Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento – MAPA
Secretaria de Defesa Agropecuária – SDA
Coordenação Geral de Apoio Laboratorial - CGAL
Manual de Métodos de Análises de Bebidas e Vinagres
Não alcoólicos
ÁCIDO ASCÓRBICO
Método 22
1. MÉTODO
Titulométrico (Método de Tillmans modificado)
2. PRINCÍPIO
Baseia-se na redução de 2,6-diclorofenolindofenol-sódio (DCFI) pelo ácido ascórbico. O DCFI
em meio básico ou neutro é azul, em meio ácido é rosa e sua forma reduzida é incolor. O ponto
final de titulação é detectado pela viragem da solução de incolor para rosa, quando a primeira
gota de solução do DCFI é introduzida no sistema, com todo ácido ascórbico já consumido.
3. MATERIAL
3.1 EQUIPAMENTOS
a) Balança analítica
b) Agitador magnético
3.2 REAGENTES E SOLUÇÕES
a) Solução de ácido oxálico 1%
b) Solução padrão de ácido ascórbico:
c) 50,0 mg de ácido ascórbico p.a. dissolvidos em solução de ácido oxálico a 1% e diluídos a
100 mL com ácido oxálico em balão volumétrico (recém preparada).
d) Solução de 2,6-diclorofenolindofenol sódio a 0,2%.
3.3 VIDRARIA E OUTROS MATERIAIS
a) Pipeta volumétrica de 10 mL
b) Bureta de 10 mL cor âmbar
c) Erlenmeyer de 250 mL
d) Balão volumétrico de 100 mL e 1000 mL (cor âmbar)
e) Barra magnética
PROCEDIMENTO
a) PADRÃO
Pipetar 10 mL da solução padrão de ácido ascórbico em erlenmeyer contendo 50 mL de solução
de ácido oxálico. Titular com solução de 2,6-diclorofenolindofenol sódio até coloração rosa
persistente por 15 segundos. Seja n o volume gasto nesta titulação; n/5 é o volume em mL
gastos para titulação de 1 mg de ácido ascórbico.
b) AMOSTRA
Pipetar ou pesar um volume conveniente de amostra e adicionar 50 mL da Solução de ácido
oxálico no erlenmeyer. Titular com a solução de 2,6-diclorofenolindofenol sódio padronizado
até coloração rosa persistente por 15 segundos.
5. CÁLCULO E EXPRESSÃO DO RESULTADO
O resultado será expresso em mg de ácido ascórbico por 100 mL ou 100 g da amostra, pela
fórmula:
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Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento – MAPA
Secretaria de Defesa Agropecuária – SDA
Coordenação Geral de Apoio Laboratorial - CGAL
Manual de Métodos de Análises de Bebidas e Vinagres
Não alcoólicos
AA =
ÁCIDO ASCÓRBICO
Método 22
100 × n'
n
×P
5
Onde:
AA = Teor de ácido ascórbico em mg/100 mL ou mg/100 g.
n’ = Volume de 2,6-diclorofenolindofenol sódio em mL gastos na titulação da amostra.
n = Volume de 2,6-diclorofenolindofenol sódio em mL gastos na padronização.
P = Massa da amostra em grama ou volume de amostra usado na titulação.
Nota:
a) Para amostra contendo anidrido sulfuroso, adicionar 10 mL de acetona, após o procedimento
descrito em (4-b), e antes da titulação com 2,6-DCFI.
b) Para amostra de coloração intensa, juntar ao suposto final da titulação 20 mL de éter etílico e
agitar. Caso a camada de éter fique rosa (idêntica à coloração obtida na padronização do 2,6DCFI), indica o ponto final da titulação.
REFERÊNCIA
BRASIL. Ministério da Agricultura. Portaria nº 76 de 26 de novembro de 1986. Dispõe sobre os
métodos analíticos de bebidas e vinagre. Diário Oficial da República Federativa do Brasil,
Brasília, 28 nov. 1986. Seção 1, pt. 2.
*INSTITUTO de tecnologia de alimentos. Manual técnico de análise química de alimentos,
Campinas, 1990.
* PEARSON, David. The Chemical Analysis of Foods. 6. ed. London: J. & A. Churchill.
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