SÍNTESE DE PROTEÍNAS
1
ZAMECNICK (1953) DETERMINA A LOCALIZAÇÃO CELULAR DA SÍNTESE DE PROTEINAS
Aminoácidos radioativos
Horas ou dias
Proteínas P
t í
radioativas em todas as frações celulares
Extração
Homogeneização
Fracionamento celular por centrigugação
Minutos
POLISOMOS
Proteínas radioativas em uma fração ribonucleoproteica
HOAGLAND E ZAMECNICK (1955) – ETAPA DE ATIVAÇÃO DE AMINOÁCIDOS PRECEDE A SÍNTESE DE PROTEÍNAS
AMINOÁCIDO ss
AMINOÁCIDO
+
ATP
+
FRAÇÃO CITOSÓLICA
DE CÉLULAS DE FÍGADO
AMINOACIL‐tRNAs
AMINOACIL
tRNAs
SINTETASE
AMINOACIL‐tRNAs
(Aminoácido ativado)
(20 tipos diferentes)
CRICK (1958) – tRNA serve como adaptador no processo de síntese proteica a partir do mRNA
2
ESTRUTURA DO tRNA
INTERAÇÃO ENTRE tRNA e mRNA
3’
5’
3
RIBOSSOMOS
COEFICIENTES DE SEDIMENTAÇÃO
4
Como os quatro nucleotídeos do DNA/RNA especificam as sequências dos 20 aminoácidos que constituem as proteínas??? Proteínas
Ácido nucléicos
4 nucleotídeos
20 aminoácidos
41 = 4
42 = 16
43 = 64
5
1964 – Niremberg e Leder
Elucidação do código genético (1ª parte)
Poli‐U + Extrato de E.coli (livre de RNA) + GTP + ATP
[14C]‐ 17# AAS
[14C]
C]‐ Lysina
[14C]‐Prolina
[14C]‐Phenilalanina
6
O CÓDIGO GENÉTICO
61 códons: aa
3: sem sentido
UAG: âmbar
UGA: opala
UAA: ocre
AUG: iniciação
Qual é a posição do códon que parece ter menor importância na codificação do aminoácido???
O CODIGO GENÉTICO E AS FASES DE LEITURA (“open reading frames”)
Fases de leitura
7
ACOPLAMENTO ENTRE OS PROCESSOS DE SÍNTESE DE RNA E PROTEÍNAS
8
SINTESE DE PROTEÍNAS EM PROCARIOTOS
SINTESE DE PROTEÍNAS EM PROCARIOTOS
INÍCIO
ALONGAMENTO
TÉRMINO
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INICIAÇÃO
LIGAÇÃO DO RIBOSSOMO AO mRNA
Sequência de Shine‐Delgarno: sítio de ligação ao Ribossomo
FORMAÇÃO DO COMPLEXO DE INICIAÇÃO
mRNA POLICISTRÔNICO EUCARIÓTICO
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SINTESE DE PROTEÍNAS EM PROCARIOTOS
SINTESE DE PROTEÍNAS EM PROCARIOTOS
INÍCIO
ALONGAMENTO
TÉRMINO
(1º) Ligação do 2º AA
(2º) Ligação peptídica
(3º) Translocação
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SINTESE DE PROTEÍNAS EM PROCARIOTOS
SINTESE DE PROTEÍNAS EM PROCARIOTOS
INÍCIO
ALONGAMENTO
TÉRMINO
TERMINAÇÃO E Ç
LIBERAÇÃO DA CADEIA POLIPEPTÍDICA
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Polissomo
SINTESE DE PROTEÍNAS EM EUCARIOTOS
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ETAPA ‐ INÍCIO ETAPA ‐ ALONGAMENTO
14
ETAPA TÉRMINO
ETAPA ‐
POLISOMO
CIRCULAR EM
EUCARIOTOS
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