UNINGÁ – UNIDADE DE ENSINO SUPERIOR INGÁ
FACULDADE INGÁ
CURSO DE ESPECIALIZAÇÃO EM ENDODONTIA
ANGELA RIZZARDO
O USO DO EDTA NO PREPARO DO CANAL RADICULAR
PASSO FUNDO
2007
ANGELA RIZZARDO
O USO DO EDTA NO PREPARO DO CANAL RADICULAR
Monografia apresentada à unidade de Pósgraduação da Faculdade Ingá – Uningá – Passo
Fundo-RS como requisito parcial para
obtenção do título de Especialista em
Endodontia
Orientador: Ms. Mateus Silveira Martins Hartmann
PASSO FUNDO
2007
ANGELA RIZZARDO
O USO DO EDTA NO PREPARO DO CANAL RADICULAR
Monografia apresentada à comissão julgadora
da Unidade de Pós-graduação da Faculdade
Ingá – UNINGÁ – Passo Fundo-RS como
requisito parcial para obtenção do título d e
Especialista em Endodontia
Aprovada em ___ / ___ / ______.
BANCA EXAMINADORA:
____________________________________________
Prof. Ms. Matheus S. Martins Hartmann
____________________________________________
Prof. Ms. Volmir João Fornari
____________________________________________
Profª. Ms. Flávia Baldissarelli
2
DEDICATÓRIA
Dedico este trabalho à minha família, em especial à minha mãe, pelo cuidado e
companheirismo demonstrado durante minha caminhada profissional.
Dedico também a Miguel, pelo amor, por ser a minha força e a minha segurança.
AGRADECIMENTO
Agradeço aos professores, colegas e funcionários do Centro de Estudos
Odontológicos Meridional, especialmente ao Professor Mateus Silveira Martins
Hartmann, por ter sido amigo e orientador durante todo o desenvolvimento deste
trabalho.
RESUMO
Durante o tratamento endodôntico é necessário promover a limpeza do canal
radicular para contribuir com o sucesso do mesmo. Para isto se utilizam substâncias
químicas auxiliares com poder de remover o material orgânico e inorgânico do sistema
de canais radiculares. As substâncias utilizadas para a remoção do material orgânico são
chamadas de quelantes. Este trabalho teve por objetivo descrever as finalidades e
benefícios do uso do EDTA como substância quelante durante o preparo do canal
radicular, confrontando-o com algumas substâncias alternativas e apontar qual a
maneira mais eficaz de sua utilização. Após a presente revisão de literatura, pode-se
concluir que o emprego do EDTA proporciona paredes dentinárias limpas, apresentando
melhores resultados clínicos quando utilizado com o hipoclorito de sódio. O seu
emprego em meio aquoso é preferível, sendo recomendadas as soluções de pH neutro.
Os sais de EDTA di, tri e tetrassódico, nas concentrações de 15 e 17% mostram-se
eficientes na remoção da smear layer e o EDTA não apresenta capacidade
antimicrobiana importante, porém apresenta citotoxicidade e potencial irritativo aos
tecidos, o que não interfere na reparação tecidual.
Palavras-chave: Endodontia. EDTA. Preparo de canal radicular. Quelantes. Camada de
esfregaço.
ABSTRACT
During the endodontic treatment it is necessary to promote an adequate
cleansing of root canals to achieve clinical success. For such purpose, auxiliary
chemical substances are used to remove organic and inorganic material from the root
canal system. The substances used for removal of organic material are denominated
chelating agents. The aims of this study were to describe the intended use and benefits
of employing EDTA as a chelating agent during root canal preparation, comparing this
product to some alternative substances, as well to determine the most effective manner
to use this endodontic irrigant. Based on the review of literature, it may be concluded
that the use of EDTA provides clean dentinal walls, presenting better clinical results
when used in association with sodium hypochlorite. Its application in an aqueous
medium is preferable and the use of neutral pH solutions is recommendable. The use of
di-, tri- and tetrasodium EDTA salts at concentrations of 15 and 17% appear to be
effective for smear layer removal. EDTA does not have relevant antimicrobial action,
but presents cytotoxicity and irritating potential to the tissues, which, however, does not
interfere with tissue healing.
Key words: Endodontics. EDTA. Root canal preparation. Chelating agents. Smear
layer.
LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS
% - porcentagem.
Bio Pure MTAD – associação de doxiciclina, ácido cítrico e detergente TWEEN 80.
BHI – brain heart infusion (infusão cérebro coração).
Ca – cálcio.
CDTA – cyclohexane-1,2-diamine tetracetic acid.
EDTA – ácido etilenodiaminotetracético.
EDTAC – associação de EDTA e Cetavlon.
EDTA-T – associação de EDTA e Tergentol.
EGTA – ethylene glycol-bis-beta-amino-ethyl ether tetracetic acid.
Er: YAG – laser de alta potência que possui como meio ativo sólido o cristal de terra
rara érbio, inserido em uma matriz hospedeira de Ytrio, Alumínio e Granada.
HCl – ácido clorídrico.
LASER – light amplification by stimulated of radiation (amplificação da luz por
emissão estimulada de radiação).
MEV – microscopia eletrônica de varredura.
Mg – magnésio.
mJ - miliJoule
mL– mililitros.
mm – milímetros.
NaOCl – hipoclorito de sódio.
NaOH – hidróxido de sódio.
pH – potencial hidrogeniônico.
RC-Prep – associação de EDTA, peróxido de uréia 10% e Carbowax 75%.
REDTA – associação de EDTA e Cetavlon.
SUMÁRIO
1 INTRODUÇÃO............................................................................................................9
2 REVISÃO DE LITERATURA..................................................................................12
2.1 EDTA.........................................................................................................................12
2.1.1 Forma de Atuação................................................................................................12
2.1.2 Indicações ao Uso..................................................................................................13
2.1.3 Agitação e Volume da Solução............................................................................18
2.1.4 Fator Tempo..........................................................................................................19
2.1.5 Fator Concentração..............................................................................................21
2.1.6 Fator pH................................................................................................................23
2.2 ASSOCIAÇÕES E FORMAS DE APRESENTAÇÃO............................................23
2.3 ALTERNATIVAS DESMINERALIZANTES AO USO DO EDTA.......................31
2.3.1 Ácido Cítrico versus EDTA................................................................................. 31
2.3.2 Laser versus EDTA...............................................................................................33
2.4 BIOCOMPATIBILIDADE DAS SOLUÇÕES.........................................................35
2.5 ATIVIDADE ANTIMICROBIANA.........................................................................37
3 CONCLUSÃO.............................................................................................................40
REFERÊNCIAS.............................................................................................................41
9
1 INTRODUÇÃO
As etapas do tratamento endodôntico consistem no preparo biomecânico do
canal radicular - onde se busca a desinfecção e na obturação. Todas estas etapas estão
correlacionadas e qualquer descuido em uma delas poderá provocar o insucesso do
tratamento. Os principais objetivos da terapia endodôntica são a limpeza dos canais
radiculares, que é conseguida pela remoção de tecido pulpar, e a desinfecção, pela
remoção de tecido pulpar necrótico remanescente, microrganismos e dentina infectada.
O preparo biomecânico deste sistema de canais radiculares é um passo
importante no sucesso da terapia endodôntica e esta fase é complexa porque estão
associados fenômenos físico- mecânicos e químicos à habilidade do operador (SOUSA,
BRAMANTE e TAGA, 2005).
Devido à complexidade da anatomia do sistema de canais radiculares, que pode
ser formado por canais laterais, secundários, acessórios, colaterais e delta apical,
existem áreas onde os instrumentos não têm ação efetiva, podendo abrigar restos
pulpares e microrganismos. Assim, a ação mecânica isolada dos instrumentos
endodônticos, além de incompleta, é insuficiente. Desta maneira, é de fundamental
importância que se associe a ação das substâncias químicas auxiliares, pois estas irão
atuar em profundidade, com o objetivo de remover microrganismos e tecidos orgânicos
das áreas inacessíveis aos instrumentos, evitando processos patológicos a curto ou a
longo prazo. Segundo Pellissari (2002), na região periapical, as bactérias e seus
produtos tóxicos, somados aos produtos advindos da desintegração do tecido pulpar,
vão representar as principais causas de reações periapicais, crônicas ou agudas.
De acordo com Viegas et al. (2002), o magma dentinário é produzido nas
paredes do canal radicular durante a instrumentação, independente do método utilizado.
Uma das finalidades da irrigação/aspiração é justamente remover restos necróticos,
tecidos pulpares, raspas de dentina, sangue, exsudatos que compõem esta camada de
magma, também chamada de smear layer. O hipoclorito de sódio é a substância mais
amplamente utilizada para a irrigação dos canais radiculares, em diversas concentrações
e associações. Sua importância se deve às propriedades bactericidas, neutralizadoras de
produtos tóxicos e pela capacidade de dissolver matéria orgânica, porém o hipoclorito
de sódio usado de forma isolada não é capaz de remover o magma dentinário.
10
Sabe-se que a smear layer é constituída por uma fração orgânica e uma
inorgânica. A orgânica, por ficar retida entre o componente mineralizado, acaba não
sendo removida mesmo quando se utilizam substâncias com poder solvente de matéria
orgânica. Apesar da excelente capacidade de dissolução de matéria orgânica
apresentada pelo hipoclorito de sódio, esta substância não tem atuação sobre o conteúdo
inorgânico formado pela ação dos instrumentos nas paredes do canal radicular. Por isso,
a perfeita limpeza das paredes dentinárias só poderá ocorrer se o componente mineral
for descalcificado.
A descalcificação é conseguida através da utilização de um agente quelante, em
conjunto com a substância irrigadora, durante a instrumentação dos canais radiculares.
Os quelantes são substâncias que têm propriedade de fixar íons metálicos de um
determinado complexo molecular. A dentina é um complexo em que figuram os íons
cálcio na composição, sobre a qual, se aplicado um quelante, poderá ter como resultado
uma deficiência desses íons, determinando então uma maior facilidade de desintegração
(LEONARDO, 2005).
Recomenda-se o uso de quelantes para a remoção da smear layer presentes nas
paredes dentinárias após o preparo biomecânico dos canais radiculares. Segundo Lopes,
Siqueira Jr. e Elias (2004) a formação da smear layer reduz a permeabilidade da dentina
radicular de 25 a 49% e a sua remoção facilita a penetração dos cimentos obturadores
nos túbulos dentinários e melhora a adaptação do cone de guta-percha às paredes do
canal radicular, aumentando a eficiência seladora da obturação.
O efeito descalcificante do agente quelante resulta em menor resistência
dentinária à ação de corte dos instrumentos endodônticos, sendo de grande auxílio
durante a instrumentação de canais radiculares atresiados. De acordo com Eldeniz,
Erdemir e Belli, (2005) soluções quelantes têm efeito suavizante nas paredes dentinárias
podendo ser benéfica a sua aplicação clínica por permitir um preparo químico-mecânico
rápido e facilitar a exploração de canais radiculares atrésicos.
Para Leonardo (2005), o sal dissódico do ácido etilenodiaminotetracético
(EDTA) é aceito como o mais efetivo agente quelante, sendo o mais usado na terapia
endodôntica, em concordância com Çalt e Serper (2002) que salientam ainda suas
proeminentes propriedades lubrificantes.
A presente revisão de literatura tem por objetivo descrever as finalidades e os
benefícios do uso da solução quelante EDTA durante o preparo do canal radicular,
confrontando-o também com algumas substâncias quelantes alternativas e apontar qual
11
a maneira mais eficiente de utilização do EDTA, a fim de se obter os melhores
resultados na limpeza do sistema de canais radiculares.
12
2 REVISÃO DE LITERATURA
2.1 EDTA
O EDTA é um agente quelante específico para o íon cálcio e, conseqüentemente,
para a dentina. É um sal derivado de um ácido fraco, capaz de promover em pH
alcalino, a quelação dos íons cálcio. Ele foi introduzido por Ostby em 1957, tendo como
objetivo inicial substituir os ácidos inorgânicos, como o sulfúrico, o fenil sulfônico e o
clorídrico, então utilizados como auxiliares do preparo de canais radiculares atresiados e
calcificados (SOUZA et al., 2003).
2.1.1 Forma de Atuação
Segundo Lopes, Siqueira Jr. e Elias (2004), a solubilidade do EDTA está
relacionada com o número de átomos de hidrogênio dos radicais carboxila substituídos
por sódio. Como apresenta quatro radicais carboxila, pode-se obter quatro tipos de sais:
mono, di, tri e tetrassódico. Os autores recomendam o emprego do sal trissódico,
levando-se em consideração a capacidade de descalcificação e a compatibilidade
biológica.
O’Connell et al. (2000) testaram duas soluções de EDTA tetrassódico, nas
concentrações de 15% e 25%, e uma solução de EDTA dissódico a 15% e observaram
que o sal tetrassódico a 15% foi tão efetivo na remoção da smear layer quanto o mais
comumente usado sal dissódico, além de ser mais barato.
Lopes, Siqueira Jr. e Elias (2004) explicam a atuação do EDTA da seguinte
forma: com o EDTA no interior do canal radicular, ocorre inicialmente a solubilização
de uma pequena quantidade de moléculas de fosfato de cálcio, componente mineral da
dentina, até que seja estabelecido o equilíbrio. O EDTA incorpora o cálcio por meio das
ligações bivalentes do oxigênio existente em sua estrutura, fechando-o em uma cadeia
heterocíclica. Esta reação é denominada de quelação e o produto resultante, quelato de
cálcio. Assim, ocorre uma quebra da constante de solubilidade da dentina, que na
tentativa de suprir a falta de íons, volta a se solubilizar. Esses íons são incorporados às
moléculas de EDTA e a reação química continua, até a saturação da solução de
quelante, interrompendo o mecanismo de descalcificação. O EDTA tem, portanto, ação
13
autolimitante: à medida que ocorre contato, há a reação com os íons cálcio,
neutralização e perda da ação química, necessitando, assim, de constantes renovações.
O autor afirma também que deve ser dada atenção especial ao acondicionamento da
solução de EDTA, pois quando este se dá em frascos de vidro, com o tempo, o EDTA
pode quelar o cálcio do silicato de cálcio existente na composição do vidro, diminuindo
sua capacidade de atuação.
2.1.2
Indicações ao Uso
Para uma efetiva limpeza dos canais radiculares, tem sido indicado o uso do
EDTA associado ao hipoclorito de sódio. O’Connell et al. (2000) avaliaram em seu
estudo a eficácia das soluções de EDTA usadas alternadamente com hipoclorito de
sódio a 5,25%.Foram utilizados 18 dentes, divididos em três grupos, irrigados com 3
mL de hipoclorito de sódio 5,25% e 3 mL das soluções experimentais respectivamente:
EDTA dissódico 15% (pH 7.1 ajustado com NaOH), EDTA tetrassódico 15% (pH 7.1
ajustado com HCl), EDTA tetrassódico 25% (pH 7.1 ajustado com HCl). Após foi
realizada nova irrigação com 3 mL de hipoclorito de sódio seguido por 3 mL de água
destilada. Para o grupo controle, dois dentes foram irrigados somente com 6 mL de
solução salina, dois dentes irrigados somente com 6 mL de hipoclorito de sódio e dois
somente com 6 mL de EDTA. Os autores observaram que nenhuma das soluções de
EDTA utilizadas isoladamente foram efetivas na remoção completa da smear layer,
porém, quando as soluções de EDTA foram usadas alternadamente com hipoclorito de
sódio 5,25% observaram completa remoção de smear layer nos terços cervical e médio
dos canais radiculares.
Teixeira et al. (2001) avaliaram a capacidade de remoção de smear layer dos
canais radiculares empregando os irrigantes endodônticos solução de EDTA a 17%,
hipoclorito de sódio a 5,25%, Endoquil (polímero à base de mamona) e água destilada.
Os resultados mostraram que o Endoquil e o EDTA a 17% promoveram maior
capacidade de remoção da smear layer, não diferindo estatisticamente entre si. Os
grupos onde foi empregado o hipoclorito de sódio a 5,25% e a água destilada obtiveram
os piores resultados, diferindo estatisticamente entre si e entre os demais grupos.
Dogan e Çalt (2001) estudaram o efeito promovido pelas soluções quelantes
EDTA 17% e RC-Prep (EDTA 15% combinado com Carbowax a 75%) no conteúdo
mineral da dentina radicular, quando utilizadas sozinhas durante o preparo, apenas com
14
irrigação final de solução salina, em comparação com o uso seguido pelo hipoclorito de
sódio a 2,5%. Os níveis de cálcio, fósforo e magnésio foram mensurados na dentina
radicular após o tratamento através de microscopia eletrônica de varredura (MEV) e
microanálise espectrométrica de dispersão de energia. Os resultados mostraram que o
uso de EDTA combinado à irrigação com hipoclorito de sódio alterou o conteúdo
mineral da dentina radicular enquanto o uso do EDTA e RC-Prep sozinhos não
mostraram mudança significante.
Em concordância com os autores, Çalt e Serper (2002) afirmam que para
remover efetivamente os componentes orgânicos e inorgânicos da smear layer é
recomendado o uso do EDTA seguido pelo hipoclorito de sódio.
Menezes, Zanet e Valera (2003) compararam, através de MEV, a capacidade de
limpeza e remoção da smear layer e debris das paredes de canais radiculares preparados
e irrigados com soluções de hipoclorito de sódio a 2,5%, gluconato de clorexidina a 2%
e soro fisiológico (grupo controle), associados ou não com o EDTA 17%, aplicado por
dois minutos no interior do canal radicular. Os resultados mostraram que o uso do
EDTA diminuiu significativamente a smear layer para todas as soluções avaliadas, em
todos os terços. Quando o EDTA não foi utilizado, o grupo irrigado apenas com
hipoclorito de sódio 2,5% apresentou quantidade significativamente maior da smear
layer no terço apical, que os demais grupos. O uso do EDTA diminuiu também
significativamente a quantidade de debris, exceto para a clorexidina. Concluiram, assim,
que após o preparo faz-se necessária a utilização do EDTA a fim de promover melhor
limpeza das paredes dos canais radiculares.
Para Pinheiro et al. (2004), é justificada a utilização de substâncias químicas que
promovam o aumento da permeabilidade da dentina radicular, auxiliando o processo de
desinfecção do sistema de canais radiculares, dentre as mais popularizadas, o
hipoclorito de sódio e o EDTA. Segundo Souza (2005), a limpeza mais efetiva do
sistema de canais radiculares proporcionada pelo uso do EDTA alternado com o
hipoclorito de sódio a 2,5% e a remoção da camada residual têm justificado a sua
indicação.
Já segundo Grande et al. (2006), a propriedade de oxidação do hipoclorito de
sódio poderia reduzir a ação do EDTA influenciando o uso combinado destas soluções
irrigantes durante a terapia do canal radicular. Os autores verificaram através de análise
de ressonância magnética nuclear se a propriedade de oxidação do hipoclorito de sódio
pode inativar a ação do EDTA. O pico no EDTA no gráfico assim como o surgimento
15
de novos sinais relacionados aos produtos desta interação com hipoclorito de sódio
foram analisados nos intervalos de tempo de 1,5 min, 4,5 min, 7 min, 11 min, 16 min,
25 min, 50 min, 80 min e 120 min. Os gráficos obtidos pela análise de ressonância
magnética nuclear confirmaram que as reações entre hipoclorito de sódio e EDTA
causaram a oxidação deste último que levou a uma progressiva e lenta desativação do
mesmo. A contínua evolução dos sinais relativos aos prótons EDTA indicaram que
durante os primeiros sete minutos da reação entre os dois compostos não mudou
significativamente no pico registrado, entre 7 e 11 minutos alguns resultados de
formação de produtos da reação foram notados, que aumentou durante os seguintes
intervalos de tempo: 11 para 16, 16 para 25, 25 para 50 e 50 para 80 minutos, e foi
incompleta, mesmo depois de 120 minutos. Estes sinais indicam a progressão da reação
de oxidação do agente quelante (EDTA). No final do experimento, o espectro indicou
que a reação entre hipoclorito de sódio e EDTA causou a formação de produtos
desconhecidos. Portanto a possível ação dos produtos do EDTA nos íons Ca e Mg são
também desconhecidos. Em conclusão, foi demonstrado que a oxidação do EDTA pelo
hipoclorito de sódio é complexa e requer tempo, portanto, uma irrigação final com
hipoclorito de sódio não limita o efeito quelante do EDTA no período de tempo clínico
real.
Além de resultar em paredes dentinárias mais limpas, a eliminação da smear
layer, ou magma dentinário propicia um maior embricamento do cimento obturador na
embocadura dos túbulos dentinários, ocasionando um melhor selamento (SALLES e
FACHIN, 2003).
Villegas et al. (2002) avaliaram a penetração do material obturador em
comprimento dentro dos canais acessórios após quatro regimes de irrigação final: não
irrigação (NO), irrigação final com 10 mL de água destilada (WA), irrigação final com
20 mL de hipoclorito de sódio a 6%, por 20 minutos (SH) e irrigação com 8 mL de
EDTA 15% usado por três minutos seguido do mesmo regime utilizado no grupo SH
(ES). Diferenças foram encontradas quando comparados os grupo NO e WA com os
grupos SH e ES, com os seguintes valores obtidos: 22,3% no grupo NO, 21,8% no
grupo WA, 53,5% no grupo SH e 68,1% no grupo ES. Os autores afirmam que o uso do
hipoclorito de sódio sozinho ou em combinação com o EDTA na irrigação final pode
melhorar a penetração do material obturador nos canais acessórios.
Saleh et al. (2002) investigaram os efeitos de diferentes pré-tratamentos
dentinários na adesão de diferentes cimentos endodôntiocs à dentina e à guta-percha.
16
Foram testadas as substâncias ácido fosfórico 37% aplicado por 30 segundos, ácido
cítrico 25% aplicado por 30 segundos, EDTA 17% aplicado por cinco minutos e 10 ml
de água destilada (grupo controle), e os cimentos de Grossman, Apexit, Ketac-Endo,
AH PLUS, RoekoSeal Automix e RoekoSeal Automix + Primer. Os autores observaram
que houve grande variação na adesão quanto ao cimento utilizado e o pré-tratamento
dentinário realizado. A remoção da smear layer pelo EDTA reduziu significativamente,
a adesão do AH Plus e do Apexit, já a adesão do Ketac-Endo e do RoekoSeal Automix
não foi influenciada significativamente. O uso do primer com o RoekoSeal Automix
melhorou significativamente a adesão no caso de dentina não tratada, entretanto, não
apresentou diferença significante quanto ao pré-tratamento com EDTA ou ácidos. A
adesão do cimento de Grossman foi significativamente aumentada quando o prétratamento dentinário foi feito com ácido fosfórico. Concluíram, assim, que diferentes
tipos de cimento requerem diferentes tipos de pré-tratamento para ótima adesão. O prétratamento com EDTA não mostrou efeito ou produziu fraca união, sugerindo que a
remoção da smear layer pode prejudicar a adesão do cimento à dentina. Já o prétratamento com ácido cítrico e ácido fosfórico aumentou a adesão nos cimentos à base
de óxido de zinco e eugenol.
Sousa-Neto et al. (2002) avaliaram, in vitro, o efeito da aplicação das soluções
quelantes EDTA, EGTA (ethylene glycol-bis-beta-amino-ethyl ether tetraacetic acid) e
CDTA (cyclohexane-1,2-diaminetetraacetic acid) sobre a dentina humana na
adesividade e infiltração apical dos cimentos obturadores dos canais radiculares Sealer
26, Sealapex, N-Rickert e Endofill. No que diz respeito à adesão, o Sealer 26 teve
melhores valores de adesão em comparação com os outros três cimentos que não
apresentaram diferença significante entre si. O EDTA foi melhor que o CDTA e o
EGTA que apresentaram valores intermediários. Quanto à microinfiltração, o Selaer 26
teve o menor valor, estatisticamente diferente dos outros cimentos. O N–Rickert teve
valores intermediários e o Sealapex e o Endofill foram semelhantes com aumento dos
valores de microinfiltração. Os canais radiculares irrigados com EDTA tiveram menores
valores de microinfiltração, e o EGTA e o CDTA apresentaram valores intermediários
Os resultados evidenciaram diferença entre os cimentos e as soluções testadas. Os
autores observaram então, que o cimento Sealer 26 e a solução de EDTA apresentaram
os melhores resultados para os testes de adesividade e de infiltração marginal apical.
Bonan et al. (2002) avaliaram a capacidade seladora após a obturação de canais
radiculares em função da solução irrigadora empregada durante o preparo biomecânico,
17
que foi realizado utilizando diferentes soluções irrigadoras, de acordo com os grupos
experimentais: I) solução de hipoclorito de sódio a 2,5%; II) solução de digluconato de
clorexidina a 2%; III) gel de clorexidina a 1%; IV) soro fisiológico e V) solução de
hipoclorito de sódio a 2,5% + EDTA. Os canais radiculares foram obturados pela
técnica de condensação lateral ativa da guta-percha e cimento de óxido de zinco e
eugenol e imersos em solução de azul de metileno a 2%, em ambiente a vácuo, durante
48 horas. A infiltração do corante foi analisada em perfilômetro. Os autores observaram
que o grupo onde foi empregada a solução de hipoclorito de sódio e o EDTA apresentou
menor infiltração quando comparado ao grupo da clorexidina gel. Os demais grupos
foram semelhantes entre si, concluindo, então, que o melhor selamento apical é obtido
quando o preparo biomecânico é realizado empregando-se solução de hipoclorito de
sódio complementada pelo uso de solução de EDTA.
Salles e Fachin (2003) avaliaram, através de MEV, a interface de dois cimentos
à base de resina epóxi e as paredes do canal radicular, investigando a possível
interferência do magma dentinário sobre a capacidade de penetração dos cimentos
Sealer 26 e AH Plus, no interior dos túbulos dentinários. Os autores observaram que os
dois cimentos tiveram desempenho inferior na presença de magma dentinário. O
tratamento do magma dentinário, em regime de irrigação final com EDTA a 17%
seguido do hipoclorito de sódio a 1% promoveu um incremento na penetração do
cimento independente do tipo de cimento utilizado, sendo que o AH Plus demonstrou
uma média de penetração nos túbulos dentinários superior aos demais grupos. O padrão
mais baixo de penetração de cimento no interior dos túbulos dentinários foi obtido pelo
grupo onde o Sealer 26 foi utilizado sem irrigação prévia com EDTA.
Da mesma forma, Kokkas et al. (2004) ao examinar o efeito da smear layer na
profundidade de penetração dos cimentos de canal radicular AH Plus (à base de resina
epóxia), Apexit (à base de hidróxido de cálcio) e Grossman type-Roth 811 dentro dos
túbulos dentinários e observaram que a smear layer obstruiu todos os cimentos de
penetrarem nos túbulos dentinários. Em contraste, a smear layer removida pela
irrigação com 3 mL de EDTA 17% por três minutos seguido de 3 mL de solução de
hipoclorito de sódio 1% permitiu a penetração de todos os cimentos, ocorrendo variação
de profundidade. Estes achados, segundo os autores, sugerem que a smear layer
desempenha um importante papel na penetração do cimento no interior dos túbulos
dentinários, bem como nas suas implicações clínicas.
18
Barbizam et al. (2005) recomendam a irrigação final com EDTA a 17%
previamente a obturação dos canais radiculares, em especial quando será empregado um
cimento resinoso.
Diferentes técnicas para a utilização do EDTA têm sido estudadas com o
objetivo de potencializar seu efeito quelante. Fatores como a agitação da solução, o
volume utilizado, o tempo de aplicação, a concentração da substância e o pH têm sido
observados para determinar a sua influência na capacidade quelante.
2.1.3 Agitação e Volume da Solução
Para Pellissari (2002), o uso do EDTA é indicado antes da medicação intracanal
e da obturação, deixando-se por alguns minutos no interior do canal radicular e
agitando-se com um instrumento que poderá ser de menor calibre que o instrumento
memória. Em seguida, deve-se irrigar com solução fisiológica ou água destilada.
Peres et al. (2002) avaliaram por meio de MEV a limpeza superficial das paredes
de canais radiculares após toalete final com duas formas de EDTA auxiliadas por três
diferentes mecanismos de agitação. Após o preparo biomecânico ter sido realizado pela
técnica escalonada regressiva, irrigando-se com solução de hipoclorito de sódio a 1%,
os espécimes foram divididos em seis grupos experimentais, de acordo com a toalete
final aplicada, obedecendo a seguinte ordem: Grupo I: EDTA gel + agitação com ultrasom; Grupo II: EDTA líquido + agitação com ultra-som; Grupo III: EDTA gel +
agitação com espiral de lentulo; Grupo IV: EDTA líquido + agitação com espiral de
lentulo; Grupo V: EDTA gel + agitação manual; Grupo VI: EDTA líquido + agitação
manual. Os resultados mostraram não existir diferença estatisticamente significante
entre as diferentes formas de toalete final estudadas, porém melhor limpeza foi
apresentada no terço cervical de todos os grupos, quando comparada ao terço apical,
concluindo assim, que todos os métodos foram similares na limpeza.
Crumpton, Goodell e Mcclanaban (2005) estudaram o volume de EDTA 17%
necessário para remover eficientemente a smear layer após instrumentação rotatória
com Profile GT. Foram utilizados 40 dentes, divididos após a instrumentação em quatro
grupos. Grupo 1 (controle positivo): não recebeu irrigação com EDTA 17%, apenas
irrigação final com 3 mL de hipoclorito de sódio 5,25% Os três grupos experimentais:
grupo 2, grupo 3 e grupo 4, foram irrigados com EDTA 17%, pelo tempo de um minuto,
seguido pelo enxágüe final com 3 mL de hipoclorito de sódio 5,25%, diferindo as
19
quantidades de EDTA utilizadas, sendo respectivamente, 1, 3 ou 10 mL. As amostras
foram divididas longitudinalmente e examinadas através de MEV para determinar a
qualidade da smaer layer removida e presença de debris remanescentes. Os autores não
encontraram diferenças entre os grupos experimentais quanto a presença de debris
remanescentes ou a qualidade da smear layer removida. A irrigação com EDTA em
volume maior que 1 mL não melhorou a remoção de debris. O estudo mostrou que 1
mL de EDTA em contato por um minuto foi tão eficiente como 10 mL, e a remoção
eficiente da smear layer foi conseguida com um enxágüe final de 1 mL de EDTA 17%
por um minuto, seguido por 3 mL de hipoclorito de sódio 5,25%.
2.1.4 Fator Tempo
Zanato, Só e Figueiredo (2001) avaliaram a influência do tempo de agitação
mecânica no interior do canal radicular do EDTA a 17%, na remoção da smear layer.
Os espécimes foram irrigados com hipoclorito de sódio a 1% durante a instrumentação e
após, divididos aleatoriamente em três grupos: o Grupo I recebeu irrigação com EDTA
17% e agitação mecânica com broca lentulo número um, durante dois minutos. O Grupo
II recebeu irrigação com EDTA 17% e agitação mecânica com broca lentulo número
um, durante 30 segundos. O Grupo III não recebeu nenhum procedimento adicional ao
preparo. Após análise através de MEV, os autores observaram que não houve diferença
na capacidade de remoção da smear layer quanto aos diferentes tempos de agitação
mecânica de EDTA no interior do canal radicular. Houve, porém, diferença na
capacidade de remoção da smear layer quando comparado o grupo sem tratamento
(grupo III) com os demais grupos (I e II). Concluíram assim, que o uso do EDTA
apresentou satisfatória capacidade de remoção da smear layer, nos grupos I e II,
independente do seu tempo de agitação mecânica.
Çalt e Serper (2002) avaliaram os efeitos do EDTA na remoção da smear layer e
na estrutura dentinária depois de um e dez minutos de aplicação e constataram que a
irrigação com EDTA 17% por um minuto é efetiva na remoção da smear layer,
entretanto, uma aplicação de EDTA por dez minutos causou excessiva erosão
peritubular e intertubular, sugerindo que este procedimento não deve ser prolongado por
mais de um minuto durante o tratamento endodôntico. Em outro estudo Serper e Çalt
(2002) mensuraram a quantidade de liberação fosfórica para os tempos de 1, 3, 5, 10 e
20
15 minutos de exposição ao EDTA e constataram que a quantidade de fósforo liberado
da dentina foi maior com aumento do tempo de exposição.
Por sua vez, Scelza, Teixeira e Scelza (2003), utilizando a solução de EDTA
17% como irrigação final, nos tempos de 3, 10 e 15 minutos observaram que não houve
diferença significante quanto ao aumento na descalcificação, nos três diferentes tempos,
o que pode significar que o EDTA não foi uma substância tempo-dependente.
Segundo Lopes, Siqueira Jr. e Elias (2004), vários trabalhos indicam que as
soluções de EDTA apresentam ação desmineralizadora sobre a dentina, sendo que o
tempo de aplicação da solução influencia na ação de desmineralização. Para eles, o
EDTA não atua imediatamente quando em contato com a dentina, necessitando esperar
cerca de 10 a 15 minutos para a obtenção do efeito quelante.
De-Deus, Paciornik e Maurício (2006) aplicando a solução de EDTA 17% nos
tempos de um, três e cinco minutos observaram um brusco decréscimo na dureza
dentinária até o tempo de três minutos e estabilidade nos valores da dureza nos tempos
de três a cinco minutos de aplicação, sugerindo que a solução saturou-se.
Paqué et al. (2006) avaliaram os efeitos de diferentes regimes de irrigação do
canal radicular, pela penetração de um corante azul claro. Foram utilizados 80 prémolares inferiores de canal radicular único e estreito, preparados com instrumentos
ProFile e divididos aleatoriamente em oito grupos, em que variaram o tempo e a
substância utilizada para a irrigação inicial, água e EDTA, e final, solução azul clara
(corante). Em seguida, os canais radiculares foram irrigados com 10 mL de água para
remover os remanescentes de EDTA e da solução corante. Os espécimes foram
seccionados horizontalmente em 3, 6 e 9 mm do ápice, as partes fotografadas
digitalmente e a penetração do corante calculada. Os resultados mostraram que não
houve diferenças entre os protocolos de irrigação quanto à penetração do corante. O
exame em MEV revelou que a penetração do corante foi proeminente em áreas com
túbulos dentinários abertos e ausente em áreas com esclerose tubular, e uma completa
ausência ou somente quantidade insignificante da smear layer foi evidenciada em todos
os espécimes irrigados com EDTA, enquanto marcante quantidade da smear layer foi
encontrada nos canais radiculares irrigados com água. Contudo, a penetração do corante
foi observada em áreas de dentina com túbulos patentes independente da presença ou
ausência da smaer layer. Concluindo, os autores afirmam que a smear layer produzida
pela instrumentação do canal radicular, a esclerose tubular, e fenômenos fisiológicos
que iniciam na terceira década da vida, na região apical do canal radicular e avançam
21
coronalmente com a idade, foram os maiores fatores influenciando a permeabilidade da
dentina radicular, e não propriamente o tempo que a solução química foi utilizada.
2.1.5 Fator Concentração
As soluções aquosas de EDTA são encontradas em diversas concentrações no
mercado, sendo as de 15% e 17% as mais freqüentes. O EDTA a 24% foi lançado em
forma exclusiva de gel (ARAÚJO et al. 2003).
O’Connell et al. (2000) avaliaram a remoção da smear layer e a evidenciação
dos túbulos dentinários após a irrigação do canal radicular com diferentes soluções de
EDTA: EDTA dissódico 15% (pH 7,1 ajustado com NaOH), EDTA tetrassódico 15%
(pH 7,1 ajustado com HCl), EDTA tetrassódico 25% (pH 7,1 ajustado com HCl). Neste
estudo, não foram encontradas diferenças entre concentrações e tipos de soluções de
EDTA utilizadas, já que todas pareceram fornecer adequadas propriedades de
desmineralização, sendo mais eficientes nos dois terços cervicais dos canais radiculares
e menos efetivas no terço apical.
Serper e Çalt (2002) comparando os efeitos do EDTA 10% e 17% na
desmineralização dentinária encontraram maiores efeitos com o aumento da
concentração de EDTA.
Nakashima e Terata (2005) avaliaram a influência na remoção da smear layer da
solução de EDTA 3% (pH de 9,0) sobre a eficácia antimicrobiana de três soluções
desinfetantes e a resistência adesiva e umedecimento da dentina por quatro tipos de
cimentos endodônticos. No primeiro experimento, foi avaliado o efeito da remoção da
smear layer na eficácia antimicrobiana de três desinfetantes de canal radicular, Cresol
Formalina, Creodon (fenol), e Calcipex (hidróxido de cálcio), pela mensuração das
zonas de inibição usando um método modificado de difusão em placa de Agar. Os
microrganismos testados foram Streptococcus intermedius e Candida albicans. Foram
utilizadas 54 discos de dentina (1 mm de espessura e 8 mm de diâmetro), onde foi
aplicado ácido fosfório 37% por um minuto. A superfície teste para aplicação do
desinfetante de canal radicular foi finalizada com polimento com papel nº 600 para
formação da smaer layer. As amostras foram divididas em três grupos: grupo EDTA
15%, que foi aplicado por dois minutos, grupo EDTA 3%, que também foi aplicado por
dois minutos, e grupo não-tratado, para preservação da smear layer. Um tubo de
polietileno foi fixado na superfície teste com cera, e cada desinfetante de canal radicular
22
foi colocado dentro do tubo usando uma pequena bolinha de algodão. Os resultados não
mostraram zonas de inibição para o grupo não-tratado, entretanto, estas foram
observadas para todos os desinfetantes nos grupos EDTA, sendo que o EDTA 15%
mostrou um aumento significante em relação ao EDTA 3% somente para Cresol
Formalina em S. intermedius.
Ainda Nakashima e Terata (2005) avaliaram o efeito da remoção da smear layer
no umedecimento da dentina pelo cimento endodôntico. Foram utilizados 60 dentes
anteriores bovinos extraídos, onde a superfície teste foi polida com papel nº 600 para
expor a dentina. Os 60 dentes foram divididos em três grupos de 20 amostras cada e
tratados como no primeiro experimento, sendo que cinco espécimes de cada grupo
foram obturados com quatro tipos de cimentos endodônticos (Canals, Canals N, Apatite
Root Sealer, AH26). Após um minuto, o ângulo de contato foi mensurado, e mostrou-se
menor no grupo EDTA 3% do que no EDTA 15% para todos os cimentos.
No terceiro experimento Nakashima e Terata (2005) avaliaram o efeito da
remoção da smear layer na força de adesão do cimento endodôntico à dentina. Foram
utilizadas 120 amostras de dentina bovina, divididas em três grupos e tratadas como no
primeiro experimento. Das 40 amostras de cada grupo, dez foram obturadas com os
quatro tipos de cimento. Tubos de polietileno de 6 mm de diâmetro e 5 mm de altura
foram preenchidos com cada tipo de cimento endodôntico e imediatamente colocados
na superfície teste de dentina. Após a presa completa do cimento, as amostras
permaneceram em 37° com umidade relativa 100% por 48 horas e o teste de adesão foi
executado usando uma máquina de teste tipo universal Instron 4225. Os autores
observaram que a força adesiva de cada cimento para a dentina foi superior nos grupos
EDTA comparado com o grupo não-tratado. Os autores propõem que o EDTA 3% é
mais proveitoso para aplicações clínicas que o EDTA 15%, uma vez que o ângulo de
contato entre o cimento endodôntico e a dentina diminuiu no grupo do EDTA 3% e
aumentou no EDTA 15%; a resistência adesiva do cimento endodôntico para a dentina
aumentou nos grupos EDTA para todos os tipos de cimentos e a permeabilidade do
canal radicular à solução desinfetante aumentou para valores semelhantes nos grupos
EDTA 3% e 15%.
23
2.1.6 Fator pH
Além do tempo de aplicação e concentração, o pH é um fator que pode interferir
na capacidade descalcificadora da solução. O’Connell et al. (2000) explicam que o pH
afeta a disponibilidade de Ca ++. Em pH elevado, o excesso de grupamentos hidroxila
diminui a dissociação da hidroxiapatita e, assim, limita a disponibilidade de Ca ++ . Em
pH neutro ou ácido, as ligações do Ca ++ tendem a aumentar devido à maior dissociação
da hidroxiapatita, o que torna o Ca ++ disponível para quelação.
Serper e Çalt (2002) afirmam que o sal dissódico de EDTA a 17% e pH neutro é
amplamente preferido para o tratamento do canal radicular. Testando as soluções de
EDTA 10 e 15% em pH de 7,5 e 9,0 constataram que a solução foi mais efetiva com pH
neutro do que com pH 9,0.
Souza et al. (2003) comparando várias marcas comerciais de EDTA disponíveis
no mercado encontraram halos de descalcificação significativamente maiores nas
soluções que apresentaram pH mais elevado. Embora não tenham ocorrido diferenças
estatísticas significantes, houve uma tendência de melhores resultados com a marca
Inodon (pH=10,0) em relação a Odahcam (pH=8,1). Por outro lado, menores halos de
descalcificação ocorreram com os produtos Iodontec (pH=5,6) e Biodinâmica (pH=7,5),
entre os quais não houve diferenças significativas. Estes dados confirmam a influência
do pH no potencial de descalcificação das soluções à base de EDTA. Embora alguns
autores considerem que o pH ideal situe-se entre 7,0 e 8,0, os resultados deste trabalho
demonstram maior efetividade entre os valores 8,0 e 10,0 e menor efetividade com o
valor de 7,5, que estaria enquadrado nos parâmetros considerados ideais. Os autores
afirmam que um dos fatores que pode influenciar nos resultados seria a origem da
matéria-prima utilizada na preparação das soluções.
2.2 ASSOCIAÇÕES E FORMAS DE APRESENTAÇÃO
Associações têm sido feitas procurando reunir as melhores propriedades
oferecidas pelas soluções irrigadoras.
Ostby (1957, apud LOPES, SIQUEIRA JR. E ELIAS, 2004) adicionou à solução
de EDTA o tensoativo Cetavlon (detergente catiônico, derivado do amono quaternário),
formando uma associação conhecida como EDTAC, o que reduziu a tensão superficial
da solução em 50%. Em conseqüência disto, o EDTAC torna-se, segundo o autor, mais
24
efetivo na redução da microdureza da dentina, em relação ao EDTA, e promove uma
maior permeabilidade dentinária radicular. Hill (1959, apud LEONARDO, 2005)
também aconselhou o emprego do EDTAC (também chamado de REDTA), pois além
de aumentar o poder bactericida da solução, o Cetavlon permitiria maior difusão do
produto acelerando o fenômeno da quelação.
Cruz-Filho et al. (2001) estudaram o efeito do EDTAC 15%, CDTA 1% e EGTA
1% na microdureza da dentina radicular, aplicando as soluções por cinco minutos e
comparando-as com água destilada deionizada. A análise estatística mostrou que as três
soluções quelantes reduziram significativamente a microdureza dentinária quando
comparadas à água, entretanto, não houve diferenças significantes entre as três soluções.
Guerisoli et al. (2002) avaliaram a capacidade de remoção da smear layer pelo
hipoclorito de sódio a 1% utilizado sozinho ou associado com EDTAC 15%
complementado pela agitação ultra-sônica. Para isso, utilizaram 20 incisivos inferiores
com canal radicular único, divididos aleatoriamente em quatro grupos. No grupo I
(controle positivo), os dentes foram instrumentados utilizando 1 mL de água destilada
como irrigante a cada troca de instrumento e também após o preparo, quando uma lima
15 foi introduzida a 1 mm do ápice anatômico, potencializada pelo ultra-som, com
movimentos de pequena amplitude contra as paredes dentinárias, por um minuto. No
grupo II, os dentes foram instrumentados utilizando 1 mL de hipoclorito de sódio a 1%
como solução irrigante a cada troca de instrumento e após o preparo, quando foi feita
agitação ultra-sônica como descrito anteriormente. No grupo III foi utilizado hipoclorito
de sódio a 1% alternadamente com EDTAC 15% a cada troca de instrumento, e agitação
ultra-sônica, feita com hipoclorito de sódio por 30 segundos e EDTAC também por 30
segundos. Por fim, no grupo IV (controle negativo) os dentes não foram instrumentados,
apenas irrigados com hipoclorito de sódio a 1% e EDTAC 15%, e agitação ultra-sônica,
feita com hipoclorito de sódio por 30 segundos e EDTAC também por 30 segundos.
Após os dentes foram secos com pontas de papel absorvente, partidos longitudinalmente
no sentido vestíbulo- lingual, e avaliados nos seus terços cervical, médio e apical,
através de MEV. Os autores concluíram que o hipoclorito de sódio a 1% associado com
EDTAC 15% foi eficiente na remoção da smear layer das paredes do canal radicular e
que a irrigação com água destilada ou hipoclorito de sódio a 1% sozinho, não promoveu
paredes livres da smear layer. Quando os grupos foram examinados separadamente, não
observaram diferenças entre a quantidade da smear layer encontrada nas paredes do
canal nos terços cervical, médio e apical, o que pode ser explicado, segundo os autores,
25
pela baixa tensão superficial das soluções fornecida pelo surfactante catiônico
(Cetavlon), bem como o uso do ultra-som. Devido à ação combinada desses dois
fatores, as soluções irrigadoras provavelmente alcançaram a completa extensão do canal
radicular.
De-Deus, Paciornik e Maurício (2006) avaliaram os efeitos das soluções de
ácido
cítrico
10%,
ácido
etilenodiaminotetracético
(EDTA
17%)
e
ácido
etilenodiaminotetracético adicionado ao Cetavlon (EDTAC 17%) na microdureza
dentinária dos canais de raízes humanas, após um tempo de aplicação de um, três e
cinco minutos, observando que o EDTAC teve um efeito lento. Enquanto a solução de
EDTA 17% apresentou um brusco decréscimo na dureza dentinária nos três primeiros
minutos, o EDTAC 17%, levou cinco minutos para apresentar valores semelhantes. O
mesmo foi observado em relação ao ácido cítrico, que levou cinco minutos para mostrar
uma mudança significante nos valores de dureza dentinária.
Paiva e Antoniazzi (1988) recomendaram a associação do EDTA ao Tergentol
(lauril éter sulfato de sódio) por causa de sua ação na desmineralização dentinária,
denominando-o de EDTA-T.
Scelza, Antoniazzi e Scelza (2000) avaliaram a qualidade de limpeza das paredes
dentinárias promovida por três regimes de irrigação final, após o preparo ter sido
realizado com 2 mL de hipoclorito de sódio 1% a cada troca de instrumento. Grupo I:
10 mL de hipoclorito de sódio 1% seguido por 10 mL de ácido cítrico 10% e por 10 mL
de água destilada. Grupo II: 15 mL de hipoclorito de sódio 0,5% seguido por 15 mL de
EDTA-T 17%. Grupo III: 10 mL de hipoclorito de sódio 5,25%, seguido por 10 mL de
peróxido de hidrogênio 3% e por 10 mL de hipoclorito de sódio 5,25%. Os canais foram
observados nos terços cervical, médio e apical, por MEV. Analisando-se os terços
separadamente, os autores observaram que o grupo II (EDTA-T 17%) apresentou
melhor limpeza que o grupo I (ácido cítrico) em todos os terços, sendo também,
significativamente melhor que o grupo III (peróxido de hidrogênio). Entretanto,
avaliando-se o todo, não houve diferenças estatisticamente significantes entre a limpeza
promovida nos grupos I e II, que, contudo, apresentaram significativamente maior
número de túbulos dentinários visíveis que o grupo III.
Segundo Leonardo (2005), Stewart et al. realizaram em 1961 a associação do
EDTA com um veículo cremoso, supondo que uma associação entre o peróxido de uréia
10% (bactericida) e o EDTA 15% (quelante), em uma base estável (Carbowax a 75%),
pudesse oferecer as vantagens de cada um deles, proporcionando um rápido e completo
26
preparo biomecânico e desenvolveram uma nova fórmula denominada de RC-Prep. No
RC-Prep, o pó do EDTA é triturado em peróxido de uréia, homogeneizado em uma base
Carbowax (polietilenoglicol), formando uma substância de consistência cremosa. O
inconveniente, devido à sua consistência, seria a permanência de resíduos desta
substância, mesmo após a irrigação dos canais radiculares.
Lopes, Siqueira Jr. e Elias (2004) afirmam que a atividade do quelante depende
de sua solubilidade e capacidade de dissociação iônica, necessitando água para que isso
ocorra. Devido à forte polarização existente nas moléculas de água, estas agem sobre a
substância iônica promovendo o afastamento de seus íons. Sendo assim pode-se
entender que há maior eficiência nos agentes quelantes quando se apresentam na forma
de solução aquosa, do que quando na forma de cremes.
Segundo Leonardo (2005), as substâncias de consistência cremosa são de difícil
remoção e sua presença irá manter ação irritante sobre os tecidos vivos apicais e/ou
periapicais, não sendo recomendado o seu emprego durante o preparo biomecânico.
Porém, são de grande utilidade em casos de canais radiculares calcificados, atresiados
ou com instrumentos fraturados de difícil remoção.
Szmajser et al. (2004) avaliaram, in vitro, o efeito da aplicação de soluções
quelantes EDTA 17%, EDTA gel trissódico 24%, RC-Prep e RC-Prep experimental
sobre a dentina humana, através da infiltração marginal linear apical após a obturação
dos canais radiculares, observando aquela que possibilitou maior penetração do cimento
obturador nos túbulos dentinários. Os resultados mostraram que não houve diferença
para o grau de infiltração linear marginal apical entre os grupos experimentais,
independentemente da substância quelante utilizada em cada um deles. Fazendo
comparações múltiplas entre os grupos, tomando as medidas de cada espécime
individualmente, houve diferença somente entre o grupo em que foi utilizado EDTA a
17%, que apresentou os menores valores de infiltração linear apical, e o grupo em que
foi utilizado RC-Prep experimental, que apresentou os maiores valores de infiltração.
Buzoglu, Çalt e Gümüsderelioglu (2007) avaliaram os efeitos do uso do EDTA e
RC-Prep, sozinhos ou combinados ao hipoclorito de sódio, na superfície de energia livre
da parede dentinária do canal radicular usando a técnica de captura de bolhas. Foram
utilizados 80 pré- molares extraídos, cujos terços cervical e apical foram seccionados e o
terço médio remanescente dividido longitudinalmente. As raízes foram fixadas em
blocos de resina, expondo a superfície dentinária da parede do canal radicular e
divididas aleatoriamente em seis grupos. O grupo I permaneceu em imersão em 10 mL
27
de EDTA 17% por 15 minutos seguido de irrigação com 10 mL de hipoclorito de sódio
2,5%. O grupo II foi tratado com RC-Prep por 15 minutos seguido de irrigação com 10
mL de hipoclorito de sódio 2,5%. O grupo III permaneceu em imersão em 10 mL de
EDTA 17% por 15 minutos seguido de irrigação com 10 mL de solução salina, o grupo
IV foi tratado com RC-Prep por 15 minutos seguido de irrigação com 10 mL de solução
salina, e o grupo V recebeu irrigação com 10 mL de hipoclorito de sódio 2,5% somente.
O grupo VI, controle, foi irrigado somente com 10 mL de solução salina. Os resultados
mostraram que o uso das substâncias EDTA e RC-Prep sozinhas ou combinadas à
irrigação com hipoclorito de sódio diminuiu significativamente a superfície de energia
livre na parede dentinária do canal radicular, quando comparados com o grupo controle,
ou seja, o uso de agentes quelantes sozinhos ou em combinação com hipoclorito de
sódio diminuem a umectação da parede dentinária do canal radicular, interferindo com o
mecanismo de adesão.
O EDTA gel apresenta-se nesta forma com a seguinte composição: ácido
etilenodiaminotetracético, hidróxido de sódio, água deionizada (livre de íons), e
espessante, empregado para dar a consistência. É hidrossolúvel e apresenta uma
concentração de EDTA trissódico de 24%. Durante o preparo químico- mecânico, a
substância deve ser continuamente substituída, e, ao término deste, o canal radicular
deverá ser irrigado com hipoclorito de sódio (LOPES, SIQUEIRA JR. e ELIAS, 2004).
De acordo com o fabricante do EDTA gel a 24%, dentre suas propriedades/
características, destacam-se as seguintes: facilidade de aplicação, com economia de
tempo e produto; alta concentração que resulta em uma maior eficácia do produto; ser
gel hidrossolúvel, não deixando resíduos; remoção de toda a camada residual por meio
da quelação do cálcio e magnésio, facilitando sua dissolução ou absorção, expondo os
túbulos dentinários e facilitando a adesão das fibras do ligamento periodontal, enquanto
no interior dos canais radiculares facilita a cimentação adesiva; leva de dois a três
minutos para começar a fazer efeito e, após cinco a seis minutos, já não há mais EDTA,
pois já reagiu com a dentina e se neutralizou (VALE et al., 2003).
Guarienti et al. (2001) compararam o efeito das soluções de EDTA 17% e
EDTA gel 24% sobre a microdureza dentinária. Os espécimes foram submetidos à ação
de soda clorada - Macroquímica por duas horas, solução de EDTA 17% - Macroquímica
durante cinco minutos e ao EDTA 24% em forma de gel - Biodinâmica por cinco
minutos. Os autores observaram que a solução de EDTA 17% causou redução
28
considerável na dureza dentinária, ao passo que as demais substâncias não apresentaram
um efeito significativo.
Em seu estudo, Vale et al. (2003) avaliaram comparativamente o efeito de
limpeza propiciado pelo EDTA gel a 24% e EDTA líquido a 17% nos terços médio e
apical das paredes dos canais radiculares, empregados como agentes de limpeza final,
após o preparo químico- mecânico. Tanto o EDTA gel como o líquido foram deixados
no canal radicular por três minutos, sendo agitado com lima Tipo K diâmetro 50 durante
o terceiro minuto e, após, os canais radiculares foram irrigados com 5 mL de soro
fisiológico. A diferença entre as médias do grau de limpeza do EDTA gel e líquido não
foi estatisticamente significante, mostrando que ambos propiciam limpeza semelhante;
no entanto, o grupo que foi utilizado o EDTA gel apresentou mais espécimes com
escore “excelente” atribuído pelos examinadores.
Araújo et al. (2003) avaliaram, in vitro, a permanência e desempenho do EDTA
gel a 24% e do EDTA líquido a 17% no canal radicular pós- instrumentação. As
substâncias foram utilizadas alternadamente com irrigação de hipoclorito de sódio 2,5%.
Os autores observaram a permanência bastante visível do EDTA gel no canal radicular,
em comparação à observação de pouca ou nenhuma presença de EDTA líquido nas
paredes do canal radicular, indicando que o EDTA líquido a 17% parece ser o quelante
mais favorável ao aumento da permeabilidade dentinária pós-preparo do sistema de
canais radiculares, favorecendo a limpeza dos mesmos. Para os autores, o fato de o
EDTA gel ter permanecido em maior quantidade nas paredes do canal radicular pode
ser explicado devido à sua viscosidade, dificultando sua remoção pelo hipoclorito de
sódio. Sua permanência pode impedir a difusão da medicação intracanal na estrutura
dentinária e dificultar uma melhor vedação da obturação, propiciando um efeito inverso
ao que se espera de um agente quelante após o preparo do canal radicular. Estes achados
contradizem as expectativas do fabricante, uma vez que o EDTA gel 24% teria sido
lançado almejando uma maior eficácia do produto, pois suas características iriam
conferir a este uma ação mais rápida e provavelmente mais eficaz.
Só et al. (2005) avaliaram a limpeza das paredes dentinárias do terço apical do
canal radicular frente ao uso de solução de hipoclorito de sódio 1%, isoladamente ou
associada à solução de EDTA 17% pós-preparo, ou ao EDTA gel 24% durante o
preparo dos canais radiculares. O uso do EDTA 17% após o preparo dos canais
radiculares promoveu paredes dentinárias mais limpas, permitindo evidenciar ausência
de magma dentinário e túbulos abertos, representados por contornos nítidos e bem
29
definidos, apresentando os melhores escores de limpeza de parede dentinária. Já o
EDTA gel mostrou resultados intermediários quanto à remoção do magma de dentina.
Para os autores, além da dificuldade de remoção do gel no interior do canal radicular, e
conseqüente remoção do magma dentinário, cabe salientar a dificuldade em introduzir o
gel no canal radicular, no momento do preparo, devido ao menor escoamento do
produto em função de sua consistência. Isso leva a acreditar que possa ocorrer em
alguns casos menor contato da substância com as paredes dentinárias no terço apical do
canal radicular.
O Glyde File Prep (Dentsply/ Maillefer) é um novo agente quelante e consiste
numa associação de EDTA, peróxido de carbamida (peróxido de uréia) em uma base
hidrossolúvel, em veículo gel, devendo ser empregado apenas no início da
instrumentação, até os três primeiros diâmetros, e a posterior preparação dos canais
radiculares deverá ser realizada apenas com solução de hipoclorito de sódio (LOPES,
SIQUEIRA JR. e ELIAS, 2004). Já segundo Leonardo (2005), esse produto é levado ao
canal radicular como auxiliar da instrumentação sendo usado alternadamente às
irrigações com solução de hipoclorito de sódio.
Grandini, Balleri e Ferrari, (2002) avaliaram a presença da smear layer, resíduos
e túbulos dentinários abertos após o uso do Glyde File Prep. Os 40 espécimes utilizados
foram divididos aleatoriamente em quatro grupos, conforme a solução irrigante utilizada
durante o preparo químico- mecânico: Grupo A: solução fisiológica. Grupo B:
hipoclorito de sódio a 2,5%. Grupo C: hipoclorito de sódio a 2,5% e Glyde File Prep
alternadamente. Grupo D: hipoclorito de sódio a 2,5% durante o preparo, e após
secagem do canal radicular, aplicação de Glyde File Prep, por cinco minutos, com
pontas de papel absorvente seguido pela irrigação com hipoclorito de sódio a 2,5%. As
raízes foram seccionadas longitudinalmente e observadas em MEV. Os autores
observaram que nenhuma das técnicas usadas neste estudo mostrou uma perfeita
remoção da smear layer e dos resíduos, porém uma significante diminuição foi
observada nos grupos C e D, assim como maior quantidade de túbulos abertos, sem
diferenças entre eles, em comparação aos grupos A e B. Provavelmente, segundo eles,
devido ao melhor efeito do Glyde File Prep como irrigante, combinado com hipoclorito
de sódio 2,5%.
Viegas et al. (2002) avaliaram, in vitro, através da MEV, a limpeza das paredes
dentinárias do terço apical do canal radicular frente ao emprego do hipoclorito de sódio
1%, isoladamante, combinado ao EDTA 17% pós-preparo, ou associado ao Glyde File
30
Prep durante o preparo dos canais radiculares. O estudo mostrou que o emprego do
hipoclorito de sódio utilizado isoladamente e em associação ao Glyde File Prep durante
o preparo do canal radicular não permitiu a visualização da abertura dos túbulos
dentinários no início do terço apical na quase totalidade dos dentes observados. Já
quando o hipoclorito de sódio foi utilizado associado ao EDTA 17% pós-preparo, 75%
das amostras mostraram túbulos dentinários abertos e ausência de magma dentinário.
Da mesma forma, Lim et al. (2003) também avaliaram a efetividade na remoção
da smear layer produzida durante a instrumentação do canal radicular promovida pelo
hipoclorito de sódio 1% utilizado isoladamante, combinado ao EDTA 17% pós-preparo,
ou associado ao Glyde File Prep durante o preparo dos canais radiculares. Os autores
observaram que o uso do Glyde File Prep em conjunto com o hipoclorito de sódio foi
efetivo na remoção da smear layer produzida durante a instrumentação dos canais
radiculares, não sendo diferente da limpeza promovida pelo uso do hipoclorito de sódio
1% seguido pela irrigação final com 10 mL de EDTA 17%. Ambos os regimes de
irrigação promoveram maior limpeza nos canais radiculares do que aquela obtida
quando o hipoclorito de sódio foi utilizado isoladamente.
Smear Clear é um preparado contendo agentes antimicrobianos e umectantes à
base de cloreto de cetilpiridínio e EDTA a 17%, recentemente introduzido no comércio
(LEONARDO, 2005).
Dunavant et al. (2006) compararam a eficácia dos irrigantes de canal radicular
hipoclorito de sódio 6%, hipoclorito de sódio 1%, Smear Clear, clorexedina 2%,
R E D T A e BioPure MTAD (associação de doxiciclina, ácido cítrico e detergente
TWEEN 80), contra biofilme de Enterococcus faecalis, imergidos nas substâncias
testadas pelo período de um ou cinco minutos, usando um novo sistema de teste. As
análises estatísticas revelaram uma significante relação entre agente teste e porcentagem
de morte no biofilme de bactérias. Não houve relação entre tempo e porcentagem de
mortes encontradas. A porcentagem de mortes no biofilme de bactérias foi: > 99,99%
para hipoclorito de sódio 6%; 99,78% para hipoclorito de sódio 1%; 78,06% para Smear
Clear, 60,49% para clorexedina 2%; 26,99% para REDTA e 16,08% para BioPure
MTAD. Análises posteriores mostraram uma significante diferença entre hipoclorito de
sódio 1% e 6% , e todos os outros agentes incluindo Smear Clear, clorexedina 2%,
REDTA e BioPure MTAD. Os autores concluíram, dentro dos parâmetros deste estudo,
que o hipoclorito de sódio 1% e o hipoclorito de sódio 6% foram mais eficientes
eliminando o biofilme de E. faecalis do que as outras soluções testadas.
31
2.3 ALTERNATIVAS DESMINERALIZANTES AO USO DO EDTA
Alternativas ao uso do EDTA também têm sido apresentadas ao clínico. Outras
soluções quelantes, como o ácido cítrico e a utilização do laser na remoção da smear
layer têm sido pesquisadas.
2.3.1 Ácido cítrico versus EDTA
O ácido cítrico foi proposto por Loel em 1975, numa concentração de 50%,
como uma substância alternativa ao EDTA. Ele demonstrou, através da MEV, a ação
quelante dessa solução e sua efetividade na limpeza das paredes do canal radicular. O
autor recomendou seu uso aplicado por um ou dois minutos, após o canal radicular ter
sido instrumentado com hipoclorito de sódio como irrigante (1975, apud BARROSO,
HABITANTE e SILVA, 2002). Desde o seu surgimento, estudos têm sido realizados,
objetivando avaliar as propriedades do ácido cítrico, em comparação às mesmas
propriedades do EDTA.
Barroso, Habitante e Silva (2002) compararam o aumento da permeabilidade
dentinária proporcionado pelas ações do EDTA a 17% e do ácido cítrico a 10% após a
instrumentação/irrigação endodôntica ter sido feita com hipoclorito de sódio a 4%. Os
resultados mostraram que o EDTA a 17% teve ação superior à do ácido cítrico a 10%
em pH 1,8 no aumento da permeabilidade dentinária.
Scelza, Teixeira e Scelza (2003) estudaram a eficácia do EDTA- T (EDTA 17%
mais lauril éter sulfato de sódio 1,25%), ácido cítrico 10% e EDTA 17% com respeito à
extração de íons cálcio da dentina do canal radicular, utilizados como irrigação final nos
tempos 3, 10 e 15 minutos. Os autores observaram que aos três minutos houve uma
diferença estatisticamente significante entre EDTA- T e ácido cítrico 10%, este último
apresentando maior eficiência, e entre EDTA-T e EDTA 17%, este último apresentando
também mais eficiência. Nos tempos de 10 minutos e 15 minutos, não houve diferenças
significantes entre ácido cítrico 10% e EDTA 17% nem entre EDTA-T e EDTA 17%,
entretanto, o ácido cítrico 10% foi significativamente melhor que EDTA-T em termos
de extração de cálcio, concluindo desta forma, que tanto o ácido cítrico 10% e EDTA
17% são bons agentes descalcificantes.
Souza et al. (2003) realizaram um estudo comparativo sobre a eficácia na
capacidade desmineralizadora de alguns produtos comerciais à base de EDTA,
32
comparando-os ao ácido cítrico 25%. Foram testados os produtos à base de EDTA das
marcas comerciais: Inodon, Odahcam/ Herpo, Iodontec e Biodinâmica, e mensurados os
halos de descalcificação nas paredes interna e externa de dentina em três cortes
histológicos selecionados de cada espécime, com o auxílio de ocular micrometrada. Das
soluções descalcificadoras estudadas, o ácido cítrico a 25% foi a que proporcionou o
maior halo de desmineralização, seguido por EDTA (Inodon), EDTA (Odahcam/
Herpo), EDTA (Iodontec) e EDTA (Biodinâmica).
Balbinot, Deliyannis e Barbizam (2004) compararam a permeabilidade
dentinária promovida pelas soluções irrigadoras EDTA a 17%, ácido cítrico a 50% e
detergente aniônico, sendo que os agentes permaneceram no interior dos canais
radiculares por cinco minutos. Os resultados mostraram que o uso do ácido cítrico a
50% proporcionou maior permeabilidade dentinária com diferença em relação ao EDTA
a 17%, que mostrou resultados semelhantes ao detergente aniônico.
Eldeniz, Erdemir e Belli (2005) avaliaram a efetividade das soluções de ácido
cítrico 19% e EDTA 17% na microdureza e rugosidade da dentina radicular de dentes
humanos, usando estas soluções alternadamente com solução de hipoclorito de sódio
5,25%. Os espécimes foram tratados com as substâncias testes por dois minutos e meio.
Os resultados indicaram que a irrigação dos canais radiculares com ambos
EDTA/NaOCl ou ácido cítrico/NaOCl reduziram a microdureza e aumentaram a
rugosidade, mas o ácido cítrico apresentou um aumento da rugosidade na dentina e
valores menores de sua microdureza quando comparado com EDTA.
Já Rizzardo et al. (2005), avaliaram comparativamente a ação do aumento da
permeabilidade dentinária do EDTA 17% e do ácido cítrico 10% após o preparo
químico- mecânico ter sido realizado com irrigação de clorexidina gel a 2% e
observaram uma maior permeabilidade dentinária, para o grupo em que foi utilizado
EDTA 17 % como solução irrigadora final, apontando esta solução como melhor opção
de agente quelante.
O mesmo foi observado por De Deus, Paciornik e Maurício (2006), que
avaliando os efeitos das soluções de ácido cítrico 10%, EDTA 17% e EDTAC 17% na
microdureza dentinária dos canais de raízes humanas, após um tempo de aplicação de
um, três e cinco minutos, apontando o ácido cítrico como a substância menos efetiva na
redução da dureza dentinária enquanto EDTA teve um forte efeito.
González- López et al. (2006) pesquisaram a capacidade de desmineralização das
soluções de ácido cítrico 10% e 20% e EDTA 17% após três períodos de tempo
33
procurando determinar se esta foi modificada pela adição de clorexidina 1%. Foram
utilizados dez dentes bovinos, instrumentados e irrigados com hipoclorito de sódio 1%
para remoção dos restos pulpares. Três fatias de 2 mm de espessura foram cortadas do
terço cervical e seccionadas em duas partes iguais, obtendo seis espécimes por dente,
que foram divididos em seis grupos (n=10) para imersão em 25 mL das soluções ou 25
mL da solução mais clorexidina 1%. Grupo I= ácido cítrico 10%, Grupo II= ácido
cítrico 10% mais clorexidina 1%, Grupo III= ácido cítrico 20%, Grupo III= ácido cítrico
20% mais clorexidina 1%, Grupo IV= EDTA 17%, Grupo VI= EDTA 17% mais
clorexidina 1%. Este último grupo foi descartado, porque a adição de clorexidina ao
EDTA imediatamente formou um precipitado cor-de-rosa altamente insolúvel. Em 3, 10
e 15 minutos de imersão, a concentração de [Ca²+] foi mensurada pela absorção atômica
espectrofométrica. Foi observado que o efeito de desmineralização de todas as soluções
foi tempo-dependente, sem diferenças entre eles, e que a adição de clorexidina 1% não
modificou a capacidade de desmineralização destas soluções. Nos primeiros três
minutos, significantemente mais [Ca²+] foi obtido quando EDTA 17% foi usado em
comparação com as outras soluções. A adição de clorexidina 1% não afetou a
capacidade de descalcificação do ácido cítrico nestas concentrações, já a solução de
clorexidina 1% em uso conjunto ao EDTA 17% provou ser impossível.
2.3.2 Laser versus EDTA
O LASER, cuja sigla significa Light Amplification by Stimulated of Radiation
(em português, ampliação da luz por emissão estimulada de radiação) vem sendo
empregado na Odontologia com muitos objetivos e de várias maneiras. Na Endodontia
se destaca o Er: YAG, um laser de alta potência que vem sendo aplicado na remoção da
smear layer, por meio de um processo de ablação, deixando os túbulos dentinários
expostos com mínimo efeito térmico sobre a estrutura dental. O laser de Er: YAG
possui como meio ativo sólido o cristal de terra rara érbio, inserido em uma matriz
hospedeira de Ytrio, Alumínio e Granada (YAG), para bombardeamento de fótons, os
quais se propagam na direção do eixo entre espelhos, embutidos em um ressonador do
aparelho. Estes fótons são amplificados nas sucessivas passagens, antes de deixarem a
cavidade através de um espelho semitransparente, proporcionando a emissão do feixe
laser (LOPES, SIQUEIRA JR. e ELIAS, 2004). O uso do laser Er:YAG no tratamento
34
endodôntico vem sendo investigado in vitro, com o objetivo de se elucidar sua eficácia e
utilidade.
Vale e Garcia (2001) estudaram através das microscopias óptica e MEV a
adaptação dos cimentos Ketac-Endo, AH Plus e Endométhasone à dentina radicular
submetida à ação prévia do laser de Er: YAG intracanal com energia real de 44mJ,
10pps, durante dez segundos, seguido de irrigação com 20 mL de solução salina
fisiológica a 0,9%.; EDTA a 17% e solução salina fisiológica a 0,9%. Os autores
observaram que o laser Er:YAG interferiu na adaptação de todos os cimentos, o EDTA
melhorou a adaptação do Endométhasone e do AH Plus e a solução salina fisiológica a
0,9% melhorou a adaptação do Ketac-Endo, em ambas microscopias empregadas. O
Endométhasone apresentou a pior adaptação entre os cimentos, porém, houve um
grande decréscimo do potencial médio de fendas aplicando previamente o EDTA. A
MEV propiciou melhor visualização das fendas. Concluíram assim, que o laser Er:YAG
também atua na camada residual, porém remove tecido dentinário de forma irregular,
dificultando a adaptação de todos os cimentos testados. O EDTA continua sendo um
excelente agente removedor da camada residual, promovendo limpeza e aumento de
diâmetro dos túbulos dentinários.
Barbizam et al. (2005) pesquisaram o efeito das soluções irrigadoras e do laser
Er:YAG no selamento apical de dentes tratados endodonticamente. Os autores
avaliaram, in vitro, a infiltração marginal apical em canais radiculares obturados com
dois tipos de cimentos endodônticos: Endo Fill (à base de óxido de zinco e eugenol) e
cimento Top Seal (à base de resina epóxica); e após três diferentes formas de tratamento
das paredes dentinárias durante a instrumentação: irrigação final com 10 mL de água
destilada deionizada, irrigação final com EDTA a 17% por cinco minutos, aplicação do
Laser Er:YAG com uma ponta de fibra óptica 30/28 de 0,285 mm de diâmetro acoplada
à peça de mão. Nenhuma das formas de tratamento das paredes dos canais radiculares
ou dos cimentos obturadores testados foi capaz de impedir completamente a infiltração
apical. Os dentes que tiveram irrigação final com EDTA 17% apresentaram os menores
valores de infiltração apical quando comparados aos grupos de dentes irrigados com
hipoclorito de sódio a 1% ou irradiados com laser Er:YAG. Quanto aos cimentos, o
TopSeal apresentou menor infiltração apical do que o Endo Fill.
35
2.4 BIOCOMPATIBILIDADE DAS SOLUÇÕES
Alguns estudos mostram que soluções de ácido cítrico podem se mostrar mais
eficientes que o EDTA na remoção de magma dentinário. Contudo, concentrações
muito altas, em ambas as substâncias, podem trazer benefícios para a desmineralização,
mas em contrapartida, podem ser prejudiciais aos tecidos periapicais. Chan et al. (1999)
afirmaram que o ácido cítrico exerce efeitos potencialmente nocivos na polpa quando
usado para desmineralização da superfície do canal e remoção da smear layer, sendo
sua citotoxicidade associada com sua acidez.
Koulaouzidou et al. (1999) avaliaram comparativamente a citotoxicidade de
concentrações altas e baixas de EDTA e da solução de hipoclorito de sódio, aplicadas
em células fibroblásticas da pele de ratos, por tempos de 1, 3, 6, 12 e 24 horas. Foram
testadas as soluções neutras de EDTA de concentração 15%, 1% e 0,1%; soluções
alcalinas de EDTA de 17%, 1% e 0,1%; e hipoclorito de sódio de concentrações 2,25%,
1% e 0,1%. Todos os agentes testados mostraram citotoxicidade severa para moderada
de maneira concentração-dependente. As concentrações de EDTA 17% e 15%, e
hipoclorito de sódio 2,25% foram severamente citotóxicas, enquanto em concentrações
0,1% os agentes foram moderadamente citotóxicos.
Fidel et al. (2001) avaliaram o efeito citotóxico de três diferentes formulações de
EDTA (EDTA Trissódico - Biodinâmica; EDTA Trissódico Gel 24% - Biodinâmica e
Glyde File Prep – Dentsply/Maillefer), sobre culturas de fibroblastos (células Veromonkey, African green), através de uma técnica quantitativa durante cinco períodos de
observação (1, 3, 6, 12 e 24 horas). Para cada agente e cada período de incubação, três
amostras com os respectivos grupos controles foram preparados e ao término de cada
período de incubação, foi realizada a avaliação da viabilidade celular, utilizando-se a
coloração de azul tripano. Foi encontrada diferença estatística significante entre o
EDTA Gel a 24% e o Glyde File Prep após 1, 3, 6 e 12 horas. Entre o EDTA Trissódico
e o Glyde File Prep a diferença significante só foi observada após a terceira hora. Todos
os agentes testados mostraram uma citotoxicidade variando de moderada à severa,
quando comparada ao grupo controle, na seguinte ordem crescente: EDTA Trissódico Biodinâmica; EDTA Trissódico Gel 24% - Biodinâmica e Glyde File Prep –
Dentsply/Maillefer .
Scelza et al. (2001) analisaram a citotoxicidade do ácido cítrico 10% e EDTA-T
em cultura fibroblástica, diluídos para 0,1% e 1,0%; sendo as células contadas após
36
período de 0, 6, 12 e 24 horas (curto prazo) e um, três, cinco e sete dias (longo prazo).
Os resultados indicaram que o ácido cítrico é mais biocompatível que o EDTA-T. Nos
testes em curto prazo, a variabilidade celular alcançada foi de 85% a 99% para todos os
grupos experimentais, sem diferenças estatísticas quando comparadas com as culturas
de controle, exceto no grupo tratado com EDTA-T 1%, que causou uma progressiva
diminuição na variabilidade celular. Em testes em longo prazo, todas as culturas
cresceram em número desde o primeiro dia até o final do período experimental, não
demonstrando inibição da proliferação celular, exceto nas culturas tratadas com EDTAT 1%, que causou total inibição do crescimento celular. Todas as diluições de ácido
cítrico 10% foram mais biocompatíveis que as de EDTA-T, e as culturas tratadas com
ácido cítrico tiveram uma alta porcentagem de células viáveis analisadas em um curto
prazo, e as células conservaram sua capacidade de auto-regeneração.
Silva et al. (2002b) avaliaram a compatibilidade biológica das soluções de
EDTA 17%, EDTA-T e ácido cítrico 10% quando implantadas em mandíbulas de ratos
Wistar (Rattus norvergicus albinus), nos períodos de 1, 7, 14 e 28 dias. A inserção de
cada substância foi possibilitada por um material carreador (Fibrinol®) colocado em
perfurações bicorticais realizadas em ambos os lados da mandíbula dos animais, onde
um dos lados apresentava apenas o Fibrinol® sem a substância teste (controle). Cada
quelante foi testado em três ratos nos quatro diferentes tempos. Os resultados
demonstraram que o material carreador teve presença constante nas lojas cirúrgicas em
todos os tempos do estudo tanto nas amostras de substâncias teste quanto nos controles.
Após 24 horas, as amostras com as substâncias teste e os controles apresentaram reação
inflamatória aguda com a presença de polimorfonucleares de distribuição difusa. Nos
períodos de tempo de 7, 14 e 28 dias, foi observada a presença do Fibrinol® associado à
reação inflamatória de corpo estranho em todas as amostras. Os autores observaram
também áreas de reparação caracterizadas pela proliferação de células mesenquimais e
osteogênese, as quais intensificavam-se com o passar do tempo reduzindo-se a resposta
inflamatória, concluindo assim que o EDTA 17%, o EDTA-T e o ácido cítrico 10% não
apresentaram diferenças na evolução reparativa quando comparados entre si.
Por sua vez, Balbinot, Deliyannis e Barbizam (2004) citam em seu estudo que
alguns trabalhos mostram o ácido cítrico como sendo mais biocompatível que o EDTA.
Para Sousa, Bramante e Taga (2005) todas as soluções devem ser usadas de
maneira segura respeitando os tecidos periapicais. Injúrias químicas ocorrem quando
tecido vital é exposto a soluções que não são compatíveis com o metabolismo celular.
37
Na escolha de uma adequada solução irrigante deve ser considerada sua
biocompatibilidade com respeito aos aspectos biológicos. Os autores avaliaram, em seu
estudo, o potencial irritativo do EDTA 15%, EGTA 15%, ácido cítrico 15% e soro
fisiológico durante a fase exsudativa do processo inflamatório; por quatro diferentes
períodos de tempo (30 minutos, uma, três e seis horas) usando um método de análise
físico-químico para quantificação do aumento da permeabilidade vascular. O EDTA
apresentou os maiores valores de corante extravasado para todos os tempos estudados,
seguido pelo EGTA e ácido cítrico, em comparação com o grupo controle e todas as
soluções produziram um contínuo potencial irritante mesmo depois de seis horas. Os
resultados demonstraram que o ácido cítrico apresentou o menor potencial irritativo,
podendo ser usado como uma solução irrigante alternativa ao EDTA na terapia
endodôntica.
2.5 ATIVIDADE ANTIMICROBIANA
Siqueira Jr. et al. (1998) afirmaram que o EDTA possui atividade antibacteriana
contra bacilos anaeróbios estritos produtores de pigmentos negros. Em seu estudo, os
autores testaram o efeito antibacteriano das soluções irrigadoras hipoclorito de sódio nas
concentrações de 0,5%; 2,5% e 4%; digluconato de clorexidina nas concentrações de
0,2% e 2,0%; ácido cítrico a 10% e EDTA a 17%; frente aos bacilos anaeróbios gramnegativos
produtores
de
pigmentos
negros:
Porphyromonas endodontalis,
Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia e Prevotella nigresce; e frente às
bactérias facultativas: Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans, Streptococcus
sanguis e Streptococcus sobrinus; por difusão em meio de cultura agar. Todas as
soluções utilizadas mostraram-se inibitórias contra todas as bactérias. Baseado na média
dos diâmetros das zonas de inibição de crescimento bacteriano, o efeito antibacteriano
das soluções pode ser classificado de forte para fraco como segue: hipoclorito de sódio a
4%, hipoclorito de sódio a 2,5%, clorexidina a 2%, clorexidina a 0,2%, EDTA 17%,
ácido cítrico 10% e hipoclorito de sódio a 0,5%. A solução de hipoclorito de sódio a 4%
promoveu uma grande zona média de inibição bacteriana neste estudo, que foi
significativamente superior quando comparada com as outras soluções, exceto
hipoclorito de sódio a 2,5%. O EDTA 17% mostrou um efeito antibacteriano que,
segundo os autores, pode ser considerado razoável para uso clínico. Estes afirmam ainda
que pelo fato da função primária deste irrigante endodôntico ser a remoção da smear
38
layer, a propriedade antibacteriana pode ser considerada uma vantagem adicional, sendo
particularmente importante durante a remoção de smear layer contaminada.
Silva et al. (2002a) estudaram a atividade antimicrobiana das soluções de
hipoclorito de sódio nas concentrações de 1,0 e 2,5%, hipoclorito de sódio a 0,5% e a
1,0% associados ao creme de Endo-PTC, clorexidina a 0,12% e a 2,0% e EDTA-T a
17%, frente a bactérias anaeróbias e facultativas, bem como Streptococcus mutans,
Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Escherichia coli e leveduras, como
Candida albicans, que são de ocorrência comum nas infecções do canal radicular.
Tubos de ensaio contendo 0,5 mL das substâncias químicas testadas e 0,5 mL de
suspensão microbiana, padronizada pelo tubo dois da escala de McFarland, foram
colocados em contato e em 10, 20 e 30 minutos retirou-se uma amostra que foi
inoculada em 4 mL do caldo BHI e incubada a 37ºC por 24 horas. Após a incubação,
realizou-se sub-cultivos para avaliar a ação microbicida das soluções. Os autores
observaram que o hipoclorito de sódio a 2,5%, a 1,0% associado ou não ao creme de
Endo-PTC, e a clorexidina a 0,12% e 2,0% mostraram-se microbicida para todas as
amostras microbianas testadas. Já o hipoclorito de sódio a 0,5% associado ao creme de
Endo-PTC não atuou sobre Staphylococcus aureus e o EDTA-T a 17% não foi efetivo
contra nenhum microrganismo testado em nenhum dos tempos experimentais.
Ruff, Mcclanahan e Babel (2006) compararam, in vitro, a eficácia antifúngica do
hipoclorito de sódio 6%, gluconato de clorexidina 2%, EDTA 17% e Bio Pure MTAD,
como irrigação final, frente à Candida albicans. Foram utilizados 48 dentes com canal
único que após o preparo químico- mecânico foram divididos aleatoriamente em quatro
grupos, cada um com um dente para controle positivo e um para controle negativo e
inoculados com uma suspensão de 0,3 mL de Candida albicans (ATCC 60193) injetada
dentro dos canais radiculares. Os dentes do controle negativo foram injetados e
submergidos em solução salina esterilizada. As amostras foram incubadas por 72 horas.
Os dentes foram irrigados, respectivamente, com 1 mL de hipoclorito de sódio 6%, por
um minuto; 0,2 mL de gluconato de clorexidina 2% por um minuto; 5 mL de Bio Pure
MTAD por cinco minutos; e 1 mL de EDTA 17% por um minuto. Os dentes do grupo
controle positivo foram irrigados com 1 mL de solução salina esterelizada por um
minuto e os dentes do grupo controle negativo, após esterelizados, foram irrigados com
solução salina esterelizada. As amostras dos espécimes foram colocadas em placas com
dextrose agar Sabouraud 4% e incubadas a 36°C e 91% de umidade por 24 horas. As
unidades de colônias em formação foram contadas com um mensurador de atividade
39
antifúngica. Os resultados mostraram que o hipoclorito de sódio 6% e o gluconato de
clorexidina 2% foram igualmente efetivos, sendo superiores ao EDTA 17% e ao Bio
Pure MTAD, na atividade antifúngica; entretanto o Bio Pure MTAD mostrou-se superior
ao EDTA 17%, que apresentou o pior desempenho.
40
3 CONCLUSÃO
Segundo o exposto nessa revisão de literatura, pode-se concluir que:
-
O EDTA é a substância quelante de escolha no preparo biomecânico dos canais
radiculares.
-
O EDTA apresenta melhores resultados clínicos quando utilizado com o
hipoclorito de sódio.
-
O emprego do EDTA em meio aquoso é preferível, sendo recomendadas as
soluções de pH neutro. Os sais de EDTA di, tri e tetrassódico, nas concentrações
de 15 e 17%, mostram-se eficientes na remoção da smear layer. Não há por
parte dos autores, um consenso sobre o tempo de aplicação.
-
O EDTA não apresenta capacidade antimicrobiana importante. Apresenta
citotoxicidade e potencial irritativo aos tecidos, não interferindo, porém, na
reparação tecidual.
41
REFERÊNCIAS
ARAUJO, C. R.; et al. Avaliação in vitro do desempenho dos EDTAs gel e líquido póspreparo do sistema de canais radiculares. Jornal Brasileiro de Endodontia, Curitiba, v.
4, n. 13, p. 160-164, Abr./ Jun. 2003.
BALBINOT, E. C. A.; DELIYANNIS, A.; BARBIZAM, J. V. B. Análise in vitro da
permeabilidade dentinária promovida por diferentes soluções químicas auxiliares na
irrigação final do canal radicular. Revista da Faculdade de Odontologia, Passo Fundo,
v. 9, n. 1, Jan./Jun. 2004.
BARBIZAM, J. V. B.; et al. Efeito das soluções irrigadoras e do laser Er: Yag no
selamento apical de dentes tratados endodonticamente. Revista da Faculdade de
Odontologia, Passo Fundo, v. 10, n. 1, Jul./Dez. 2005.
BARROSO, L. S.; HABITANTE, S. M.; SILVA, F. S. P. Estudo comparativo do
aumento da permeabilidade dentinária radicular quando da utilização do hipoclorito de
sódio, EDTA e ácido cítrico após o preparo químico-cirúrgico. Jornal Brasileiro de
Endodontia, Curitiba, v. 3, n. 11, p. 324-330, Out./Dez. 2002.
BONAN, R. F.; et al. Influência da solução irrigadora na capacidade seladora apical de
obturações de canais radiculares. In: Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Pesquisa
Odontológica, 19, [S.l.]. Anais... São Paulo: SBPqO, 2002.
BUZOGLU, H. D.; ÇALT, S.; GÜMÜSDERELIOGLU, M. Evaluation of the surface
free energy on root canal dentine walls treated with chelating agents and NaOCl.
International Endodontic Journal, Oxford, v. 40, n. 1, p. 18-24, 2007.
ÇALT, S.; SERPER, A. Time-dependent effects of EDTA on dentin structures. Journal
of Endodontics. Baltimore, v. 28, n. 1, p. 17-19, Jan. 2002.
CHAN, C.; et al. Morphological alterations associated with the cytotoxic and cytostatic
effects of citric acid on cultured human dental pulp cells. Journal of Endodontics,
Baltimore, v. 21, n. 5, p. 354-358, May 1999.
CRUMPTON, B. J.; GOODELL, G. G.; MCCLANABAN, S. B. Effects on smear layer
and debris removal with varying volumes of 17% REDTA after rotary instrumentation.
Journal of Endodontics. Baltimore, v. 31, n. 7, p. 536-538, Jul. 2005.
42
CRUZ-FILHO, A. M.; et al. Evaluation of the effect of EDTAC, CDTA and EGTA on
radicular dentin microhardness. Journal of Endodontics, Baltimore, v. 27, n. 3, p. 183184, Mar. 2001.
DE DEUS, G.; PACIORNIK, S.; MAURICIO, M. H. P. Evaluation of the effect of
EDTA, EDTAC and citric acid on the microhardness of root dentine. International
Endodontic Journal, Oxford, v. 39, n. 5, p. 401-407, 2006.
DOGAN, H.; ÇALT, S. Effects of chelating agents and sodium hipoclorite on mineral
content of root dentin. Journal of Endodontics, Baltimore, v. 27, n. 9, Sep. 2001.
DUNAVANT, T. R.; et al. Comparative evaluation of endodontic irrigants against
enterococcus faecalis biofilms. Journal of Endodontics. Baltimore, v. 32, n. 6, p. 527531, Jun. 2006.
ELDENIZ, A., U. ERDEMIR, A.; BELLI, S. Effect of EDTA and citric acid solutions
on the microhardness and the roughness of human root canal dentin. Journal of
Endodontics, Baltimore, v. 31, n. 2, p. 107-110, Feb. 2005.
FIDEL JR, R. A. S.; et al. Avaliação da citotoxicidade de três formulações de EDTA
usadas na terapia endodôntica. In: Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Pesquisa
Odontológica, 18, [S.l.], Anais... São Paulo: SBPqO, 2001.
GONZÁLEZ-LÓPEZ, S.; et al. Effect of CHX on the decalcifying effect of 10% citric
acid, 20% citric acid, or 17% EDTA. Journal of Endodontics. Baltimore, v. 32, n. 8, p.
781-784, Aug. 2006.
GRANDE, N. M.; et al. Interation between EDTA and sodium hypochlorite: a nuclear
magnetic resonance analysis. Journal of Endodontics. Baltimore, v. 32, n. 5, p. 460464, May 2006.
GRANDINI, S.; BALLERI, P.; FERRARI, M. Evaluation of Glyde File Prep in
combination with sodium hypochlorite as a root canal irrigant. .Journal of
Endodontics, Baltimore, v. 28, n. 4, p. 300-303, Apr. 2002.
GUARIENTI, D.; et al. Microdureza dentinária: ação de duas formulações diferentes de
EDTA. In: Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Pesquisa Odontológica, 18, [S.l.].
Anais… São Paulo: SBPqO, 2001.
43
GUERISOLI, D. M. Z.; et al. Evaluation of smear layer removal by EDTAC and
sodium hypochlorite with ultrasonic agitation. International Endodontic Journal,
Oxford, v. 35, n. 5, p. 418-421, 2002.
KOKKAS, A. B.; et al. The influence of the smear layer on dentinal tubule penetration
depth by three different root canal sealers: an in vitro study. Journal of Endodontics.
Baltimore, v. 30, n. 2, p. 100-102, Feb. 2004.
KOULAOUZIDOU, E. A.; et al. Cytotoxic effects of different concentrations of neutral
and alkaline EDTA solutions used as root canal irrigants. Journal of Endodontics,
Baltimore, v. 25, n. 1, p. 21-23, Jan. 1999.
LEONARDO, M. R. Preparo Biomecânico dos Canais Radiculares Definição e
Conceituação, Finalidades, Importância. Recursos Convencionais para sua Aplicação:
Meios Químicos (Soluções Irrigadoras) e Meios Físicos (Irrigação, Aspiração e
Inundação). In:______. Endodontia: Tratamento de Canais Radiculares: Princípios
Técnicos e Biológicos. Volume 1. São Paulo: Artes Médicas, 2005. p. 487-540.
LIM, T. S.; et al. Light and scanning electron microscopic evaluation of Glyde File Prep
in smear layer removal. International Endodontic Journal, Oxford, v. 36, n. 5, p. 336343, 2003.
LOPES, H. P.; SIQUEIRA JR., J. F.; ELIAS, C. N. Substâncias Químicas Empregadas
no Preparo dos Canais Radiculares. In: LOPES, H. P.; SIQUEIRA JR. Endodontia:
Biologia e Técnica. 2ª edição. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan S. A., 2004. p. 535579.
MENEZES, A. C. S. C.; ZANET, C. G.; VALERA, M. C. Smear layer removal
capacity of disinfectant solutions used with and without EDTA for the irrigation of
canals: a SEM study. Pesquisa Odontológica Brasileira, São Paulo, v. 17, n. 4, Oct./
Dec., 2003.
NAKASHIMA. K.; TERATA, R. Effect of pH modified EDTA solution to the
properties of dentin. Journal of Endodontics. Baltimore, v. 31, n. 1, p. 47-49, Jan.
2005.
O’CONNELL, M. S.; et al. A comparative study of smear layer removal using different
salts of EDTA. Journal of Endodontics, Baltimore, v. 26, n. 12, p. 739-743, Dec.
2000.
44
PAIVA, J. G.; ANTONIAZZI, J. H. Fase de preparo do canal radicular . In:_____.
Endodontia. Bases Para Prática Clínica. 2ª edição. São Paulo: Artes Médicas, 1988. p.
501-629.
PAQUÉ, F.; et al. Tubular sclerosis rather than the smear layer impedes dye penetration
into the dentine of endodontically instrumented root canals. International Endodontic
Journal, Oxford, v. 39, n. 1, p. 18-25, 2006.
PELLISSARI, C. A. Substâncias Auxiliares do Preparo do Canal Radicular. In:
BERGER, C. R. Endodontia Clínica. São Paulo: Pancast Editora, 2002. p. 311-321.
PERES, F. G.; et al. Limpeza superficial promovida por diferentes formas de toalete
final em preparos endodônticos – estudo em MEV. In: Reunião Anual da Sociedade
Brasileira de Pesquisa Odontológica, 19, [S.l.]. Anais... São Paulo: SBPqO, 2002.
PINHEIRO, C. R.; et al. Penetração do EDTA e da clorexidina marcados pelo azul de
metileno na dentina radicular. RBO,[S.l.], v.61, n. 3 e 4, p. 217-219, 2004.
RIZZARDO, A.; et al. Análise comparativa in vitro da ação do EDTA e do ácido
cítrico quanto a permeabilidade dentinária na limpeza final do canal radicular
associado à ação do clorexidina gel 2%. 12p. Trabalho de Conclusão de Curso
(Graduação) - Faculdade de Odontologia, Universidade de Passo Fundo – RS, Passo
Fundo, 2005.
RUFF, M. L.; MCCLANAHAN, S. B.; BABEL, B. S. In vitro antifungal efficacy of
four irrigants as a final rinse. Journal of Endodontics. Baltimore, v. 32, n. 4, p. 331333, Apr. 2006.
SALEH, I. M.; et al. The effects of dentine pretreatment on the adhesion of root-canal
sealers. International Endodontic Journal, [S.l.], v. 25, n. 10, p. 859-886, 2002.
SALLES, A. A.; FACHIN, E. V. F. Influência do tratamento com EDTA no
embricamento de dois cimentos à base de resina às paredes dos canais radiculares.
Revista da Faculdade de Odontologia ,Porto Alegre, v. 44, n. 2, p. 40-44, Dez. 2003.
SCELZA, M. F. Z.; ANTONIAZZI, J. H.; SCELZA, P. Efficacy of final irrigation – a
scanning electron microscopic evaluation. Journal of Endodontics, Baltimore, v.26, n.
6, Jun. 2000.
45
SCELZA, M. F. Z.; et al. Cytotoxic effects of 10% citric acid and EDTA-T used as root
canal irrigants: an in vitro analysis. Journal of Endodontics, Baltimore, v. 27, n. 12, p.
741-743, Dec. 2001.
SCELZA, M. F. Z.; TEIXEIRA, A. M.; SCELZA, P. Decalcifying effect of EDTA- T,
10% citric acid, and 17% EDTA on root canal dentin. Oral Surgery Oral Medicine
Oral Pathology Oral Radiol Endod, [S.l.], v. 95, n. 2, p. 234-236, 2003.
SERPER, A.; ÇALT, S. The desmineralizing effects of EDTA at different
concentrations and pH. Journal of Endodontics. Baltimore, v. 28, n. 7, p. 501-505, Jul.
2002.
SILVA, A. R. P.; et al. Atividade antimicrobiana de algumas substâncias químicas
utilizadas no preparo de canais radiculares. In: Reunião Anual da Sociedade Brasileira
de Pesquisa Odontológica, 19, [S.l.]. Anais... São Paulo :SBPqO, 2002a.
SILVA, V. S.; et al. Compatibilidade biológica do EDTA, EDTA-T e ácido cítrico em
mandíbulas de ratos. In: Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Pesquisa
Odontológica, 19, [S.l.]. Anais... São Paulo :SBPqO, 2002b.
SIQUEIRA JR., J. F.; et al. Antibacterial effects of endodontic irrigants on blackpigmented gram- negative anaerobes and facultative bacteria. Journal of Endodontic,
Baltimore, v. 24, n. 6, Jun. 1998.
SÓ, M. V. R.; et al. Análise por MEV das paredes da dentina frente a três regimes de
limpeza do canal radicular. Jornal Brasileiro de Endodontia, Curitiba, v. 5, n. 21/21,
p. 446-453, 2005.
SOUSA, S. M. G.; BRAMANTE, C. M.; TAGA, E. M. Biocompatibility of EDTA,
EGTA and citric acid. Brazilian Dental Journal, Ribeirão Preto, v. 16, n. 1, Jan./Apr.
2005.
SOUSA-NETO, M. D.; et al. Evaluation of the effect of EDTA, EGTA and CDTA on
dentin adhesiveness and microleakage with different root canal sealers. Brazilian
Dental Journal, Ribeirão Preto, v. 13, n. 2, p. 123-128, 2002.
SOUZA, R. A. Limpeza química do sistema de canais – um capítulo especial na
endodontia. Jornal Brasileiro de Endodontia, Curitiba, v.5, n. 21/22, p. 454-463,
2005.
46
SOUZA, V. de; et al. E. Ação desmineralizadora de algumas soluções empregadas no
tratamento endodôntico. Jornal Brasileiro de Endodontia, Curitiba, v. 4, n. 12, p. 7276, Jan./Mar. 2003.
SZMAJSER, L. K.; et al. Infiltração marginal apical utilizando diferentes soluções
quelantes: estudo in vitro. Revista da Associação Paulista de Cirurgiões Dentistas,
[S.l.], v. 58, n. 6, p. 447-451, 2004.
TEIXEIRA, F. B et al. Remoção de smear layer dos canais radiculares utilizando o
irrigante Endoquil. Revista Brasileira de Odontologia, [S.l.], v. 58, n. 6, Nov./Dez.
2001.
VALE, M. S.; GARCIA, R. B. Avaliação em microscopias óptica e eletrônica de
varedura da adaptação de três cimentos endodônticos à dentina radicular submetida à
ação prévia do laser de Er: YAG, EDTA e solução salina fisiológica. Revista da
Faculdade de Odontologia de Bauru, [S.l.], v. 9, n. 1/2 , p. 11-17, Jan./Jun. 2001.
VALE, S. M.; et al. Estudo comparativo do grau de limpeza de canais radiculares com
duas formulações de EDTA. Revista da Associação Paulista de Cirurgiões Dentistas,
[S.l.], v. 57, n. 2, p. 118-122, Mar./ Abr. 2003.
VIEGAS, A. P. K.; et al. MEV da parede de dentina frente ao uso do hipoclorito de
sódio isolado ou associado ao EDTA ou ao Glyde File Prep. Jornal Brasileiro de
Endodontia, Curitiba, v. 3, n. 11, p. 293-299, 2002.
VILLEGAS, J. C.; et al. Obturation of accessory canals after four different final
irrigation regimes. Journal of Endodontics, Baltimore, v. 28, n. 7, p. 534-536, Jul.
2002.
ZANATO, A.; SÓ, M. V.; FIGUEIREDO, J. A. P. Remoção da camada de esfregaço:
influência do tempo de agitação do agente quelante (EDTA). Rev. Odontol. UNICID,
[S.l.], v. 13, n. 2, p. 103-111, Maio/Ago. 2001.
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O uso do EDTA