XII Congresso Brasileiro de Ecotoxicologia 25 a 28 de setembro de 2012 Porto de Galinhas – PE ENSAIOS IN VITRO PARA AVALIAÇÃO DA CITOTOXICIDADE DA FRAÇÃO SOLÚVEL EM ÁGUA DA GASOLINA Débora Lachner1; Cláudia Bueno dos Reis Martinez1 1 1 [email protected] (Universidade Estadual de Londrina, Londrina, Paraná) [email protected] (Universidade Estadual de Londrina, Londrina, Paraná) A contaminação ambiental de compostos derivados de petróleo está entre os mais problemáticos, pois apresentam alto impacto e são frequentes em ambientes costeiros e estuarinos. Testes in vivo demonstram que a exposição de organismos aquáticos aos combustíveis derivados de petróleo é prejudicial. Considerando-se esses fatores, o objetivo desse estudo foi analisar os efeitos citotóxicos da fração solúvel em água da gasolina (FSAg) in vitro com ZFL, linhagem celular permanente de Danio rerio, e suspensão celular de fígado de Prochilodus lineatus (SCF), comparando-as entre si. As células ZFL foram obtidas do Banco de Células do Rio de Janeiro, mantidas em meio de cultura RPMI 1640 (Gibco ®), L-15 (Gibco®), Soro Bovino Fetal (Gibco®), a 28°C. A SCF foi obtida fazendo a dissociação celular com tripsina 0,05% a 30°C. Foi feita uma simulação de derrame para obtenção da FSAg, adicionando-se água destilada e gasolina na proporção de 4:1, deixando-a no sol por 6 horas e no escuro por 8, a qual foi posteriormente conservada em frasco escuro, a 4°C por no máximo 7 dias. Foram testadas as diluições de 10%, 50% 100% de FSAg por 1, 3 e 6 horas, utilizando o Método de Redução do MTT (3-[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5-difenil tetrazolio bromido). Para ZFL em 1 hora de exposição, a viabilidade celular (VC) foi de 112,96%, 107,69% e 78,98% para 10%, 50% e 100% de FSAg respectivamente. Em 3 horas de exposição, a VC foi de 150,13% com FSAg10%, 108,37% FSAg50% e 56,75% com FSAg100%. Em 6 horas, os resultados foram de 127,83% com FSAg10%, 124,13% com FSAg50% e 30,95% com FSAg100%. Para SCF, a VC em 1 hora de exposição foi de 41,98% com FSAg10%, 16,59% com FSAg50% e 14,69% com FSAg100%. Em 3 horas, com FSAg10%, a VC obtida foi de 45,37%, com FSAg50%, de 20,02% e FSAg 100%, 16,98%. Com 6 horas de exposição, a VC foi de 66,39%, 25,37% e 22,30% para FSAg a 10%, 50% e 100% respectivamente. Nota-se então, com ZFL, o aumento da VC nas duas primeiras concentrações, seguido de redução significativa da mesma na maior delas, nos três tempos experimentais, enquanto com SCF a VC cai significativamente já na menor concentração, em todos os tempos de exposição. Assim, é possível afirmar que a SCF foi mais sensível que ZFL para a avaliação da toxicidade de FSAg no Teste do MTT, demonstrando ser uma ferramenta rápida e adequada para o biomonitoramento. Palavras-chave: linhagem ZFL, suspensão celular, redução do MTT Sociedade Brasileira de Ecotoxicologia (SBE) Universidade Federal de Pernambuco (UFPE) 231