HEXAGON TB • Para evitar leituras incorretas ou resultados inválidos, não realizar leitura do teste após 20 minutos. MÉTODO: Teste imunocromatográfico INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS: FINALIDADE: Teste imunocromatográfico para a detecção rápida e qualitativa de anticorpos IgG, IgA, IgM contra Mycobacterium tuberculosis e outras micobacterias em soro humano, plasma ou sangue total, como auxíliar no diagnóstico precoce da tuberculose. Somente para uso diagnóstico IN VITRO. EPIDEMIOLOGIA: 1/3 da população mundial (1,8 bilhões) está infectada pela M.tuberculosis. 3 a 10% manifestam a doença. De 1990 a 1999 a WHO (Organização Mundial de Saúde) estima que 30 milhões de pessoas morreram devido à tuberculose. Ocorrem 8 milhões de novos casos a cada ano e 3 milhões de mortes. A tuberculose é responsável por uma alta taxa de mortalidade, maior do que qualquer outra doença infecciosa. Como a terapia não é seguida corretamente, e isto ocasiona a resistência da bactéria a drogas, a tuberculose se espalha e o número de casos aumenta. FUNDAMENTO: O teste utiliza o conjugado Proteina A-corante, antígeno A60 altamente purificado de Mycobacterium bovis, cadeia BCG (cultura de células) fixado na linha teste, e anticorpos policlonais antiproteína A (coelho) na linha controle. Como a amostra migra ao longo da membrana absorvente, as imunoglobulinas são ligadas pelo conjugado-corante-proteína A na linha teste e produzem uma linha vermelho violeta, se anticorpos anti-TB estiverem presentes na amostra. Na linha controle o excesso de conjugado reage com os anticorpos antiproteína A formando uma segunda linha vermelho-violeta para demonstrar a correta função dos reagentes. IDENTIFICAÇÃO: Conservar entre 15 e 25ºC. Congelamento e temperatura superior a 30ºC devem ser evitadas. TEST - Dispositivos de Teste Individualmente selados em blisteres de alumínio com dessecante. Contém: Conjugado de proteína A 1,0 g; corante 2,0 g, antígeno de proteína A60 (cadeia BCG-cultura de células) 1,0 g, anticorpos anti-proteína A (coelho) 1,0 g. Estabilizante de proteínas e azida sódica 0,05%. DIL - Diluente Tampão fosfato Cloreto de sódio Azida sódica 20 mM 150 mM 0,05% PIP - Pipetadores descartáveis PRECAUÇÕES: • Os cuidados habituais de segurança devem ser aplicados na manipulação dos reagentes. Os reagentes contêm azida sódica como conservante. Não ingerir ou aspirar. • Como não se pode assegurar que amostras biológicas não transmitem infecções, recomenda-se manuseá-las de acordo com as instruções de biossegurança; • Para descarte seguro dos reagentes e materiais biológicos, sugerimos utilizar as regulamentações normativas locais, estaduais ou federais para a preservação ambiental. ESTABILIDADE: O teste HEXAGON TB é estável, até a data de validade impressa no rótulo, quando armazenado entre 15 e 25ºC. Evitar congelamento e temperatura superior a 30 ºC. Os dispositivos não devem ser usados após o vencimento da data de validade. TRANSPORTE: Não existem condições especiais para o transporte do produto. TERMOS E CONDIÇÕES DE GARANTIA: O fabricante garante a qualidade do produto se este for armazenado como descrito acima e em sua embalagem original. AMOSTRA BIOLÓGICA: O teste pode ser realizado com soro, plasma (heparinato de lítio, heparinato de amônio, EDTA) ou sangue total. Outros tipos de amostras não foram testados e não devem ser usadas; Amostras contendo partículas podem produzir resultados inconsistentes no teste; Se utilizar sangue total como amostra, deve-se realizar o teste imediatamente; Amostras de soro ou plasma podem ser armazenadas por até 72 horas se conservadas entre 2 a 8ºC, ou período maior a -20°C em tubos hermeticamente fechados. Cada amostra deve ser manuseada com cuidado e tratada como potencialmente infectante. PROCEDIMENTO: • Deixar a amostra, o dispositivo de teste TEST e o diluente DIL atingirem a temperatura ambiente antes de iniciar o teste; • Remover o TEST da embalagem e colocá-lo em uma superfície plana; • Identificar cada TEST com o nome do paciente; • Encher o PIP com amostra; • Segurar o PIP verticalmente, dispensar uma gota (15 µL) de soro ou plasma ou duas gotas (30 µL) de sangue total na janela da amostra que se encontra na parte inferior do dispositivo e deixar absorver; • Adicionar imediatamente 3 gotas (120 µL) do DIL na janela da amostra. Evitar bolhas na janela de amostra durante a adição de líquidos. Resíduos de amostra de diluente na janela de amostra no final de incubação podem ser prejudiciais. • Ler os resultados depois de 15 minutos. C C C C T T T T Fig. 2 Fig. 3 Fig. 4 Fig. 1 NEGATIVO – Fig.1 Somente uma linha vermelho-violeta (C) aparece na parte superior da janela de resultado mostrando que o teste foi realizado corretamente. POSITIVO – Fig. 2 e 3 Uma segunda linha vermelho-violeta (T), aparece na parte inferior da janela de resultado, indicando um resultado positivo para anticorpos TB na amostra. Mesmo uma linha fraca indica um resultado positivo (fig.3). Diferenças na intensidade de coloração entre as linhas teste e controle podem ocorrer, mas isto não afeta a interpretação dos resultados. INVÁLIDO – Fig.4 Se a linha controle não aparecer, o teste deve ser repetido com um TEST novo. LIMITAÇÕES: • Este teste é para a detecção qualitativa de anticorpos anti-TB, e assim, não indica o título de anticorpo na amostra; Este teste deve ser usado para investigar pacientes com sinais clínicos e sintomas sugestivos da infecção de tuberculose ativa e em indivíduos que tiveram algum tipo de contato próximo com paciente com TB ativa; Amostras obtidas no início da infecção podem não conter níveis de anticorpos suficientes para produzir um resultado positivo. Testes de diagnóstico baseados na detecção de anticorpos tem limitações nos casos de pacientes imunosuprimidos e imunodeficientes devido a possível baixa concentração de anticorpos; Durante um tratamento com sucesso, o paciente pode desenvolver aumento de títulos de anticorpos que podem levar a resultados positivos. Se for obtido um resultado negativo e a suspeita de infecção persistir, deve-se coletar uma segunda amostra e testá-la 2 a 7 semanas depois; Os resultados devem ser avaliados com outros dados e informações disponíveis pelo médico. Se o resultado for negativo e ainda existir a suspeita da infecção por TB, outros testes, como pesquisa em lâmina, raio-X e cultura devem ser realizados. CARACTERÍSTICAS DO TESTE: A sensibilidade do teste é ajustada para obter resultados positivos em pacientes com TB ativa. O teste é em geral negativo em pacientes vacinados. O cut-off é ajustado na faixa de 350 EU/mL para IgG e IgA respectivamente, e um índice de absorbância de I = 1 para IgM em relação a testes ELISA utilizando o mesmo antígeno A60, (EU = unidade arbitrária de ELISA). Com estas especificações o teste possui sensibilidade de 87% em pacientes com tuberculose pulmonar ativa e especificidade de 90% O teste usa o antígeno A60, que é específico interespécies. Portanto, reações cruzadas com M. avium, M. leprae e outras micobactérias podem ocorrer. Estas infecções devem ser levadas em consideração no diagnóstico diferencial. APRESENTAÇÃO DO KIT: Cat. Nº Reagente TEST 58032 DIL PIP Volume 20 x 1 1 x 4 mL 1 x 20 Nº Testes 20 BIBLIOGRAFIA: 1. Fadda, G. et al., Eur J Epidemiol 8, 81-87 (1992) 2. Gupta, S. et al., Tubercle and Lung Disease 76, 418-424 (1995) 3. Kaustová, J., Eur J Med Res 1, 393-403 (1996) DEPARTAMENTO DE SERVIÇOS ASSOCIADOS: Para esclarecimentos de dúvidas do consumidor quanto ao produto: Telefax (31) 3067-6400 E-mail: [email protected] N.º DO LOTE, DATA DE FABRICAÇÃO, DATA DE VALIDADE VIDE RÓTULO DO PRODUTO. Produzido por Human GmbH Max-Planck-Ring 21, D 65205, Alemanha e Distribuído por In Vitro Diagnóstica Ltda Rua Cromita, 278, Distrito Industrial – Itabira/MG. CEP: 35903-053 Telefone: 31-3067-6400 – Fax: 31-3067-6401 e-mail: [email protected] Resp. Téc.: Patrícia C. C. Vilela – CRF 4463 Reg. M.S. 10303460140 Wiesbaden, SIGNIFICADO DOS SÍMBOLOS UTILIZADOS NOS RÓTULOS DO PRODUTO O conteúdo é suficiente para <n> testes Data limite de utilização Limite de temperatura (conservar a) Número do Catálogo Consultar Instrução de Uso Número do lote Produto Diagnóstico In Vitro Data de Fabricação REV. 08/11