm menor nos animais em estresse calórico.
Os animais estressados representam um grupo de maior risco para as
infecções do que os não estressados, devido a uma redução da resposta
imunológica (BISPO e PEREIRA, 1994).
2.1.1 Influência do estresse térmico em reprodutores
Machos também são afetados pelo estresse térmico. A temperatura
testicular do cachaço se situa entre 35 °C e 36,5°C, ou seja, 2,5 e 3,0ºC
abaixo da temperatura corporal (SILVEIRA e SCHEID, 2003). De acordo com
Jainuadeen e Hafez (1995), temperaturas corpóreas elevadas acarretam
degeneração testicular e reduzem a porcentagem de espermatozoides normais
e férteis na ejaculação, da mesma maneira que reações febris causadas por
moléstias infecciosas afetam a fertilidade subseqüente do porco por um
período de 5 a 6 semanas. Esta fonte também sugere que as variações
estacionais interferem na fertilidade de porcos, sendo os níveis baixos
imediatamente após os meses mais quentes do ano; de modo que o volume de
sêmen e o numero total de espermatozoides por ejaculação são maiores
durante o tempo frio. Períodos de elevada temperatura acarretam redução na
quantidade e qualidade seminais, manifestada por ejaculados com menor
motilidade, pelo aumento na porcentagem de espermatozoides com defeitos
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morfológicos, pela produção reduzida de gametas e pelo menor volume do
ejaculado (DONIN; HEINEMANN; MOREIRA, 2007).
A temperatura ideal para a produção espermática é de 18-20ºC
(AMORIM; COSTA; REIS, 2010). Segundo Silveira e Scheid (2003), a
exposição de cachaços a um ambiente entre 33,4 °C e 37,5°C durantes 4 a 6
dias consecutivos causa variações individuais elevadas na qualidade do sêmen
durante 2-5 semanas após esta exposição, período equivalente para que os
espermatozoides passem dos túbulos seminíferos para a cauda do epidídimo
(HUNTER, 1987), produzindo os piores efeitos sobre a motilidade, morfologia e
produção de células espermáticas. Hainaut et al. (2004) não descartam a
possibilidade de manifestação de efeitos nocivos da alta temperatura e
umidade
relativa
sobre
a
espermatogênese,
gerando um
aumento
na
porcentagem de anomalias espermáticas.
Mies Filho (1975) afirma que a temperatura é o fato de maior
importância na espermatogênese dos machos de qualquer espécies e quando
muito elevada é prejudicial tanto às etapas de formação dos gametas como
àqueles elementos já formados e em trânsito pelo epidídimo. Ocorre uma
maior incidência de anomalias morfológicas, especialmente na cabeça do
espermatozóide; fato que justifica evitar um aquecimento excessivo dos
alojamentos
quando
machos
reprodutores
permanecerem
confinados
(HUNTER, 1987).
Para Bridi (1988), os danos reprodutivos normalmente podem ocorrer
de 15 a 21 dias após a exposição dos animais a condições de estresse, e a
qualidade do ejaculado poderá retornar ao normal de 7 a 8 semanas após a
exposição a altas temperaturas.
A esterilidade é um fator permanente que impede a procriação,
enquanto que a infertilidade ou esterilidade temporária é a inabilidade de
produzir filhos viáveis dentro de um tempo estipulado (ARAÚJO e ARAÚJO,
2010). A recuperação do animal nestas condições depende da natureza e da
duração do que está provocando o aumento dessa temperatura (COSTA,
2007).
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Amorim, Costa e Reis (2010) sugerem que podem ser utilizados
ventiladores ou nebulizadores para controle térmico. Além disso, verifica-se
melhor comportamento social para animais submetidos à ventilação e
nebulização (CARVALHO; OLIVEIRA; TURCO, 2004).
2.2 Características do sêmen de varrão
As características do ejaculado ou sêmen in natura constituem o
primeiro passo no controle da qualidade do processo de IA (SILVEIRA e
SCHIED, 2003). Assim, é necessário conhecer a eficiência reprodutiva do
macho e monitorá-la por meio de análises que permitem estimar o potencial
reprodutivo dos mesmos (SPESSATTO, 2007).
O sêmen do cachaço é coletado em várias frações e o primeiro fluido a
aparecer é a fração pré-espermática, translúcida e facilmente identificada; a
próxima é espessa, esbranquiçada e opaca, tida como fração rica em
espermatozóides (AX et al., 2004). A seguir, vem a fração pós-espermática,
com aparência similar à fração pré-espermática, mas menos translúcida, com
concentrações maiores de espermatozóides (AX et al., 2004).
Segundo Bortolozzo, Wentz e Dallanora (2005), o volume de sêmen
varia entre 150 e 500 ml. A forma mais prática de medir o volume é por meio
de seu peso e, para efeito prático, cada grama corresponde a 1 ml (WENTZ e
BORTOLOZZO, 1998).
A aparência do sêmen suíno deve ser opaca e uniforme, o que indica
alta concentração espermática; enquanto que amostras translúcidas indicam
poucos espermatozoides (HAFEZ, 1995). A cor do ejaculado suíno varia do
branco ao branco acinzentado, podendo também apresentar uma coloração
amarela clara (WENTZ e BORTOLOZZO, 1998).
Através da determinação da concentração espermática, aliada ao
volume,
o
número
total
de
espermatozoides
do
ejaculado
pode
ser
determinado (WENTZ e BORTOLOZZO, 1998). Estes autores afirmam que os
métodos de avaliação da concentração espermática incluem a avaliação pelo
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aspecto, pelo espectofotômetro, por contagem em câmara de Neubauer e por
contagem pelo coulter counter.
A análise de motilidade é um exame rotineiro para determinar a
qualidade seminal em centrais de IA (BERNARDI, 2008). A motilidade total é
definida como a porcentagem de espermatozoides móveis, e a motilidade
progressiva, daqueles que apresentam deslocamento progressivo (MIYA et al.,
2007). A observação da motilidade indica a viabilidade dos espermatozoides no
ejaculado e é realizada com a técnica do exame de três gotas de sêmen puro
sobre lâmina e lamínula aquecidas a 37 °C (SILVEIRA e SCHIED, 2003). Esta
mesma fonte cita que a percentagem de espermatozoides vivos com
movimento progressivo considerada dentro dos limites aceitáveis é de 70%.
Esse aspecto deve ser determinado o mais rapidamente possível, uma
vez que a motilidade do espermatozoide é acentuadamente influenciada por
alterações de temperatura (ARTHUR, 1979). Segundo este autor, o sêmen
normal apresenta o movimento de uma massa espermática na forma de ondas
enoveladas recorrentes, ocorrendo graus variados de pouca motilidade quando
há hipoplasia e degeneração testicular.
Algumas centrais de coleta de sêmen utilizam também a avaliação do
vigor, que é determinado pelos espermatozoides que se movimentam
progressivamente considerando-se o tipo e a direção do movimento (WENTZ e
BORTOLOZZO, 1998). A escala de avaliação varia de zero a cinco, em que zero
representa
a
ausência
de
movimento
de
massa
e
cinco,
acentuada
movimentação; podendo ser afetado pelo método de colheita (BARBOSA;
MACHADO; BERGAMASCHI, 2005).
A integridade de membrana plasmática é uma condição essencial para o
metabolismo e a função espermática, podendo ser observada com a coloração
eosina-nigrosina ou com o uso de corantes fluorescentes (BERNARDI, 2008).
Nesta linha de pensamento, a avaliação se baseia na capacidade de
membranas impedirem ou não a entrada de determinados corantes nos
compartimentos internos dos espermatozoides, o que permite separar as
células com membrana íntegra. As células que estavam vivas quando o
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corante foi adicionado excluem o corante, e as mortas se coram de vermelho
com a eosina contra o fundo escuro da nigrosina (COSTA, 2007).
A análise morfológica é um parâmetro importante de qualidade e
geralmente permite descartar ejaculados ou machos que ultrapassem certo
nível de anormalidades (BERNARDI, 2008). É um componente da avaliação
andrológica que permite identificar reprodutores que sofrem patologias genitais
(HAINAUT et al., 2004). Conforme Wentz e Bortolozzo (1998), é realizada
considerando defeitos de cabeça, acrossoma, colo; peça intermediária e cauda.
As gotas citoplasmáticas distais têm pouco significado clínico e
patológico e alterações no acrossoma resultam em perda da capacidade
fecundante da célula (SILVEIRA e SCHIED, 2003).
As
alterações
totais
não
devem
ultrapassar
20%
(WENTZ
e
BORTOLOZZO, 1998). A Tabela 1 mostra a classificação e o limite máximo de
anormalidades espermáticas individuais e totais permitidas.
TABELA 1: Classificação das alterações morfológicas das células espermáticas
de suínos.
Anormalidades individuais
Limite máximo
Acrossoma
<5%
Cabeça
<5%
Colo
<5%
Peça intermediaria
<5%
Gota citoplasmática proximal
<10%
Cauda
<10%
Anormalidades espermáticas totais
20%
Fonte: Adaptado de Nascimento et al. (2007).
A morfologia espermática precisa ser avaliada periodicamente ou
quando o sêmen apresentar suspeita de alterações morfológicas, sendo que
um alto percentual de defeitos pode representar alterações durante a
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espermatogênese ou no trânsito e maturação no epidídimo, ou mesmo,
manipulação inadequada do ejaculado (FURTADO et al., 2006).
3 MATERIAL E MÉTODOS
O experimento foi executado na Estação Experimental de Zootecnia do
Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia Goiano – Campus Rio
Verde. Para tal, foram utilizados quatro suínos híbridos, machos, provenientes
de
leitegadas
recém-desmamadas
pertencentes
ao
plantel
da
própria
instituição. Os animais foram escolhidos ao acaso e alojados em baia coletiva
até alcançarem a puberdade, o que ocorreu por volta dos seis meses de idade;
sendo, a partir de então, transferidos para gaiolas individuais com dimensões
2,38 x 0,82 x 0,59 m, em piso de concreto. Cada animal recebia dois Kg de
ração por refeição duas vezes ao dia e água ad libitum fornecida em cocho
coletivo.
Desde que atingiram a puberdade, passaram a ser condicionados e
adapatados ao salto para colheita de sêmen em manequim de metal. Este se
encontrava fixado ao chão da sala de colheita e era envolto por uma capa de
borracha com a finalidade de proteger a pele e o sistema reprodutor contra
injúrias. Na fase de adaptação, cada animal era submetido ao manequim por
um período de quinze minutos, três vezes por semana. Quando se adequaram
ao procedimento, passaram a ser realizadas duas colheitas semanais.
Os animais foram submetidos a dois tratamentos, estabelecidos de
acordo com a ambiência do local de confinamento:
Tratamento I - colheu-se durante o mês de julho de 2009 o sêmen dos
varrões mantidos em gaiolas sob condições de temperatura de conforto
térmico (18,23 °C – 31,65 °C). Neste caso, o galpão cujas gaiolas estavam
localizadas era adequadamente arejado, com aberturas em suas laterais.
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Tratamento II - os animais foram submetidos a condições de temperatura de
estresse térmico (21,9 °C – 34,37 °C), pela vedação das aberturas do galpão
com lona plástica preta. Isto criou uma atmosfera que dificultava a circulação
do ar, com conseqüente deficiência na dissipação do calor. Precedente ao início
das colheitas, feitas em dezembro de 2009, os varrões permaneceram nestas
condições por um período de sessenta dias para que pudessem sentir os
efeitos da situação, com esperado impacto fisiológico e queda na qualidade
seminal.
Para ambos os tratamentos, as temperaturas internas máxima e
mínima do galpão eram acompanhadas e anotadas nos dias de colheita,
fazendo-se necessário o uso do termômetro, instalado próximo às gaiolas.
Assim que o suíno entrava na sala de colheita e demonstrava interesse
saltando sobre o manequim, a região prepucial era higienizada com o auxílio
de papel-toalha. Esta prática visava reduzir as sujidades no local, evitando a
contaminação do sêmen. A técnica eleita para a obtenção do sêmen foi a
técnica da mão enluvada e, para tal, fez-se uso de luva de látex de tamanho
proporcional à mão do executor. Quando exposto, o pênis era, com o auxílio da
mão, fixado e direcionado a um recipiente coletor com capacidade de 500ml, o
qual foi previamente mantido em estufa com temperatura de 35-37°C. O
mesmo encontrava-se coberto por filtro a fim de reter a fração gelatinosa do
ejaculado, posteriormente desprezada. Quatro reprodutores suínos foram
utilizados, totalizando oito ejaculados por animal para cada tratamento.
No laboratório, prosseguia-se com a avaliação dos parâmetros de
qualidade do sêmen: volume, motilidade total (MT-%), motilidade progessiva
(MP-%) e vigor (V-0 a 5). A integridade de membrana plasmática (IM-%) e o
percentual de espermatozóides anormais (PA-%) também eram estimados.
Para as análises de MT, MP e V, uma gota de sêmen era, com o auxílio
de pipeta automática, colocada sobre a lâmina e coberta com lamínula, ambas
anteriormente aquecidas em uma placa aquecedora a uma temperatura de
37°C. Prosseguia-se com observação em microscópio óptico com lente objetiva
de 10x.
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Para apreciação da IM dos espermatozóides realizava-se esfregaço
sobre a lâmina com uma gota de sêmen acrescida de uma gota do corante
eosina-nigrosina. Para observação do PA, diluiu-se 20 microlitros de sêmen em
1ml de formol citrato, retirando desta solução uma gota que foi colocada sobre
a lâmina para obtenção do esfregaço. Depois de seca, esta lâmina foi imersa
no corante rosa-bengala por um minuto e, após enxague com água, foi imersa
em corante violeta gensiana por trinta segundos e novamente procedeu-se o
enxague. Tanto a avaliação da IM quanto do PA foram feitas através de
microscopia óptica com lente objetiva de 40x e com o auxílio do contador de
células.
O delineamento experimental adotado foi em blocos inteiramente
casualizados (DIC) com análise de variância seguido do teste de Tukey, sendo
que os tratamentos foram as condições de temperatura de confinamento nas
gaiolas individuais.
O programa empregado para as análises estatísticas foi o software
Sisvar 5.0 versão – 2009 e o nível de significância considerado foi de 5%.
4 RESULTADOS E DISCUSSÃO
As temperaturas máximas e mínimas registradas nos períodos de
colheita são apresentadas na Tabela 2, para quando o galpão de alojamento
dos animais não estava revestido por lona plástica; e na Tabela 3, para quando
a lona foi utilizada.
MARTINS, P.C. et al. Efeito da temperatura ambiente sobre a viabilidade do sêmen de varrões.
PUBVET, Londrina, V. 5, N. 20, Ed. 167, Art. 1127, 2011.
TABELA 2 – Temperaturas máximas e mínimas registradas no período de
julho, no galpão sem lona plástica.
Temperaturas (°C)
Dias de colheita
Máxima
Mínima
6/7/2009
35
21
9/7/2008
31
25
13/7/2009
24,2
12,1
16/7/2009
30,8
13,7
20/7/2009
31,3
13,1
23/7/2009
33,4
17,2
27/7/2009
33,2
28,1
30/7/2009
34,3
15,7
Média
31,65
18,23
TABELA 3 – Temperaturas máximas e mínimas registradas no período de
dezembro, no galpão com lona plástica.
Temperaturas (°C)
Dias de colheita
Máxima
Mínima
2/12/2009
36,3
21
7/12/2009
36,3
21
9/12/2009
36,3
21
11/12/2009
30,9
30,6
14/12/2009
33,7
20,7
21/12/2009
33,0
19,5
23/12/2009
34,1
19,5
Média
34,37
21,9
Os dados mostrados na Tabela 4 representam as médias de MT (%), MP
(%), V (0-5), IM (¨%) e PA(%), encontradas nos tratamentos avaliados.
MARTINS, P.C. et al. Efeito da temperatura ambiente sobre a viabilidade do sêmen de varrões.
PUBVET, Londrina, V. 5, N. 20, Ed. 167, Art. 1127, 2011.
TABELA 4 – Porcentagem de Motilidade Total, Motilidade Progressiva, Vigor,
Integridade de Membrana e índice de Patologias do sêmen de reprodutores
suínos mantidos entre as temperaturas, máxima e mínima, de 31,65 °C a
18,23 °C e 34,37 °C a 21,9 °C.
Tratamentos
Variáveis
(Temperaturas Máx-Mín)
MT
MP
V
IM
PA
T°C 31,65 - 18,23
92,96ª
87,96ª
3,62a
96,03b
95,56a
T°C 34,37 - 21,90
89,84b
84,68b
2,87b
98,65a
94,50a
C.V.(%)
2,55
2,77
9,64
1,54
1,47
*Médias seguidas de letras diferentes nas colunas diferem significativamente pelo teste de
Tukey (P<0,05).
Durante os períodos experimentais, as temperaturas no interior do
galpão no qual os animais ficaram alojados atingiram as médias de 18,23°C a
31,65°C na situação de conforto e de 21,9°C a 34,37°C na situação de
estresse térmico, observados os meses de julho e de dezembro de 2009,
respectivamente.
O uso da lona plástica elevou as médias de temperatura dentro do
galpão, possibilitando que fossem criadas duas condições ambientais distintas.
Assim,
foi
observada
diferença
significativa
dos
parâmetros
espermáticos avaliados entre os tratamentos utilizados para MT, MP e V, os
quais demonstraram redução da qualidade do sêmen nas condições de maior
calor. Para PA não foi encontrada diferença significativa. No entanto, notou-se
aumento na quantidade de espermatozóides com membrana íntegra. Estes
resultados corroboram com os de outros estudos, mostrando que o ambiente
de alojamento de instalações para reprodutores suínos tem influência direta no
desempenho dos animais (TOLON et al., 2010).
Considerando que o limite mínimo aceitável de motilidade seja de 70%
(SILVEIRA e SCHIED, 2003), os dois tratamentos demonstraram resultados
superiores aos valores de referência, tendo apresentado um desempenho
desejável. Algo semelhante foi relatado por Spessatto e Moreira (2009) que,
MARTINS, P.C. et al. Efeito da temperatura ambiente sobre a viabilidade do sêmen de varrões.
PUBVET, Londrina, V. 5, N. 20, Ed. 167, Art. 1127, 2011.
ao analisarem a qualidade do sêmen de suínos submetidos ao estresse
térmico, observaram MP com variação entre 86,77% e 90,11%. Hainaut et al.
(2004) também reforçam esta idéia, pois observaram que, mesmo com a
temperatura média permanecendo além da crítica limite superior durante 30
semanas de avaliação, a motilidade não se alterou e permaneceu elevada.
Entretanto, os valores de motilidade obtidos neste experimento foram
melhores para o tratamento em que os animais se encontravam em conforto
térmico. De fato, é o que é sugerido por Donin, Heinemann e Moreira (2007),
quando afirmam que os suínos têm sua eficiência reprodutiva alterada nos
períodos
de
elevada
temperatura,
produzindo
ejaculados
com
menor
motilidade. Porém Velloso (2008) não encontrou diferença estatística quanto à
motilidade do sêmen de cachaços condicionados a ambientes diferentemente
climatizados.
O parâmetro vigor foi o que mais diferiu significativamente entre os
tratamentos, apresentando um C.V. de 9,64%. O menor valor obtido (2,87) foi
suficiente, porém não ótimo, levando em conta que sua escala avaliativa está
compreendida entre 0 e 5. A redução desses valores pelo calor também foi
constatada por Garcia (2004), que relatou decréscimo consecutivo no vigor
médio dos espermatozóides de touros que utilizaram bolsa escrotal insuladora
durante 55 dias. Coelho et al. (2006) chegou a constatações semelhantes ao
observar que o vigor espermático de animais submetidos ao estresse térmico
foi inferior ao daqueles submetidos à termoneutralidade. Possivelmente, o
aumento de formas anormais que prejudiquem o movimento das células
espermáticas influencia negativamente tanto a motilidade quanto o vigor.
A membrana plasmática pode perder sua integridade por conta de
processos físicos ou químicos que desestruturem sua bicamada lipídica
(GARCIA,
2004).
Enquanto
logicamente
esperava-se
que
as
menores
porcentagens de IM fossem geradas pelos animais submetidos ao calor, estas
foram encontradas no período em que os varrões estavam mantidos sob
conforto térmico. Estes resultados não são equivalentes aos de Garcia (2004),
que concluiu que, após a insulação testicular, os índices de células com
MARTINS, P.C. et al. Efeito da temperatura ambiente sobre a viabilidade do sêmen de varrões.
PUBVET, Londrina, V. 5, N. 20, Ed. 167, Art. 1127, 2011.
membrana plasmática lesada sofreram considerável incremento. A integridade
da membrana do espermatozoide pode sofrer importantes mudanças devido à
temperatura, o que pode ser verificado após os procedimentos de congelação e
descongelação (BIANCHI et al., 2008; BRISOLA et al., 1999; CUNHA e LOPES,
2005).
Os dados aqui obtidos podem ter ocorrido pelo fato de os reprodutores
não terem permanecido tempo suficiente em um ambiente que prejudicasse
essa integridade, embora a literatura afirme que a exposição de cachaços a um
ambiente entre 33,4 e 37,5°C durantes 4 a 6 dias consecutivos cause
variações individuais elevadas na qualidade do sêmen durante 2-5 semanas
após esta exposição (SILVEIRA e SCHEID, 2003).
A média máxima de temperatura do tratamento que tornou o galpão
mais quente foi de 34,37°C, valor que pode não ter sido o bastante para afetar
a membrana, algo que talvez ocorresse se essa faixa fosse constante.
Temperaturas mais amenas ocorriam durante a noite, o que também pode ter
influenciado este resultado. Se elevadas temperaturas agirem por varias
semanas, verifica-se a própria degeneração da gônada, determinando a
esterilidade do animal (FURTADO e ARAÚJO FILHO, 2002).
A temperatura alta provoca um estresse térmico que afeta nos machos
a produção de espermatozóides (FURTADO & ARAÚJO FILHO, 2002). Catetos
apresentam elevada porcentagem de anormalidades espermáticas quando
condicionados ao estresse ambiental (COSTA & PAULA, 2005). A porcentagem
de patologias totais aqui encontradas, nos dois tratamentos, está dentro do
considerado aceitável, que segundo Nascimento et al. (2007) é de 20%.
Neste experimento, o índice de patologias das células espermáticas foi
menor no mês em que os reprodutores estavam condicionados a temperaturas
mais favoráveis; porém não houve diferença significativa segundo o teste de
Tukey (P<0,05). Estes dados estão de acordo com a pesquisa de Velloso
(2008), que ao estudar o alojamento de cachaços com uso de ventiladores e
nebulizadores em comparação àqueles mantidos sem estes recursos, observou
que
as
porcentagens
de
espermatozóides
normais
não
diferiram
MARTINS, P.C. et al. Efeito da temperatura ambiente sobre a viabilidade do sêmen de varrões.
PUBVET, Londrina, V. 5, N. 20, Ed. 167, Art. 1127, 2011.
estatisticamente entre os dois grupos estudados. Todavia, a literatura afirma
que, sob situações de altas temperaturas, a formação e a qualidade do sêmen
se ressentem, verificando-se menor mobilidade dos espermatozóides e maior
percentagem de formas anormais (FURTADO e ARAÚJO FILHO, 2002). Hainaut
et al. (2004) segue esta linha de pensamento ao não descartar a possibilidade
de um efeito nocivo da alta temperatura e umidade relativa sobre a
espermatogênese, gerando um aumento na porcentagem de anormalidades
espermáticas . A retomada da produção de espermatozóides normais pode ser
bastante demorada após a submissão dos machos a fatores estressantes
(DIAS et al., 2001).
Manter o varrão dentro de sua zona de termoneutralidade evita que ele
precise regular sua temperatura corporal, condição que o faz gastar energia e
pode ter afetado a produção espermática.
Alojar diferentes categorias animais em um mesmo ambiente pode ser
um problema, visto que a faixa de temperatura ideal difere de uma categoria
para outra. Condições entre 18-20°C são satisfatórias tanto para machos
quanto para fêmeas (AMORIM et al., 2010).
Com o aumento da temperatura ambiente, Spessatto e Moreira (2009)
observaram uma redução do volume e da concentração. O calor pode reduzir a
eficiência da reprodução tanto nos machos quanto nas fêmeas, afetando a
gametogênese e a libido, entre outros (FURTADO e ARAÚJO FILHO, 2002). No
caso em estudo, os animais, mesmo submetidos a temperaturas elevadas por
60 dias antes e durante o segundo tratamento, para que se adaptassem e
respondessem ao estresse térmico com conseqüências na qualidade seminal,
apresentaram desempenho satisfatório. Porém, o conforto proporcionou
ejaculados melhores.
É necessário projetar as instalações de acordo com as exigências do
suíno, visando reduzir os efeitos que afetem seu potencial. O controle da
temperatura no local de alojamento dos animais pode acarretar a produção de
ejaculados férteis, com boa quantidade
de espermatozóides móveis e
percentual aceitável de células anormais. Eliminar a causa do estresse térmico,
MARTINS, P.C. et al. Efeito da temperatura ambiente sobre a viabilidade do sêmen de varrões.
PUBVET, Londrina, V. 5, N. 20, Ed. 167, Art. 1127, 2011.
neste caso, a lona plástica, pode fazer com que o sêmen dos varrões retorne
aos valores anteriores.
O assunto em questão, embora bastante explorado, carece de mais
pesquisas, principalmente com relação à variável integridade de membrana, já
que estudos nesta área e que envolvam temperaturas investigam sua
susceptibilidade frente aos processos de congelação e descongelação, mas não
muito quanto ao estresse térmico de origem ambiental.
CONCLUSÕES
Conforme os resultados obtidos neste trabalho, conclui-se que a
qualidade do sêmen de varrões mantidos sob condições de conforto térmico foi
superior quando comparada à daqueles submetidos à situação de estresse
térmico; resultado verificado principalmente quando da observação das
variáveis motilidade total, motilidade progressiva e vigor, por estas terem
apresentado diferenças significativas entre os tratamentos. A diferença dos
índices de patologias espermáticas não foi estatisticamente significativa;
enquanto que animais expostos ao estresse térmico produziram sêmen com
maior integridade de membrana.
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