Análise Hematológica de Alevinos de Jundiá (Rhamdia quelen) Submetidos a Dieta Alimentar com Diferentes Níveis de Inclusão de Alho (Allium sativum) Jandir Jose Bard1, Wilson Rogerio Boscolo2, Marcia Luzia Ferrareze Maluf3, Aldi Feiden4, Adilson Reidel5, Ilson Mahl6, Arcângelo Augusto Signor6 1 Engenheiro de Pesca, E-mail:[email protected] Zootecnista, Prof. Adjunto da UNIOESTE, e-mail: [email protected] 3 Bioquímica, UNIOESTE. 4 Engenheiro Agrônomo, Prof. Adjunto da UNIOESTE, e-mail: [email protected] 5 Doutorando em Aqüicultura, UNESP/Jaboticabal, e-mail: [email protected] 6 Acadêmicos de Engenharia de Pesca, UNIOESTE, [email protected] 2 RESUMO: Este trabalho tem como objetivo a avaliação hematológica de alevinos de jundiás (Rhamdia quelen) submetidos a dieta alimentar com diferentes níveis de inclusão de alho (Allium sativum) na ração (0, 3, 6, 9 e 12 g/kg). Foram utilizados 100 alevinos de jundiá (Rhamdia quelen), sendo estes acondicionados em 20 tanques-rede com cerca de 0,18m3 de volume útil, divididos em 5 tratamentos e 4 repetições em um delineamento inteiramente casualizado, onde colocou-se 5 peixes por tanque-rede durante um período de dois meses. Os peixes foram alimentados duas vezes ao dia às 8:00 e às 17:00 horas. As rações foram formuladas de forma a serem isoproteicas e isoenergéticas. Os valores médios de temperatura, oxigênio dissolvido, pH e condutividade elétrica permaneceram entre 17,72±2,10 ºC; 6,30±1,46 mg/L; 7,87±1,22 e 50,55±0,35 µS/cm respectivamente. Foi observado efeito quadrático na análise de hematócrito com valores de 30,33; 31,42; 27,33; 27,33 e 30,75 para os diferentes níveis de alho nas rações. Pode-se utilizar a inclusão de até 12 g/Kg de alho na ração com intuito de aumentar a imunidade dos peixes em relação a patógenos oportunistas presentes no ambiente de cultivo. PALAVRAS-CHAVE: hematologia, uso fitoterápico, Rhamdia quelen, nutrição Haematologic analysis of Jundia (Rhamdia quelen) fingerlings submitted at an alimentary diet with different levels of garlic (Allium sativum) inclusion ABSTRACT: This work had as objective the haematologic evaluation of jundias (Rhamdia quelen) fingerlings (Rhamdia quelen) submitted at an alimentary diet with different levels of garlic (Allium sativum) inclusion in the ration (0, 3, 6, 9 and 12 g/kg). 100 fingerlings of jundia (Rhamdia quelen) was used, being these conditioned in 20 net-tanks with about 0,18m3 of useful volume, divided in 5 treatments and 4 repetitions in an entirely casualized delineation, where 5 fish for net-tanks during a period of two months were placed. The fish were fed two times a day at 8:00 and at 17:00 hours. The rations were formulated in a form to being isoproteics and isoenergetics. The temperature average values, dissolved oxygen, pH and electric condutividade had remained between 17.72±2.10 ºC; 6.30±1.46 mg/L; 7.87±1.22 and 50.55±0.35 µS/cm respectively. Quadratic effect in the analysis of hematocrito with values of 30.33 was observed; 31.42; 27.33; 27.33 and 30.75 for the different levels of garlic in the rations. The inclusion of up to 12 g/Kg of garlic in the ration with intention of increasing the immunity of the fish in relation to the opportunists pathogenics present in the culture environment can be used. KEYWORDS: haematology, phytoterapic use, Rhamdia quelen, nutrition 22 a 26 de maio de 2006 - Toledo - Paraná - Brasil INTRODUÇÃO Os peixes são desprovidos de medula óssea e de linfonodos; assim o tecido mielóide e linfóide estão geralmente, associados ao mesmo órgão. O rim cefálico e o baço são os principais órgãos hematopoiéticos de peixes teleósteos, uma vez que os centros hematopoiéticos desses órgãos são responsáveis pela origem e inflamação dos eritrócitos, linfócitos, monócitos, trombócitos e granulócitos (Tavares-Dias & Moraes, 2004). Para estes autores a eritropoiése e a leucopoiése são influenciados por fatores biológicos como a reprodução, o sexo, a maturação gônadal, a idade, o estado nutricional, estresse e ainda sofrem influência de fatores ambientais como temperatura, pH, concentração de oxigênio dissolvido na água e sazonalidade. Portanto, o uso de alguns alimentos que apresentam características probiótica, visa aumentar a imunidade contra possíveis introduções de patógenos. O alho possui propriedades diaforéticas, expectorantes, antiespasmódicas, anti-sépticas, bacteriostáticas, antivirais, hipotensivas, antifúngicos e antihelmínticas, além de promover leucocitose. Seu uso é preconizado no tratamento de bronquite crônica, secreções, resfriados recidivantes, coqueluche, asma brônquica e influenza (Oliveira, 1991). O objetivo do presente trabalho é a avaliação hematológica de alevinos do jundiá (Rhamdia quelen) estocados em tanquesrede experimentais de pequeno porte, e submetidos a dieta alimentar com diferentes níveis de inclusão de alho (Allium sativum) na ração. MATERIAL E MÉTODOS Os peixes utilizados eram oriundos de uma piscicultura da cidade de Toledo, região Oeste do Estado do Paraná. Foram utilizados 100 alevinos de jundiá (Rhamdia quelen), sendo estes acondicionados em 20 tanques-rede com cerca de 0,18m3 de volume útil, divididos em 5 tratamentos e 4 repetições em um delineamento inteiramente casualizado, onde colocou-se 5 peixes por tanque-rede durante um período de dois meses. Os tanques-rede foram fixados em fileira única em um tanque escavado com paredes de concreto com volume aproximado de 1.000m3 localizado no Centro de Pesquisas em Aqüicultura Ambiental/IAP/Toledo-PR, de forma a ficarem eqüidistante uns dos outros. Os peixes foram alimentados duas vezes ao dia às 8:00 e às 17:00 horas, sendo a ração processada no Laboratório de Apoio Técnico do curso de Engenharia de Pesca/Campus de Toledo. As rações foram formuladas de modo a possuírem diferentes níveis de alho em sua composição e serem isoproteicas e isoenergéticas entre os tratamentos (Tabela 1). Os parâmetros físico-químicos como temperatura foram avaliados diariamente em dois horários, às 8:00 e às 17:00 horas, enquanto que pH, condutividade elétrica e oxigênio dissolvido foram avaliados quinzenalmente. O parâmetro zootécnico avaliado no início do experimento foi o peso inicial médio, enquanto o peso final médio e o comprimento final médio foram determinados no dia da coleta de sangue para análises hematológicas dos mesmos. Ao final do experimento os peixes foram capturados e anestesiados com Eugenol (60 mg/L) e em seguida, o sangue foi coletado por punção caudal, com auxílio de seringa contendo anticoagulante EDTA (10%). A agulha foi introduzida no pedúnculo caudal, na inserção da nadadeira, até atingir a coluna, então aspirou-se o sangue lentamente do vaso sangüíneo, sem muita pressão no êmbolo. Colheu-se a alíquota de 0,5 mL de sangue de cada animal. Essa alíquota destinou-se à determinação da contagem de eritrócitos, hematócrito e contagem de leucócitos, de acordo com a metodologia previamente descrita por (Tavares-Dias et al., 2000). Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância em nível de 5% de probabilidade utilizando-se programa estatístico SAEG (Sistemas de Analises Estatísticas e Genéticas). RESULTADOS E DISCUSSÃO Os valores médios dos parâmetros físico-químicos de temperatura (ºC), pH, condutividade elétrica (µS/cm), oxigênio dissolvido (mg/L) avaliados durante o cultivo nos tanques-rede foram de 17,72±2,10, 7,87±1,22, 50,55±0,35, 6,30±1,46. Os valores médios de peso final, comprimento final, hemácias, leucócitos e hematócrito, podem ser observados na Figura 1. O peso final médio e o comprimento final médio não apresentaram diferenças estatísticas (P>0,05) entre os tratamentos. Portanto, os níveis de inclusão de alho (A. sativum) não influenciaram no desempenho dos animais, 22 a 26 de maio de 2006 - Toledo - Paraná - Brasil para a fase analisada. Não foram observadas diferenças significativas (P>0,05) para os parâmetros de hemácias e leucócitos. Por outro lado, os valores médios de hematócrito apresentaram diferença significativa (P<0,05) apresentando maior índice de hematócrito para os tratamentos contendo 3 e 12 g/kg de alho na ração e menores índices para os tratamentos que continham 6 e 9 g/kg de alho na ração. A simplicidade e a rapidez da maioria das técnicas de amostragem de sangue, provavelmente é responsável pelo crescente aumento do uso da hematologia como meio de estabelecer a saúde dos peixes. Em medicina, as técnicas hematológicas são usadas de três maneiras, na seguinte ordem: diferenciação do sangue normal do anormal, diagnóstico da doença ou anormalidade e estudos hematológicos detalhados (Ranzani-Paiva, 2005). Fatores como o estado nutricional, sazonalidade, maturação gônadal, sexo e variação genética também podem influenciar significativamente as vaiáveis hematológicas estes fatores podem ter influênciado neste experimento, pois os peixes não apresentavam infecções aparentes entre os tratamentos. Estando em acordo com, Tavares-Dias & Moraes, (2004), onde afirmam que a maturação gônadal e desova apresentam influência na avaliação hematológicas com tendência de aumento da quantidade de eritrócitos, mas a concentração da hemoglobina corpuscular média (CHCM) raramente se altera. Rhamdia quelen na fase juvenil, estudados por Tavares-Dias et al. (2002a), apresentaram valores de eritrócitos maiores ao descritos para adultos de ambos os sexos, assim como para os bagres americano e africano. Segundo TavaresDias (2002b), avaliando peixes infectados por Dolops carvalhoi, houve redução significativa do hematócrito e dos teores séricos de magnésio e aumento significativo da concentração de hemoglobina corpuscular média, da glicemia, a concentração sérica de proteína total, sódio, cloreto, da quantidade de monócitos e de células granulocíticas especiais. O número de eritrócitos, trombócitos e leucócitos totais, assim como a contagem diferencial de linfócitos, neutrófilos e eosinófilos, bem como a concentração de hemoglobina e os níveis séricos de potássio e cálcio não foram influenciados pela infecção. CONCLUSÕES Pode-se utilizar a inclusão de até 12 g/kg de alho na ração com intuito de aumentar a imunidade dos peixes em relação a patógenos oportunistas presentes no ambiente de cultivo. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1.OLIVEIRA, F., Farmacologia. São Paulo, Atheneu, p.412, 1991. 2.RANZANI-PAIVA, M. J. T., Curso: Hematologia Aplicada a Piscicultura. Instituto de Pesca, CAUNESP-UNESP-SP, 2005. 3. TAVARES-DIAS, M. et al. Relação hepatossomática e esplenosomática em peixes teleósteos de cultivo intensivo. Revista brasileira Zoologia, Curitiba, v. 17, p.273-281, 2000. 4.TAVARES-DIAS,M.; MELO, J.F.B.; MORAES, G.; MORAES. F.R.; Características Hematológicas de Teleósteos Brasileiros. IV. Variáveis do Jundiá Rhamdia quelen (Pimelodidae). Ciência Rural, Santa Maria. V.32, n.4, p.693-698, 2002a. 5.TAVARES-DIAS, M.; MORAES, F.R.; ONAKA, E.M.; CAMPOS-FILHO, E. Hematologia de teleósteos brasileiros com infecção parasitária. III. Características do híbrido Tambacu infectado com Dolops carvalhoi Lemos de Castro, 1949 (Crustácea, Branchiura). VII ENBRAPOA e III ELAPOA, Foz do Iguaçu, Resumos, p.38, 2002b. 6.TAVARES-DIAS, M.; MORAES, F. R.; Hematologia de Peixes Teleósteos; São Paulo, 2004. 22 a 26 de maio de 2006 - Toledo - Paraná - Brasil TABELA 1. Composição percentual e química das rações com diferentes níveis de alho (Allium sativum) utilizada para alevinos de jundiá (Rhamdia quelen). Níveis Ingredientes 0,0 46,18 0,3 46,23 Farinha de vísceras de aves 25,00 25,00 Alho desidratado 0,00 0,30 Milho 21,84 Óleo de soja 5,48 Suplemento (min+vit)1 1,00 Farelo de soja Sal comum Níveis de alho(%) 0,6 46,29 0,9 46,34 1,2 46,40 25,00 25,00 25,00 0,60 0,90 1,20 21,39 20,40 20,49 20,03 5,48 5,67 5,77 5,87 1,00 1,00 1,00 1,00 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 Amido 19,84 19,82 19,79 19,77 18,75 Cálcio total 1,21 1,21 1,21 1,21 1,21 3200,00 3200,00 3200,00 3200,00 3200,00 Fibra bruta 3,51 3,60 3,70 3,80 3,89 Fósforo total 0,98 0,97 0,97 0,97 0,97 10,02 TOTAL Nutrientes % Energia digestível (Kcal/kg) Gordura 9,69 9,77 9,86 9,94 Linoleico 4,18 4,23 4,27 4,32 4,36 Lisina 2,15 2,15 2,15 2,15 2,15 Metionina+cistina 1,36 1,36 1,36 1,36 1,36 Proteína bruta 38,00 38,00 38,00 38,00 38,00 1 Níveis de garantia por quilograma do produto: Vit. A, 500.000UI; Vit. D3, 200.000UI; 1Vit. E, 5.000mg; Vit. K3, 1.000mg; Vit. B1, 1.500mg; Vit. B2, 1.500mg; Vit. B6, 1.500mg; Vit. B12, 4.000mg; Ác. Fólico, 500mg; Pantotenato Ca, 4.000mg; Vit. C, 15.000mg; Biotina, 50mg; Inositol, 10.000; Nicotinamida, 7.000; Colina, 40.000mg; Co, 10mg; Cu, 500mg; Fe, 5.000mg; I, 50mg; Mn, 1500mg; Se, 10mg; Zn, 5.000mg. 22 a 26 de maio de 2006 - Toledo - Paraná - Brasil (g) PESO 80 60 40 20 0 0 0 0 3 3 3 3 6 6 6 6 9 9 9 9 12 12 12 12 9 9 9 9 12 12 12 12 TRATAMENTO (g/kg) COMPRIMENTO (cm) 20 15 10 5 0 0 0 0 3 3 3 3 6 6 6 6 TRATAMENTO (g/kg) CÉLULAS HEMÁCIAS 2000000 1500000 1000000 500000 0 0 0 0 3 3 3 3 6 6 6 6 9 9 9 9 12 12 12 12 TRATAMENTO (g/kg) LEUCÓCITOS CÉLULAS 6000 4000 2000 0 0 0 0 3 3 3 3 6 6 6 6 9 9 9 9 12 12 12 12 TRATAMENTO (g/kg) % HEMATÓCRITO 35 30 25 20 15 10 5 0 0 0 0 3 3 3 3 6 6 6 6 9 9 9 9 12 12 12 12 TRATAMENTO (g/kg) Figura 1. Parâmetros analisados para o desempenho de jundiá (Rhamdia quelen) com diferentes níveis de alho (Allium sativum) utilizada nas rações 22 a 26 de maio de 2006 - Toledo - Paraná - Brasil 22 a 26 de maio de 2006 - Toledo - Paraná - Brasil