FeSBE 2012 Resumo: 14.001 PROPRANOLOL STIMULATES ANGIOGENESIS DURING HEALING OF ISCHEMIC WOUNDS Autores 1,2 BANDEIRA, A. C. B. 1, MONTE-ALTO-COSTA, A. 1 DHE - UERJ, 2 DECBI - UFOP Apoio Financeiro: CNPq, FAPERJ and CAPES Resumo Objetivos Recently, it was discovered that β-blockers agents are able to modulate the wound healing process. Propranolol is a nonselective β-blocker widely used in clinical practice for treating diseases of cardiovascular system. Moreover, this drug has been shown to have antioxidant properties. The aim of this study was to evaluate the response of different doses of propranolol during cutaneous ischemic wound in rodents. Métodos The present study was approved by the Ethics Committee for Animal Use of UERJ (CEUA 009/2011). Male Wistar rats (n=7/for each group) were treated with propranolol at concentrations of 3 and 6 mg/kg/day, control group received only vehicle and positive control group received vitamin E (50 mg/kg/day). Propranolol administration began on the day of injury, and was administered daily until euthanasia. Bilateral incisions were performed the dorsum of each animal. The flap was sutured and a full-thickness wound was made between the incisional lesions. Wound contraction was evaluated and sections were stained with H&E and Sirius red. Laser Doppler flowmetry, biochemical analysis, stereological analysis, and protein expression of PECAM-1 were also measured. Resultados Propranolol treated with 3 mg group showed a visible reduction in wound area in 3 (23,4%), 7 (30,4%) and 10 (59,6%) days after wounding when compared to control group (P < 0,01 in d3 and d7 and P < 0,001 in d10).Only the group 3mg showed signs of reepithelialization. Control and propranolol-treated with 3 mg groups showed elongated red collagen fibers. Hydroxyproline levels (ng/mg tissue) were smaller in the propranolol-treated with 6 mg group (17.7±1.7) than in control group (33.6±3.5). MPO activity (NΦ 104/mg de ptn) was higher in the propranolol-treated with 3 mg group (1.2±0.2) compared to vitamin E group (0.3±0.1). The MDA levels (nmol/mg ptn) were decreased in vitamin E group (3.7±0.9) when compared with control (9.2±0.7), propranolol-treated with 3mg (8.9±0.4) and with 6 mg (12.2±1.2) groups. The carbonyls levels (nmol/mg ptn) were decreased in vitamin E (0.1±0.002) group when compared with control (1.1±0.2), propranololtreated with 3mg (0.9±0.2) and with 6 mg (0.8±0.08) groups. GSH/GSSG ratio was higher in vitamin E group (2.8±0.2) than in control group (1.6±0.2). The volume occupied by blood vessels was 8,1% greater in propranolol-treated with 3 mg group than in control group (P < 0,001), 10,2% than in propranolol-treated with 6 mg group (P < 0,001); 9,8% than in vitamin E group (P < 0,001). Propranolol-treated with 3 mg showed a higher PECAM-1 expression when compared to the other groups (P < 0,001). Propranolol treated with 3 mg group showed a great increase in blood perfusion in 3 (292,6%), 7 (346,3%) days after wounding when compared to control group (P < 0,05). No difference was found in d10 measurements. Moreover, in ischemic wound, propranolol-treated with 3 mg group showed increased in blood flow(349,6%) 10 days after wounding when compared to control group (P < 0,01). Conclusão We suggest that propranolol administered at 3 mg/day was able to modulate angiogenesis and improved closure of the lesion in this rodent model. FeSBE 2012 Resumo: 14.002 Evaluation of histological toxicity of N-acetylcysteine in liver and spleen of animals exposed to excessive supplementation of medicinal oxygen 1 MOREIRA LOPES, T. 1, FLAUSINO, G. F. 1, DINIZ, M. F. 2, PORTO, L. C. 1, BEZERRA, F. S. 1, Autores LIMA, W. G. D. 1, LIMA, W. G. 1 Departamento de Ciências Biológicas - UFOP, 2 Histologia e Embriologia - UERJ Apoio Financeiro: PROBIC - FAPEMIG, UFOP Resumo Objetivos N-acetylcysteine (NAC) is used in chronic respiratory diseases due its capacity of remove mucus in airway and prevents pulmonary tissue injury. NAC is largely used in cased with excessive oxygen medicinal supplementation. NAC is considered an antioxidant substance and a protector role has been described as its hepatic actions. In spleen NAC can acts as antiapoptotic to lymphocytes. This work aim evaluates hepatic and splenic histological alterations of animals previously treated with NAC and submitted to excessive administration of medicinal oxygen. Métodos This project was approved by Animal Ethics Committee of Federal University of Ouro Preto-MG (#2010/17). Animas were previously treated with NAC with 200mg/kg daily for seven days and after exposed to O 2 100%. Forty male BALB/c weighing 20-25g were divided in four groups: Control (CTR) exposed to ambient air, Group supplied with NAC (CTR+NAC), Group supplied with NAC exposed to hyperoxia for 24 hours (NH+24) and 48 hours (NH+48). After exposition time all animals were euthanized. Liver and spleen fragments were collected and processed by histological routine. Hematoxylin and Eosin staining was performed. Histological damages were determinate by light microscopy by semiquantitative graduation. The total areas of white and red pulp were quantified by morphometric techniques in Image J software. The dates were statistically analyzed by kolmogorv-Smirnov normality test and after by ANOVA variance test in Prism software. Statistical significance level was 5%. Resultados Anatomically was not observed changes in color and consistency of both organs. The microscopic evaluations showed liver and spleen of all groups with normal histological picture. Was not found necrosis or degenerated tissue areas. The hyperemia was the most important alteration found. This alteration was observed in 100% of animals CTR+ NAC, NH+24 e NH+48. Hyperplasia of Kupffer cells in capillary sinusoids was found in CTR+NH (20%), NH+24 (60%) e NH+48 (50%). Significant differences in spleen of animals treated with NAC were not found. The total with pulp area per microscopic field was similar in CTR (2.03±0.13x10 5 μ 2 ), CTR+NH (2.28±0.21x10 5 μ 2 ), NH+24 (2.97±0.11x10 5 μ 2 ) e NH+48(2.63± 0.13x10 5 μ 2 ; p=0.6472). The same way the total area of red per microscopic field in CTR (5.03±1.30x10 6 μ 2 ), CTR+NH (4.15±1.27x10 6 μ 2 ), NH+24 (4.51±1.21x10 6 μ 2 ) e NH+48(5.95± 0.13x10 6 μ 2 ; p=0.4628). Conclusão Taken together, our results appoint that NAC no promotes histological injury in liver and spleen when it is used to prevent airway damage caused by excessive oxygen supplementation. FeSBE 2012 Resumo: 14.003 EFEITO DE Piper methysticum (KAWA KAWA) NA TAXA DE SOBREVIVÊNCIA E PARÂMETROS OXIDATIVOS EM Drosophila melanogaster 1 Autores KRUM, B. N. 1, BAUERMANN, L. D. F. 1, FACHINETTO, R. 1, FACHINETTO, R. 1 Farmacologia - UFSM Apoio Financeiro: CAPES, CNPq, FAPERGS, FIPE-UFSM. Resumo Objetivos O Kawa kawa Piper methysticum é uma planta popularmente utilizada principalmente no tratamento da ansiedade e de infecções inflamatórias. Entretanto, existem divergências no seu uso devido à sua possível toxicidade. A D. melanogaster vem sendo utilizada por diversos grupos de pesquisa visando diminuir o uso de outros animais de laboratório (como ratos e camundongos) e consiste num modelo útil para a avaliação de parâmetros de toxicidade. Logo, o presente estudo avaliou a taxa de sobrevivência e parâmetros de estresse oxidativo em D. melanogaster tratadas com kawa kawa como indicadores de toxicidade. Métodos Protocolo 1- Curva de sobrevivência: 50 D. melanogaster foram colocadas em meio ágar com diferentes concentrações de extrato seco do rizoma de kawa kawa (1, 10, 100 µg/mL e 1, 10 mg/mL). Realizou-se a contagem de moscas que morreram a cada 2 dias. (n=3). Protocolo 2 – Parâmetros oxidativos: D. melanogaster foram colocadas em tratamento da mesma maneira que no protocolo 1. Entretanto, após 5 dias de tratamento, as D. melanogaster foram homogeneizadas em TrisHCl, centrifugadas e o sobrenadante utilizado para a análise da oxidação da diclorofluoresceína, atividade da catalase e níveis de tiol protéico. (n=6). Análise estatística: teste t. Significância estatística quando p < 0,05. Resultados Na curva de sobrevivência, observou-se que nas maiores concentrações de kawa kawa (1 mg/mL e 10 mg/mL) ocorreu uma diminuição da taxa de sobrevivência das D. melanogaster em relação ao controle a partir do décimo dia de tratamento. Quanto aos parâmetros bioquímicos, 5 dias de tratamento com kawa kawa reduziu a oxidação da diclorofluoresceína na concentração de 10 µg/mL, a atividade da catalase na concentração de 100µg/mL e os níveis de tiol proteíco na concentração de 10 mg/mL, em D. melanogaster. Conclusão A redução da sobrevida das D. melanogaster tratadas com altas concentrações de kawa kawa demonstra que esse composto natural apresenta efeitos tóxicos no modelo utilizado. Esses efeitos parecem estar relacionados com alterações oxidativas e nas defesas antioxidantes. Estes dados demonstram a viabilidade do uso de D. melanogaster para estudos toxicológicos uma vez que a toxicidade desta planta para ratos e camundongos também foi encontrada neste modelo. FeSBE 2012 Resumo: 14.004 AVALIAÇÃO DO EFEITO DA N-ACETILCISTEÍNA SOBRE A FORMAÇÃO IN VITRO DE PRODUTOS PROTEICOS DE OXIDAÇÃO AVANÇADA 1 Autores BOCHI, G. V. 1, CARGNIN, L. P. 1, TORBITZ, V. D. 1, KOBER, H. 1, SANGOI, M. B. 1, MORESCO, R. N. 1 Departamento de Análises Clínicas e Toxicológicas - UFSM Apoio Financeiro: Capes, CNPQ, Fapergs Resumo Objetivos Os produtos protéicos de oxidação avançada (AOPP) são considerados marcadores de dano oxidativo protéico, além de desempenharem um importante papel na modulação da resposta inflamatória em uma série de desordens patológicas, tais como insuficiência renal crônica, diabetes mellitus e obesidade. Considerando que o AOPP é formado in vivo a partir da ação do ácido hipocloroso (HOCl) sobre proteínas, especialmente a albumina humana (HSA), o objetivo deste estudo foi avaliar um modelo de formação de AOPP in vitro a partir da incubação de HSA com várias concentrações de HOCl, bem como investigar se a N-acetilcisteina (NAC) é capaz de previnir esta formação. Métodos A HSA (30 mg/mL) foi incubada com diferentes concentrações de HOCl (1 a 4 mM) por 30 minutos à temperatura ambiente. Uma amostra de HSA foi incubada nas mesmas condições em um meio sem HOCl, a qual foi utilizada como controle. Após a determinação da concentração mais eficaz de HOCl para formação de AOPP, a HSA (30 mg/dL) foi incubada com diferentes concentrações de NAC (0,025 a 1 mg/mL) e exposta ao HOCl 4 mM por 30 minutos. As concentrações de AOPP foram mensurados a 340 nm através de técnica previamente descrita por Witko-Sarsat et al. (1998)e os valores expressados em &mumol/L. Os dados foram expressos em média ± erro padrão e avaliados através da análise de variância (ANOVA) de uma via, seguida do pós-teste de Tukey, sendo P < 0,05 considerado estatisticamente significativo. Resultados O tratamento da HSA com o HOCl (1, 2 e 4 mM) induziu a formação de AOPP de maneira concentração-dependente e apresentou diferença significativa quando comparado com à HSA incubada sem HOCl ( P < 0,001). A concentração de HOCl 4mM foi a mais eficiente em promover a oxidação da HSA e induzir a formação de AOPP. Todas as concentrações de NAC avaliadas foram capazes de inibir a formação de AOPP induzida por HOCl, apresentando diferença significativa quando comparadas ao grupo contendo apenas HSA e HOCl ( P < 0,05). Conclusão A incubação do HOCl com a HSA promoveu um aumento na formação in vitro de AOPP de maneira concentraçãodependente, sendo que a adição de NAC foi capaz de inibir esta formação. Desta forma, na investigação de novas estratégias terapêuticas com a finalidade de amenizar ou, até mesmo, neutralizar o efeito de AOPP nas desordens patológicas na qual há o seu envolvimento, a NAC apresenta-se como uma alternativa terapêutica em inibir a formação de AOPP. FeSBE 2012 Resumo: 14.005 Efeito da remoção dos ovários e da isquemia e reperfusão intestinal sobre o número de plaquetas circulantes. 1 RODRIGUES, A.S. 2, BREITHAUPT-FALOPPA, A.C. 1, FANTOZZI, E.T. 1, ROMERO, D.C. 1, Autores VITORETTI, L. B. 1, OLIVEIRA-FILHO, R.M. 1, LIMA, W.T. 1 Farmacologia - Instituto de Ciências Biomédicas - USP, 2 LIM HC-FMUSP - USP Apoio Financeiro: CNPq, FAPESP(09/54823-2) Resumo Objetivos A isquemia e reperfusão (I/R) intestinal causa inflamação sistêmica. Distúrbios vasculares causados pela I/R intestinal alteram a interação leucócito-endotélio. Os hormônios sexuais femininos (HSF) são potenciais moduladores da inflamação após trauma intestinal. Visto que as plaquetas são potentes efetores da hemostasia, da resposta inflamatória e que sua adesão e aos vasos são eventos precoces na resposta inflamatória e na resposta imune, neste estudo quantificamos o número de plaquetas circulantes após a I/R intestinal em ratas ovariectomizadas (OVx). Métodos Após a anestesia (Cetamina, 100 mg/kg /Xilazina, 20 mg/kg, i.p.) ratas Wistar (160-180 g, 60 dias) foram submetidas à OVx. Decorridos 7 dias os animais foram anestesiados e tiveram a artéria mesentérica superior obstruída (clamp) por 45 min (isquemia). A reperfusão intestinal foi restabelecida após 2 h de isquemia. Os animais OVx foram tratados com 17bestradiol (280 ug/kg, s.c.) ou com progesterona (200 ug/kg, s.c.) 24h antes da indução da Isquemia. As plaquetas foram obtidas por centrifugação de amostras de sangue e processadas em estromatol para quantificação em câmara de Neubauer sob microscopia. Paralelamente, avaliamos por oximetria se 7 dias de OVx poderia afetar a saturação de oxigênio, frequência cardíaca e respiratória. Os parâmetros basais foram obtidos em animais não manipulados. CEA nº039, folha 101 livro 2 Resultados A OVx preveniu o significativo aumento do número de plaquetas observado em animais com ovários intactos após I/R intestinal. O tratamento dos animais OVx com progesterona antes da indução da I/R intestinal elevou (3,37±0,07; n:4, p < 0.05) o número de plaquetas em relação ao grupo não tratado (OVx: 1,56±0,07; n:7) e naqueles com os ovários intactos (não OVx: 2,20±0,27; n:7). O tratamento com estradiol não alterou o número de plaquetas em nenhum dos grupos estudados. A OVx reduziu a saturação de oxigênio, não alterou a frequência cardíaca mas elevou a respiratória. Conclusão Os efeitos da I/R intestinal na ausência de HSF podem ser mais lesivos. A progesterona parece exercer potencial efeito protetor na vigência de eventos isquêmicos ao atuar como anti-agregante plaquetário. Ainda, a influência dos hormônios ovarianos parece incidir também sobre alguns dos padrões fisiológicos avaliados. FeSBE 2012 Resumo: 14.006 AVALIAÇÃO FARMACOLÓGICA DE NOVOS DERIVADOS N-ACILIDRAZÔNICOS NO RELAXAMENTO DE MÚSCULO ESQUELÉTICO DE CAMUNDONGO IN VITRO 1 SILVA, A. M. S. 1, SILVA, M. C. S. 2, TONIN, M. D. L. 2, FRAGA, C. A. M. 2, BARREIRO, E. J. 1, Autores ZAPATA-SUDO, G. 1, SUDO, R. T. 1 Programa de Desenvolvimento de Fármacos - UFRJ, 2 Faculdade de Farmácia - UFRJ Apoio Financeiro: CNPQ, FAPERJ, CAPES Resumo Objetivos A Hipertermia Maligna (HM) é uma doença farmacogenética caracterizada por resposta hipermetabólica aos anestésicos inalatórios halogenados e à succinilcolina, descrita por Denborough e Lovell em 1960. A incidência de crises de HM é cerca de 1:5.000-100.000 anestesias gerais e a mortalidade >70% dos casos. A fisiopatologia da HM está associada a mutações no gene do canal de rianodina tipo 1 (RyR1) do músculo esquelético. O dantrolene sódico (DS), descoberto por Snyder e cols em 1967, é única substância disponível para o tratamento da HM. A principal limitação do DS é a sua baixa hidrossolubilidade. Com o objetivo de procurar novas substâncias úteis no tratamento da HM foram realizadas modificações estruturais em LASSBio-1216 e LASSBio-1221, substâncias que mostraram eficiência em relaxar a contratilidade de músculo esquelético de camundongos. Assim foram planejados e sintetizados os novos derivados Nacilidrazônicos LASSBio-1728, LASSBio-1729, LASSBio-1730, LASSBio-1731 (ácido e sal), LASSBio-1732 (ácido e sal) e LASSBio-1750 (ácido e sal) para avaliação de seus efeitos no músculo esquelético. Métodos O projeto foi aprovado pela comissão de ética e uso de animais do Centro de Ciências da Saúde da UFRJ (CEUA) (DFBCICB012). Músculos extensor longo dos dedos (EDL) de camundongos suíços machos (25–30g) foram preparados para registro de tensão muscular. As substâncias foram diretamente adicionadas na cuba experimental preenchida com solução de Ringer (pH 7,4 e à 37ºC) em concentrações crescentes de 0.5, 1, 5, 10, 20, 30 e 40 µM. A redução da amplitude dos abalos musculares foi comparada com aquela causada pelo DS. Resultados Os resultados mostram que a depressão dos abalos musculares após a adição de DS nas concentrações 1, 20 e 40 µM foi de 48,6±4,9, 30,5±4,6 e 34,4±6,1% do controle, respectivamente no EDL com uma IC50 de 1,8 µM. Ao aplicar os novos derivados nas mesmas concentrações, LASSBio-1728, LASSBio-1729 e LASSBio-1731 ácido foram os que mostraram os melhores resultados na redução da contratilidade dos abalos musculares do músculo EDL em relação ao DS com redução máxima na concentração de 40 µM de 38,8, 28,3 e 36,4% do controle, respectivamente, e IC50 de 17,29, 1,9 e 17,82 µM, respectivamente. Conclusão O trabalho conclui que o LASSBio-1728, LASSBio-1729 e LASSBio-1731 ácido reduziram a contratilidade de músculo esquelético comparável ao DS merecendo futuras investigações. FeSBE 2012 Resumo: 14.007 EFEITO DE ANESTÉSICOS E PRÉ-ANESTÉSICOS SOBRE PARÂMETROS METABÓLICOS EM RATOS SOB ESTRESSE 2 LYRA, A. A. S. 2, MOREIRA, C. C. L. 2, CADEDO, A. R. D. S. 2, MORAIS, H. D. 3, ZAIA, D. A. Autores M. 2, ZAIA, C. T. B. V. 2 Departamento de Ciências Fisiológicas - UEL, 3 Departamento de Química UEL Apoio Financeiro: PIBITI-CNPq-UEL/ PROIC Fundação Araucária Resumo Objetivos Anestésicos e pré-anestésicos são amplamente empregados e é importante não alterarem glicemia e corticosteronemia. Este trabalho objetivou avaliar as alterações metabólicas causadas por tiopental sódico e as associações cetamina/midazolam e zoletil/xilazina em ratos normais ou submetidos ao estresse de contenção. Métodos Ratos Wistar, machos (220-260g), provenientes do Biotério Central da Universidade foram mantidos em gaiolas para roedores no biotério setorial do Departamento, com ambiente de luz (12h claro/12h escuro) e temperatura (22±2°C) controladas, e alimentação (ração Nuvital®) e água ad libitum. Dois protocolos foram realizados cujo projeto foi aprovado pelo Comitê de Ética em Experimentação Animal, sob nº 11/07, processo nº 11564/07. O primeiro foi constituído de ratos sem qualquer manipulação de estresse e utilizados como controle (grupos C), sendo submetidos à injeção (i.p.; volume de 0,4 mL) de salina (S: 0,9%) ou de tiopental sódico (T: 50 mg/kg) ou das associações ketamina/midazolam (KM: 80 e 10 mg/kg, respectivamente) ou zoletil/xilazina (ZX: 40 e 10 mg/kg, respectivamente). No segundo protocolo, os ratos foram submetidos a estresse (grupos E) de contenção por 30 min e, imediatamente após, foram retirados do contensor e receberam (i.p.) as mesmas substâncias e dose dos grupos C. Todos os ratos foram decapitados nos tempos 0min, 15min ou 45min após a injeção, sendo o sangue coletado para determinação espectrofotométrica da glicemia (mg/dL; Kit Laborclin-PR) e fluorimétrica da corticosteronemia (µg/dL; J. Lab. Clin. Med. 53:830, 1959). Na análise estatística aplicouse teste ANOVA One-Way e SNK; adotou-se 5% como nível de significância ( p < 0,05). Resultados No primeiro protocolo, observou-se aumento significativo ( p < 0,0001) da glicemia no grupo CZX (0min: 131,26±2,09; 15min: 282,44±7,22; 45min: 377,05±11,69) em relação ao grupo CS (0min: 122,37±1,79; 15min: 130,33±2,13; 45min: 123,92±4,2); aumento significativo ( p < 0,05) na glicemia no grupo CKM no tempo 0min (129,45±1,67) e 45min (140,25±2,92) em relação ao grupo CS e no grupo CT ( p < 0,0001) no tempo 15min (147,76±1,45) em relação ao grupo CS15min, mostrando que essas substâncias alteram a glicemia. A corticosteronemia se elevou ( p < 0,001) em todos os grupos no tempo 15min (CS: 7,92±0,33; CZX: 7,48±0,44; CKM: 8,22±0,37; CT: 7,14±0,48), em relação ao tempo 0min (CS: 5,00±0,39; CZX: 4,56±0,33; CKM: 3,47±0,18; CT: 6,07±0,81, respectivamente) e retornou a valores basais após 45 min da injeção. No segundo protocolo (grupos E), a glicemia do grupo ES0min aumentou (143,41±4,27; p < 0,001) em relação ao grupo CS confirmando procedimento de estresse (30 min de contenção; tempo 0min) e se normalizou nos tempos 15min e 45min pós-contenção; apenas o grupo EKM manteve glicemia elevada mesmo após 45min da contenção (161,06±6,71; p < 0,001) comparado com o grupo ES45min (111,65±4,25). A corticosteronemia aumentou ( p < 0,001) em todos os grupos, retornando ao basal no tempo 45min, exceto para o grupo EKM45min (9,01±0,64) em relação ao grupo ES45min (5,79±0,73), mostrando que essa associação altera os parâmetros avaliados independente do procedimento de estresse. Conclusão As associações ketamina/midazolam e zilotil/xilazina, mesmo na ausência de estresse, promovem alteração significativa nos parâmetros avaliados; o tiopental sódico dentre os estudados é a melhor opção em protocolos com avaliação de parâmetros metabólicos. FeSBE 2012 Resumo: 14.008 EFFECT OF GUARANÁ POWDER (Paullinia cupana, Mart.) SUPPLEMENTATION ON LIPID, INFLAMMATION AND OXIDATIVE STRESS BIOMARKERS 1 OLIVEIRA, R. M. 1, SULEIMAN, L. 1, BELLÓ, C. 3, MORESCO, R. N. 3, BOSCHI, G. 4, DUARTE, M. M. M. F. 5, MÂNICA-CATTANI, M. F. 3, SOUSA FILHO, O. C. 1,3,5, CRUZ, I. B. M. 1 Autores Laboratório de Biogenômica - UFSM, 2 Universidade Aberta da Terceira Idade - UEA, 3 Programa de Pós-Graduação em Farmacologia - UFSM, 4 Curso de Farmácia - ULBRA, 5 Programa de PósGraduação em Bioquímica Toxicológica - UFSM Apoio Financeiro: FAPERGS Resumo Objetivos The aim of this study was to verify if a daily guaraná extract supplement could affect inflammatory- oxidative stress blood biomarkers. Métodos We conducted a single-center, open clinical protocol, performed to test if a daily guaraná extract supplement could affect the blood glycaemia, lipid, inflammation, ischaemic and oxidative stress blood biomarkers in a short period (14 days) of treatment of subjects with BMI > 23.5 < 33.5. Subjects: sedentary, male and female (37.0 ± 8.3 years) were selected to consume guaraná power (90mg/day) during 14 days without weight-loss intervention. The blood samples were analyzed before the guaraná supplementation (Day 0), seven and fourteen days (Days 7 and 14) of treatment was given. . The study was approved by the Comitê de Ética e Pesquisa (CEP - UFSM) under the CONEP registry number 0315.0.243.000-11. Resultados Guaraná supplementation significantly decreased the triglycerides (Day 0 - 146.0 ± 66.7; Day 7 - 132.7 ± 61.4; Day14 114.5 ± 60.3) and uric acid (Day 0 - 4.9 ± 1.5; Day 7 - 3.9 ± 1.3; Day 14 - 4.3 ± 1.3) levels whereas an increase in serum albumin (Day 0 - 4.5 ± 0.3, Day 7 - 4.3 ± 0.2, Day 14 - 4.9 ± 0.2) was also observed. The supplementation did not affect ultrasensitive protein C reative concentration (Day 0 - 4.2 ± 4.3; Day 7 - 3.6 ± 3.7; Day 14 - 3.8 ± 4.0). The lowering effect of guaraná was observed on oxidative metabolism markers like TBARS (Day 0 - 16.3 ± 12.1; Day 7 - 4.37 ± 3.5; Day 14 - 6.5 ± 8.6), AOPP (Day 0 - 179.1 ± 42.2; Day 7 - 148.1 ± 55.7; Day 14 - 135.8 ± 54.3) and protein carbonylation (Day 0 - 0.47 ± 0.09; Day 7 - 0.24 ± 0.07; Day 14 - 0.15 ± 0.05). However, the supplementation also decreased the superoxide dismutase (Day 0 - 32.7 ± 11.9; Day 7 - 34.1 ± 9.3; Day 14 - 25.6 ± 5.5), catalase (Day 0 - 38.1 ± 3.4; Day 7 - 40.2 ± 4.2; Day 14 - 34.0 ± 4.5) and total tiols (Day 0 - 154.1 ± 28.2; Day 7 - 51.9 ± 26.2; Day 14 - 133.7 ± 22.4) levels. These results were independent of BMI, sex and age variables. The Values are presented as the mean ± SD of repeated-measures ANOVA. Conclusão The results suggest a potential positive feedback circuit involving exogenous and endogenous antioxidants as well as the positive effect of a minimum guaraná dose on lipid and oxidative metabolism as previously prescribed to foods rich in catechins and caffeine like green tea and coffee. FeSBE 2012 Resumo: 14.009 ALTERAÇÕES COMPORTAMENTAIS E EM TECIDOS COLAGENOSOS DE RATOS TRATADOS CRONICAMENTE COM DOSE SUPRAFISIOLÓGICA DE GLICOCORTICÓIDE. 1 MUNHOZ, A. L. B. 1, JUNIOR, V. A. P. 2, PIMENTEL, E. R. 3, ZAVAN, B. 1, VILELA, A. S. B. 1 Autores Biologia Celular, Tecidual e do desenvolvimento - UNIFAL-MG, 2 Biologia Celular - UNICAMP, 3 Biologia Celular, tecidual e do desenvolvimento - UNIFAL-MG Apoio Financeiro: FAPEMIG Resumo Objetivos Comparar alterações em proteínas não colagênicas, proteoglicanos e glicosaminoglicanos da matriz extracelular em córnea e tendão calcanear de ratos machos e fêmeas após tratamento prolongado com glicocorticoide, bem como possíveis alterações relacionadas ao comportamento, em especial ao comportamento depressivo. Métodos Aprovado pelo Comitê de Ética para o Uso Animal da UNIFAL-MG (no 305/2010). Foram utilizados 20 ratos Wistar, distribuídos em quatro grupos, machos controle; machos tratados; fêmeas controle e fêmeas tratadas (n=5/grupo). O tratamento consistiu de uma injeção intraperitoneal semanal de dipropionato de betametasona + fosfato dissódico de betametasona (Diprospan® - 0,075mg/Kg de peso) durante cinco semanas. O grupo controle recebeu semanalmente volume equivalente de solução fisiológica. Ao fim da sexta semana, os animais foram sacrificados por injeção de hidrato de cloral 10% (0,3mL/100g de peso) e suas córneas e tendões calcaneares foram coletados. Cortes histológicos de 7µm de espessura foram corados com Hematoxilina e Eosina para a contagem de fibroblastos do tendão. Foi realizada extração dos componentes da matriz extracelular e os extratos foram analisados por SDS-PAGE, dosagem de proteínas não colagênicas e glicosaminoglicanos (GAGs) sulfatados. Para análise de GAGs totais realizou-se a digestão dos tecidos com papaína e posterior eletroforese em gel de agarose em tampão propilenodiamino. Para análise comportamental os animais foram submetidos ao teste de Nado Forçado. A análise estatística foi realizada por meio de análise de variância seguida do teste de Tukey. Quando os pressupostos de normalidade e homocedasticidade não foram satisfeitos foi aplicado o teste não paramétrico de Mann-Whitney-Wilcoxon. Resultados O tratamento aumentou a quantidade de proteínas não colagênicas do tendão em fêmeas, mas não em machos. Na córnea, a quantidade de proteínas não colagênicas diminuiu significativamente em ambos os grupos tratados. Tanto em machos quanto em fêmeas, o tratamento não alterou a quantidade de glicosaminoglicanos sulfatados presentes no tendão e na córnea. Os resultados sugerem que fêmeas possuem menor quantidade desses compostos na córnea em comparação com machos. No tendão, o tipo de GAG encontrado nos grupos controle e tratados foi o dermatan sulfato. Na córnea, o tratamento parece alterar o tipo de GAG, de queratam sulfato para dermatan sulfato. O tratamento apresentou efeito antidepressivo em ambos os grupos tratados. Conclusão O tratamento parece aumentar a quantidade de proteínas não colagênicas do tendão em fêmeas, mas não em machos, ao passo que na córnea dos grupos tratados houve decréscimo significativo da quantidade de proteínas não colagênicas presentes na matriz. Tanto em machos quanto em fêmeas o tratamento parece não alterar a quantidade de GAGs sulfatados do tendão e córnea. Entretanto, a dosagem de GAG na córnea sugere que fêmeas possuem menor quantidade desses compostos em comparação com machos. O tratamento apresentou efeito antidepressivo em ambos os grupos tratados. FeSBE 2012 Resumo: 14.010 DETERMINAÇÃO DE BIOMARCADORES INFLAMATÓRIOS E ENDOTELIAIS EM PACIENTES COM SÍNDROME METABÓLICA 1 SILVA, P. S. D. 1, BONA, K. S. D. 1, BITENCOURT, P. E. R. 1, BONFANTI, G. 1, CARGNELUTTI, Autores L. O. 1, TATSCH, E. 1, MORESCO, R. N. 1, MORETTO, M. B. 1 BIOQUÍMICA CLÍNICA E TOXICOLOGIA - UFSM Apoio Financeiro: Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) e Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Resumo Objetivos A Síndrome Metabólica (SM) representa um conjunto de fatores de risco cardiovasculares, tais como a resistência à insulina, hipertensão, intolerância à glicose e hipertrigliceridemia. Além disso, a SM é caracterizada por elevados níveis de marcadores inflamatórios, como a Proteína C Reativa (PCR), aumento do estresse oxidativo e alterações endoteliais. A enzima Gama Glutamil Transferase (GGT) está associada a altos níveis de PCR e representa a expressão da inflamação subclínica, além de, juntamente com o Óxido Nítrico (NOx) ter importante papel no processo de estresse celular. Assim, o objetivo desse trabalho foi verificar a atividade da enzima GGT e os níveis de PCR e NOx no soro de pacientes com SM. Métodos Foram utilizadas amostras de sangue de pacientes Controles (n=48, 45.68±1.35 anos, 9 homens e 39 mulheres) e diagnosticados como portadores de Síndrome Metabólica (n=39, 47.32±1.89 anos, 9 homens e 30 mulheres) antes de iniciarem seu programa de atividade física no Departamento de Educação Física da Universidade Federal de Santa Maria (UFSM) conforme aprovado pelo Comitê de Ética da UFSM (0049.0.243.000-08). O soro foi obtido para a determinação da atividade da GGT (método cinético Bioclin®), e para as dosagens de PCR (método turbidimétrico Bioclin®) e NOx (Clin Biochem. 44:348-350, 2011), ambas realizadas no sistema automatizado Cobas MIRA®. Os resultados foram expressos em média ± desvio padrão da média (DPM), sendo que a análise estatística utilizada foi “Teste t” e p < 0.05 foi considerado significativo. Resultados: Os pacientes com SM apresentaram um aumento significativo na atividade da GGT (34.79 ± 25.68 U/L; p < 0.0001), bem como nos níveis de PCR (7.52 ± 4.83 mg/L; p < 0.05) e NOx (190.9 ± 163.70 µmol/L; p < 0.0001), quando comparados ao grupo controle (GGT= 13.53 ± 9.12; PCR= 5.26 ± 3.96; NOX= 67.89 ± 41.49). Resultados Os pacientes com SM apresentaram um aumento significativo na atividade da GGT (34.79 ± 25.68 U/L; p < 0.0001), bem como nos níveis de PCR (7.52 ± 4.83 mg/L; p < 0.05) e NOx (190.9 ± 163.70 µmol/L; p < 0.0001), quando comparados ao grupo controle (GGT= 13.53 ± 9.12; PCR= 5.26 ± 3.96; NOX= 67.89 ± 41.49). Conclusão O aumento da PCR e GGT em pacientes com SM podem estar associados ao desenvolvimento de complicações vasculares, uma vez que, a reação de inflamação induzida pelos fatores de risco e a resposta imunológica associada são os principais eventos que conduzem ao processo de aterogênese, juntamente com a SM. Além disso, a GGT e NOx aumentados podem ser úteis como marcadores de estresse oxidativo e de alterações endoteliais na SM. FeSBE 2012 Resumo: 14.011 EFEITO MODULADOR DIRETO DE 17β-ESTRADIOL, PROGESTERONA E SEUS DERIVADOS SINTÉTICOS NA ATIVIDADE DE CuZnSOD EM ERITRÓCITO HUMANO 1 FIGUEIREDO, C. G. * 3, UNFER, T. C. ** 1, ZANCHI, M. M. * 4, MAURER, L. H. ** 5, BAUERMANN, L. D. F. 2, EMANUELLI, T. 1 Graduação no curso de Farmácia, CCS - UFSM, 2 Autores Departamento de Tecnologia e Ciência dos Alimentos, CCR - UFSM, 3 Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, CCS - UFSM, 4 Programa de Pós-Graduação em Ciência e Tecnologia de Alimentos, CCR - UFSM, 5 Departamento de Fisiologia e Farmacologia, CCS - UFSM Apoio Financeiro: FAPERGS, CAPES, REUNI Resumo Objetivos A superóxido dismutase (SOD) tem uma função chave no controle de níveis celulares de espécies reativas de oxigênio, bem como seus moduladores podem ser potenciais agentes terapêuticos em doenças relacionadas com o estresse oxidativo. Em mulheres na menopausa ocorre redução dos níveis séricos de hormônios esteróides e estresse oxidativo. Este estudo avaliou se hormônios esteróides naturais e sintéticos poderiam modular diretamente a atividade da CuZnSOD em eritrócitos humanos independente de alterações na expressão da enzima. Métodos O protocolo de pesquisa foi aprovado pelo comitê de ética local da Universidade Federal de Santa Maria (Brasil) (CAAE n° 0120.0.243.000-06). Quatro mulheres saudáveis (20-28 anos) foram doadoras do sangue. Obtivemos amostras de eritrócitos e plasma rico em plaquetas (PRP). As amostras de enzima foram pré-incubadas durante 24 horas a 37°C na ausência (controle) e na presença de concentrações crescentes de hormônios esteróides. Quatro hormônios foram avaliados: os esteróides naturais 17β-estradiol 17-acetato (E2) e progesterona (PROG), e os derivados sintéticos βestradiol 3-benzoato de metila (E2Benz) e 17-acetato de medroxiprogesterona (MPA). Após a pré-incubação, foi avaliada a atividade da CuZnSOD por espectrofotometria (560nm) usando o método de redução do azul de tetrazólio. Os dados foram analisados por análise de variância, seguida por teste de Duncan. Resultados Ambos os estrogênios naturais e sintéticos (E2 e E2Benz) e progestinas (PROG e MPA) tiveram um efeito bifásico sobre a atividade da enzima: as baixas concentrações de hormônio causaram um aumento dose-dependente da atividade da enzima, a qual foi suprimida em concentrações mais elevadas de hormônios. A atividade da CuZnSOD eritrocitária aumentou até 8 vezes quando incubada com E2 nas concentrações de 2-3nM (EC50=1,9nM). Quando a enzima foi incubada com PROG a atividade aumentou até 19 vezes usando concentrações de 0,3-3 nM (EC50=1,0nM). A atividade da CuZnSOD aumentou até 7 vezes quando incubada com E2Benz nas concentrações de 1-10 nM (EC50=1,9nM) e incubada com MPA nas concentrações de 102-104nM a atividade da enzima aumentou até 10 vezes (EC50=230,8nM). Em concentrações superiores as citadas, o efeito foi abolido. Na incubação com as combinações hormonais de E2 mais MPA e E2Benz mais PROG na concentração de 1 nM aumentou a atividade da enzima em 4 e 8 vezes respectivamente, assim reduzem a concentração de hormônio necessária para a estimulação do CuZnSOD de eritrócitos humanos. Conclusão Hormônios esteróides naturais e sintéticos apresentam um efeito modulador direto sobre a atividade da CuZnSOD de eritrócitos humanos in vitro. Este efeito pode contribuir para a regulação fisiológica da atividade da enzima em condições onde os hormônios esteróides sofrem variações, como o ciclo ovulatório, a menopausa e terapia de reposição hormonal. FeSBE 2012 Resumo: 14.012 PROSPECÇÃO FITOQUÍMICA E AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIBACTERIANA E ANTIFÚNGICA DE Aspidosperma spruceanum BENTH. EX MUELL. ARG. (APOCYNACEAE) 1 SILVA, A. D. V. 1, SILVA, M. L. 1, GUIMARÃES, N. M. 1, PONTES, A. C. A. A. 1, QUARESMA, Autores C. C. 2, OLIVEIRA, A. B. 1, DOLABELA, M. F. 1 FACULDADE DE FARMÁCIA - UFPA, 2 FACULDADE DE FARMÁCIA - UFMG Apoio Financeiro: MEC-CNPQ/CAPES Resumo Objetivos De Aspidosperma spruceanum, conhecida vulgarmente como araracanga, foram isolados os alcaloides aspidoalbina; acetilaspidoalbina e desmetilaspidolimidina (GILBERT et al., Tetrahedron, 21, 1141-61, 1965). Extratos e alcaloides isolados de Aspidosperma têm apresentado atividades antiplasmódica e antimicrobiana. O objetivo deste trabalho foi realizar uma prospecção fitoquímica e avaliar as atividades antimicrobianas e antifúngicas do extrato etanólico alcaloídico de cascas de Aspidosperma spruceanum BENTH. EX MUELL. ARG. (APOCYNACEAE). Métodos A. spruceanum foi coletada no Campus da UFMG, pelo Prof. Dr. Julio Antonio Lombardi. A exsicata foi depositada no Herbário do ICB, UFMG, sob o registro BHCB 46274. As cascas foram lavadas, secadas em estufa, seguido de moagem. O pó da planta foi tratado com hidróxido de amônio, colocado em cartucho e extraído, sucessivamente, em aparelho de Soxhlet, com diclorometano e etanol 96oGL. Os percolatos obtidos foram concentrados em evaporador rotatório, a 50o C, até resíduos. A abordagem fitoquímica foi realizada em Cromatografia em camada delgada (CCD) e cromatografia liquida de alta eficiência (CLAE). A avaliação da atividade antimicrobiana foi realizada pelo teste de difusão em disco (Bauer et al., American J. of Clinical Pathology, 45: 493-496, 1966) utilizando cepas padrão ATCC (American Type Culture Colection) de Staphylococcus aureus, ATCC 29213; Escherichia coli, ATCC 25922; Pseudomonas aeruginosa, ATCC 25853 e Candida albicans, ATCC 40175. O DMSO, solvente da amostra, foi utilizado como controle negativo do ensaio. Como controles positivos foram utilizados: E. coli e S. aureus o cloranfenicol 30μg(disco comercial), P. aeruginosa a gentamicina 10μg (disco comercial) e Candida albicans a nistatina (solução comercial-120μg/disco). Resultados Através da prospecção fitoquímica, em CCD, do extrato etanólico alcaloídico foi possível detectar a presença de alcaloides, saponinas, triterpenóides e esteróides. Estudo em CLAE observou-se um pico majoritário (tempo de retenção= 1,1 minutos), que deve estar relacionado ao alcalóide. Em nenhum dos testes foi observada a formação de halos de inibição do crescimento bacteriano e fúngico. Nos controles positivos e negativo observaram-se a resposta esperada. Conclusão O extrato não apresentou atividades antimicrobianas e antifúngicas, logo este extrato foi considerado inativo frente as cepas de microrganismos testadas. FeSBE 2012 Resumo: 14.013 Estudos fitoquímicos e atividade antimicrobiana da A. ramiflorum 1 Autores PINHEIRO, A. M. 1, LUZ, D. A. D. 1, QUARESMA, C. C. 1, DOLABELA, M. F. 1, DOLABELA, M. F. 1 Farmácia - UFPA Apoio Financeiro: Resumo Objetivos Extrato metanólico obtido A. ramiflorum apresentou atividade antimicrobiana moderada para B. subtilis (CIM = 250 956g/mL) e S. aureus (CIM = 500 956g/mL), sendo inativo contra E. coli e P. aeruginosa (CIM > 1000 956g/mL). Esta atividade antimicrobina foi atribuída a ramiflorina A e B (Tanaka et al., Braz. J. of Med. and Biol. Research, 39: 387-391, 2006). Visando melhorar a atividade antimicrobiana foram obtidos extratos alcaloides, seguida de caracterização fitoquímica e avaliação da atividade antimicrobiana. Métodos A. ramiflorum foi coletada no Campus da UFMG, pelo Prof. Dr. Julio Antonio Lombardi. A exsicata foi depositada no Herbário do ICB, UFMG, sob o registro BHCB 848. As cascas e galhos foram lavados, secados em estufa, seguido de moagem. O pó da planta foi tratado com hidróxido de amônio, colocado em cartucho e extraído, sucessivamente, em aparelho de Soxhlet, com diclorometano e etanol 96o GL. Os percolatos obtidos foram concentrados em evaporador rotatório, a 50o C, até resíduos. A abordagem fitoquímica foi realizada em Cromatografia em camada delgada (CCD) e cromatografia liquida de alta eficiência (CLAE). A atividade antimicrobiana foi realizada através do teste de difusão em Agar (Bauer et al., American J. of Clinical Pathology, 45: 493-496, 1966), sendo utilizadas Cepas American Type Culture Colection (ATCC) de Staphylococcus aureus, ATCC 29213; Escherichia coli, ATCC 25922; Pseudomonas aeruginosa, ATCC 25853 e Candida albicans, ATCC 40175. O DMSO, solvente das amostras, foi utilizado como controle negativo do ensaio. Como controles positivos foram utilizados: E. coli e S. aureus o cloranfenicol 30μg(disco comercial), P. aeruginosa a gentamicina 10μg(disco comercial) e Candida albicans a nistatina (solução comercial-120μg/disco) Resultados O extrato diclorometânico obtido do caule (rendimento=2,55%) e o extrato diclorometânico obtido de cascas (rend=1,48%) revelaram positivamente, em CCD, para saponinas, triterpenos-esteróides, flavonoides e alcaloides. O extrato etanólico obtido de caules (rend=9,01%) foi detectado flavonoides e alcaloides. Estudos em CLAE demonstraram que o extrato diclorometânico de caules deve conter pelo menos dois alcaloides diferentes, já os demais foram detectados apenas um pico, com mesmo tempo de retenção, relacionado aos alcaloides. No teste de difusão em Agar, os extratos diclorometânico de cascas e etanólico de caules não inibiram o crescimento das bactérias e do fungo. Enquanto que, foi observado halo de inibição em torno do disco contendo o extrato diclorometânico de caules (500g) para o S. aureus. Conclusão Portanto, o alcaloide presente no extrato diclorometânico de caules, e ausente nos demais, deve ser o responsável pela inibição do crescimento de S. aureus. FeSBE 2012 Resumo: 14.014 INVESTIGAÇÃO DA ATIVIDADE BIOLÓGICA DO EXTRATO ETANÓLICO OBTIDO DE PARTES AÉREAS DE XYLOPIA CAYENNESIS L. (ANNONACEAE). 1 Autores PONTES, A. C. A. D. A. 1, SILVA, A. D. V. 1, QUARESMA, C. C. 1, SILVA, M. L. D. 1, GUIMARÃES, N. M. 1, DOLABELA, M. F. 1 Faculdade de Farmácia - UFPA Apoio Financeiro: MEC/SEsu, CNPq Resumo Objetivos Extratos obtidos de frutos frescos e secos, folha, casca de Xylopia aethiopica e óleo essencial obtido da raiz mostraram vários graus de atividade contra as bactérias Gram positivas ( < i>Bacillus subtilis e Staphylococcus aureus), Gram negativa ( < i>Pseudomonas aeruginosa) e fungo ( < i>Candida albicans; Afr. J. Tradit. Complement. Altern. Med. 5(4); 391, 2008), porém outras espécies de Xylopia ainda carecem de estudos de avaliação de atividade antimicrobiana. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana e antifúngica do extrato etanólico das partes aéreas da espécie vegetal Xylopia cayennesis. Métodos A planta foi coletada na Embrapa e sua identificação foi realizada por comparação com a exsicata do Herbário do Museu Paraense Emílio Goeldi. As partes aéreas foram lavadas, secadas em estufa a 45ºC, moídas em moinho de facas e submetidas à maceração com etanol (96º GL). As tinturas obtidas das partes aéreas foram concentradas em evaporador rotatório, a 50ºC, até resíduos. A atividade antimicrobiana foi realizada através do teste de difusão em Agar (American J. of Clinical Pathology 45; 493, 1966), sendo utilizadas Cepas American Type Culture Collection (ATCC) de Staphylococcus aureus, ATCC 29213; Escherichia coli, ATCC 25922; Pseudomonas aeruginosa, ATCC 25853 e Candida albicans, ATCC 40175. O DMSO, solvente das amostras, foi utilizado como controle negativo do ensaio, sendo aplicado 10 μl em disco. Como controles positivos foram utilizados: cloranfenicol 30μg/disco para E. coli e S. aureus, gentamicina 10μg/ disco para P. aeruginosa e a nistatina 120μg/disco para Candida albicans. Resultados O extrato etanólico de X. cayennensis, na concentração de 500 μg/disco, não inibiu o crescimento bacteriano e fúngico(halo de inibição= 0cm). O cloranfenicol, na concentração de 30μg/disco, inibiu o crescimento de E. coli e S. aureus (halos de inibição= 27,44 ± 0,08 e 25,6 ± 0,3cm). A gentamicina, 10μg/disco comercial, inibiu P. aeruginosa (halo de inibição= 18,8 ± 0,1cm) e a nistatina, (120μg/disco), inibiu o crescimento de Candida albicans(halo de inibição= 12,05 ± 0,5 cm). No disco de DMSO, controle negativo, não foi observado halo de inibição. Conclusão Baseado nos resultados obtidos, a espécie estudada não apresenta atividade antimicrobiana frente aos microrganismos testados.