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uso DE ~A
BlarINlIADA
,12
SOUZA JUNIOR,M.T.
&
DE 1\IW PARA CARJ!C'I1iRI7J\Çl\D DE GE}UW)
DE MIIHO
PAIVA, E.
Avaliou-se dois sistemas de marcação de
f~agmentos
de ADN a serem uti-
lizados como sondas na caracterização de genomas de milho.
O primeiro
sistema consiste de marcação via "nick-translation" do fragmento
um cADN obtido a partir de
8.
O segundo ~
mARN
de
zeína e clonado no plasmídeo
consiste de marcação via polimerizaçao
(-) do ssADN circular Ml3mp18-YZM5.
fita
e
Biotina-
As avaliações foram feitas a nível de "Southern-blot", e o su-
porte sólido utilizado para imobilização do
nylon.
de
pUC-
Foram testado 3 (três) tipos de nu-
cleotídeos biotinilados, Biotina-7-dATP, Biotina-14-dATP
ll-dUTP.
y ZM5,
ADN alvo
foi
membrana
Entre os dois sistemas de marcação via "Nick-translation"
mitiu vizualizaçao de menores quantidades
cleotídeo biotinilado usado.
de ADN, independente
de
per-
do
nu-
Na comparação dos 3 tipos de nucleotídeos
biotinilados, o Biotina-ll-dUTP se mostrou o mais eficaz,
chegando
a
,
-12
detectar ate 1,5 x 10
9 de ADN. O menos eficaz, em ambos os processos
foi o Biotina-7-dATP.
Estudos são sendo conduzidos
visando
sondas, marcadas por estes dois sistemas, em ADN genômico
1
Eng2 Agrônomo, BSc., Pesquisador da EMBRAPA/CNFl'1F
Caixa Postal 007 - 44380 - Cruz das Almas - BA
2
Eng2 Agrônomo, PhD., Pesquisador da EMBRAPA/CNFMS
Caixa Postal 151 - 35700 - Sete Lagoas - MG
de
testar
milho.