PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM MEDICINA VETERINÁRIA DEPTO DE MEDICINA VETERINÁRIA PREVENTIVA BIOLOGIA MOLECULAR Aula 4 O RNA é um heteropolímero linear formado por ribonucleotídeos ligados entre si por pontes fosfo-diester As Bases do RNA Purinas Pirimidinas Uracilo (U) O açúcar do RNA Nucleotídeos no RNA: ADENINA - A GUANINA- G + FOSFATO URACIL - U CITOSINA - C RIBONUCLEOTÍDEO - NTP ATP GTP UTP CTP Composição/estrutura 1. Polímero linear de NTPs 2. Açúcar é a RIBOSE 1. Uracil ao invés de Timina 2. Geralmente fita simples 3. Tende a formar estruturas secundárias/terciárias 4. Mais instável do que o DNA 5. Todos os RNAs são “copiados” a partir de um molde ou modelo DNA DNA RNA 1. Fita dupla Fita simples 2. Deoxiribose Ribose 3. Timidina Uracil 4. Molde para Todos RNAs Sintetizado a partir do DNA Tipos de RNA RNA mensageiro (mRNA) RNA transportador (tRNA) RNA ribossômico (rRNA) RNAs pequenos nucleares (snRNAs) Possuem em comum: Composição Estrutura primária Modo de síntese Origem: são todos copiados Do DNA Diferenças: Sequência de nts Genes codificantes Extensão Estrutura secundária Localização Função Funções -RNAm – intermediário na síntese protéica -RNAt – transporta a.a. para os ribossomas -RNAr – participa da estrutura dos ribossomas -snRNAs – splicing de RNA Moléculas de RNA em E.coli Tipo % (S) nucleotídeos Ribossômico 80 23 16 5 3700 1700 120 Transportador 15 Mensageiro heterogêneo em tamanho 4 75 Estruturas secundárias e terciárias do RNA RNA mensageiros (mRNA) Possuem tamanho variável (até milhares de nt) Codificam proteínas Extremidades 5’ e 3’ modificadas (cap, poliAAA) São processados (splicing) antes de sair do núcleo São traduzidos em proteína nos ribossomos RNA transportador (tRNA) Transcritos de 20 genes diferentes Um tRNA para cada aminoácido Todos possuem 75 nt Estrutura secundária idêntica Função: transportar a.a. até os ribossomos para a síntese protéica RNA ribossômico (rRNA) São os mais abundantes Três tipos com tamanhos diferentes Eucariotas 28S (4800nt) 18S (1900nt) 5S (120nt) Componentes estruturais dos ribossomos Sintetizados no nucléolo (RNA pol I) Small nuclear RNAs (snRNA) Classe de RNAs pequenos Possuem localização nuclear Sempre associados com proteínas (snRNPs ou “snurps” Participam do splicing de mRNAs Todos os RNAs são transcritos do DNA 1. Molde DNA (ds, ss) 2. Precursores ativados (NTPs) 3. Síntese na direção 5’ > 3’ 4. mRNA – RNA polimerase II rRNA – RNA polimerase I tRNA e snRNAs – RNA pol III TRANSCRIÇÃO Síntese de RNA a partir de DNA Apenas uma fita do DNA é transcrita* Uma fita é a cadeia molde (template strand) Uma fita é a cadeia Codificante (coding strand) Síntese da RNA x DNA (semelhanças) 1. Molde DNA 2. Direção da síntese 5’ > 3’ 3. Mecanismo de elongação é similar 4. Hidrólise do ppi fornece energia p/ síntese Síntese de RNA x DNA (diferenças) 1. RNA polimerase não requer primer 2. Totalmente conservativa 3. Não tem “proofreading” PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM MEDICINA VETERINÁRIA DEPTO DE MEDICINA VETERINÁRIA PREVENTIVA BIOLOGIA MOLECULAR Aula 4