BIOLOGIA
Análise do perfil protéico em Giardia lambia e
pesquisa de anticorpos anti- Giardia na
população pediátrica das creches municipais de
Osasco- SP, no período de setembro de 2003 a
junho de 2004
Sheila Rovagnoli Vieira da Silva
Pesquisador
Mírian Silva do Carmo
Orientador
Resumo
G.lamblia é um parasita intestinal de distribuição cosmopolita em áreas endêmicas, apresenta alta prevalência entre crianças,
principalmente entre os menores de 2 anos. A transmissão pode ocorrer pessoa-a-pessoa, mas geralmente é transmitida
através de cistos. A doença é geralmente aguda e autolimitante em imunocompetentes, podendo tornar-se persistente e fatal
em imunocomprometidos, variando desde assintomática, até diarréia severa e síndrome de má absorção. Fatores do hospedeiro,
e parasita são importantes na severidade da resposta ao parasita. Neste trabalho analisamos a resposta imune secretora
durante a infecção por Giardia em frações protéicas do parasita. Para isso utilizamos amostras de fezes e sangue de 256
crianças das creches de Osasco, atendidas pelo UNOLAB, entre setembro de 2003 e junho de 2004. O exame dessas amostras
revelou que 36 (14,06%) eram positivas para cistos de G. lamblia. Os cistos foram purificados e submetidos em cultura por uma
semana, com trocas sucessivas do meio até aparecimento dos trofozoítas que somaram 27 amostras positivas. As proteínas
foram analisadas por SDS–PAGE em condições não redutoras revelando proteínas entre 116 e 14kDa. A análise dos anticorpos
feita pelo método de “immunoblot” e o reconhecimento por IgA, IgG e IgM anti-giardia, foi realizado utilizando-se um pool de
10 soros positivos, e o controle com 5 soros negativos.
Palavras-chave: Creches. Giardia. Proteínas. Anticorpos.
Abstract
G.lamblia is intestinal parasite of cosmopolita distribution, in endemic areas, it possesss high prevalence between children,
mainly it enters the minors of 2 years. The transmission can occur person-the-person, but generally it is transmitted through
cysts. The illness is generally acute and autolimitante in imunocompetentes, being able to become persistent and fatal in
imunocomprometidos, varying since assintomática, until severe diarréia and syndrome of bad absorption. Factors of the host,
and parasite is important in the severity of the reply to the parasite. We analyze the secretora immune reply in protein
fractions of the parasite during the infection. For this we use excrement samples and blood of 256 children of the day-care
centers of Osasco, taken care of for the UNOLAB, between September of 2003 and June of 2004. The examination of these
samples disclosed that 36 (14,06%) were positive for cysts of Giardia. The cysts had been purificados and submitted in culture
per one week, with successive exchanges of the way until appearance trophozoites them that they had added 27 positive
samples. The proteins had been analyzed by SDS-PAGE in not reducing conditions disclosing proteins between 116 and
14kDa. The analysis of the antibodies made by the method of immunoblot to recognition for IgA, IgG and anti-giardia IgM,
was carried through using one pool of 10 positive soros, and the control with 5 negative soros.
Key-words: Day-care centers. Giardia. Proteins. Antibodies.
Revista PIBIC, v. 2, p. 45-54, 2005
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Sheila Rovagnoli Vieira da Silva
1 Introdução
ausentes; em tais situações, exames parasitológicos das
G. lamblia é um parasita intestinal comum de
distribuição cosmopolita, que parece incidir mais em
A OMS estima que ocorra mais de 200 milhões de
regiões de clima temperado do que em zonas tropicais,
casos anuais de giardíase na África, Ásia e América
prolifera nas comunidades do terceiro mundo (MEYER,
Latina. No Brasil, um levantamento realizado em 1988
1990 apud FAUBERT, 2000). A G. lamblia é um
revelou a prevalência de 28,5% em escolares com faixa
protozoário, flagelado, que durante o ciclo evolutivo
etária entre 7 e 14 anos. Trata-se também do principal
apresenta formas trofozoíta e cisto (REY, 1992). Os
trofozoítas vivem no duodeno e nas primeiras porções
do jejuno, sendo também encontrados nos condutos
biliares e na vesícula (REY, 1992). Os parasitas formam
revestimento extenso a ponto deste ser capaz de interferir
na absorção de gorduras e vitaminas lipossolúveis,
especialmente a vitamina A (REY, 1992). Multiplicamse ativamente por divisão binária longitudinal, o que
f az surgir grande número de novos elementos
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fezes poderão ser falso-negativos.
(CIMERMAN, B.; CIMERMAN, S., 2001). Em certo
momento, o trofozoíta se retrai, condensa e secreta uma
membrana, transformando-se em cisto (CIMERMAN, B.;
CIMERMAN, S., 2001).
Os cistos são formas infectantes, responsáveis pela
disseminação da moléstia (CIMERMAN, B.; CIMERMAN,
S., 2001). São muito resistentes, permanecendo viáveis
durante dois meses no meio externo. A cloração da
água, bem como o seu aquecimento até 60ºC, não são
suficientes para sua destruição. Ao serem ingeridos,
passam pelo estômago e chegam ao duodeno, onde
perdem a membrana cística transformando-se em
trofozoítas, que podem ficar livres na luz intestinal ou
f i xar- se na parede duodenal (CIMERMAN, B.;
CIMERMAN, S., 2001). A eliminação dos cistos pode
ocorrer às vezes em períodos de sete a dez dias durante
os quais estão presentes em pequena quantidade ou
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parasi ta em i ndi víduos de renda média e al ta
(CIMERMAN, B.; CIMERMAN, S., 2001). No estado de
São Paulo a taxa de prevalência entre escolares era de
20 a 25% (REY, 1992). Em áreas endêmicas, as taxas de
prevalência elevadas para a infecção por Giardia foram
relatadas principalmente em crianças de 0 a 6 anos
(berçário a pré- escola) (FRANCO; CORDEIRO, 1996;
CARDOSOet al., 1995; GILMAN et al., 1985; KEYSTONE
et al., 1978 apud GUIMARÃES; SOGAYAR, 2002;
GUIMARÃES; SOGAYAR, 1995). A incidência é maior
entre grupos populacionais que apresentam condições
higiênicas precárias e vivem em instituições fechadas
como creches, asilos, orfanatos etc. (REY, 1992).
O homem é o pri nci pal reservatóri o, mas
possivelmente existem outros animais que possam ser
fontesde infecção. Os surtoslocalizadosparecem resultar
da contaminação das águas de abastecimento (REY,
1992). Os sintomas mais freqüentes são evacuações
líquidas ou pastosas (em 93% a 96% dos pacientes),
número aumentado de evacuações, mal-estar, cólicas
abdominais, fraqueza e perda de peso; os menos
freqüentes são diminuição do apetite, náuseas, vômitos,
flatulência, distensão abdominal, ligeira febre, cefaléia,
nervosismo e má absorção (REY, 1992). Asfezespastosas
ou liquefeitas são malcheirosas, geralmente claras ou
acinzentadas. Freqüentemente contêm muco, mas raras
vezes sangue ou pus. Nos casos mais graves pode haver
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pesquisa de anticorpos anti-giardia na população
pediátrica das creches municipais de Osasco-SP
esteatorréia. A doença dura em média seis semanas
antigênica e o papel dos antígenos, na resposta imune
podendo variar de 1 a 30 semanas (REY, 1992).
durante a infecção, são importantes para compreender
Além das formas agudas, o processo pode evoluir
para formas subagudas ou crônicas. Nestes casos, além
de diarréia intermitente, durando poucos dias de cada
vez, as queixas são de anorexia, náuseas, distensão e
desconforto abdominal, flatulência, lassidão e perda de
a patogenicidade da giardíase. Além disso, a cultura
dos trofozoítas, sob circunstâncias impróprias, torna o
parasita mais vulnerável ao ataque imunológico,
tornando problemática a interpretação de estudos dos
mecanismos efetores na resposta imune aos trofozoítas.
peso (REY, 1992). Em algunscasos pode haver distensão
A identificação dos antígenos reconhecidos pelo
e desconforto epigástrico, sem alterações do trânsito
sistema imune do hospedeiro é fundamental para
intestinal (REY, 1992). Os sintomas da giardíase crônica
compreender a modulação da infecção. Consideram-se
podem alongar-se por muitos meses ou anos, variando
os antígenos variantes de superfície da membrana ou
entre manifestações benignas a graves, tal como ocorre
da membrana plasmática importantes, pois interagem
na forma subaguda. Em pacientes com deficiência
com o sistema imune. Portanto o conhecimento da
imunológica, pode-se encontrar diarréia persistente, má
composição antigênica do parasita e o papel que esses
absorção e perda de peso acentuada (REY, 1992). Em
antígenos desempenham na resposta imune são
crianças, a sintomatologia é semelhante, constituindo
importantes para a compreensão da patogênese da
por vezes uma síndrome com diarréia crônica, dor
doença. Euma vez que osindivíduosinfectados possuem
abdominal e abdome distendido, anorexia, perda de peso
anticorpos antiparasita, a identificação de antígenos
e crescimento retardado (REY, 1992).
reconhecidos pelo sistema imune do hospedeiro auxilia
A primeira evidência da participação do sistema
imune na eliminação de Giardia, durante a infecção,
foi relatada por Roberts-Thomson et al. (1976). Os
autores mostraram que ratos sem timo desenvolvem
infecção prolongada (BELOSEVIC et al., 1984). A
resistência individual dos hospedeiros à infecção varia,
podendo ser controlada por inúmeros genes. Estudo
na compreensão da modulação da infecção por Giardia. E
sem contar a melhoria das ferramentas do diagnóstico.
Mostra-setambém como prioritário o estudo devacinas. O
objetivo dessetrabalho éanalisar arespostaimunesecretora
durante a infecção por G. lamblia em frações protéicas do
parasita.
2 Metodologia
referente ao comportamento humano sugere que, mesmo
em uma pequena comunidade, existe uma grande
Os cistos de Giardia foram pesquisados pelos
variabilidade no risco de infecção entre pessoas,
métodos de Ritchie ou Formol-Éter (RITCHIE, 1976) e
resultado dasdiferençasna exposição ao parasita invasor
Hoffmann Pons & Janer ou Lutz (HOFFMAN, 1934).
(ROITT et al., 1999). Ostrofozoítasnão invadem o epitélio
Amostraspositivasforam submetidasao método de Faust
ou as camadas mais profundas da mucosa, fazendo com
para isolar os cistos dos resíduos fecais, e posterior
que esta permaneça estimulada pelos antígenos durante
inoculação em meio de cultura. Trofozoítasforam obtidos
a vida do parasita. O conhecimento da composição
por cultura dos cistos, purificados, em Meio TYI-S-33,
Revista PIBIC, v. 2, p. 45-54, 2005
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Sheila Rovagnoli Vieira da Silva
(KEISTER, 1983). Oscistospurificadosforam transferidos
de papel celofane à temperatura ambiente, sobre placa
para tubo estéril com tampa de rosca, contendo o meio
de vidro. Após identificação do perfil protéico, foram
suplementado em volume suficiente para completar 90-
selecionadas amostras com mesmo perfil antigênico e
95% da capacidade do tubo. As culturasforam mantidas
utilizadas para reação de “immunoblot”, em suporte
a 37ºC na posição horizontal com ângulo de 5º. O
sólido. A transferência foi realizada por 1h à voltagem
material foi examinado diariamente por uma semana, e
constante de 40 V (200 mA), para membrana de
o meio de cultura, suplementado com antibióticos e
nitrocelulose, segundo Towbin et al. (1979), e a eficiência
antifúngicos trocado, para eliminação de fungos e
verificada corando-se a membrana com solução
bactérias contaminantes.
Ponceau-S 0,1% em 10% de ácido acético. Os pesos
As culturas que apresentaram trofozoítas aderidos à
parede foram utilizadas para extração protéica. Os
trofozoítas foram lavados em PBS e ressuspensos em
48
moleculares foram marcados com tinta e a membrana
lavada com água bidestilada para retirar o excesso do
corante.
sol ução tampão de Laemml i (1970). Após
A detecção imunoenzimáti ca das proteínas
homogeneização a suspensão foi mantida a -20ºC até o
recombinantes foi realizada sobre tiras de 1 cm da
momento de uso. A dosagem protéica foi realizada
membrana. Astirasforam bloqueadaspor 1 h em solução
utilizando-se curva de controle com BSA em reagente
PBS-leite 5% e, então, incubadas durante a noite toda a
Comassie plus (BioRad), diluído 1:5, e a leitura realizada
4ºC com o anticorpo policlonal (pool constituído por 1
em espectrofotômetro de luz em 620nm. Antes de ser
gota de 25ml do soro de 10 pacientes, com resultado
aplicado ao gel o extrato foi levado à fervura por 5min
positivo para Giardia) diluído em PBS-leite 5%. Após a
e resfriando imediatamente no gelo. Aplicou-se ao gel
incubação, astirasforam lavadaspara retirada do excesso
5 mðg de proteínas para verificação do perfil protéico.
de anticorpo e incubadas por mais 1 h com anti-IgG,
O material foi separado por eletroforese em gel de
anti-IgA ou anti-IgM conjugados à peroxidase, na
poliacrilamida 10% com SDS (SDS-PAGE). Omarcador
concentração de 1:100. Depois de retirado todo o
padrão de peso molecular de proteínas utilizado foi o
excesso de conjugado com novas lavagens em PBS-leite
SIGMA (MW-SDS 6H). A corrida foi realizada a 100 V
5%, as tiras foram reveladas por incubação em 30ml de
por 45 minutos, com tampão de corrida para SDS-PAGE
PBS/DAB 0,5mg na presença de H2O2, lavadas em água
e abortada quando a migração do azul de bromofenol
bidestilada, secasà temperatura ambientee analisadas.
atingia a parte inferior do gel de resolução.
Após eletroforese o gel foi corado com “Comassieblue” 2%, por 2 horas com agitação, à temperatura
ambiente e descorado com solução descorante, durante
30 minutos, e com troca da solução váriasvezes. Quando
3 Resultados
Exame protoparasitológico das amostras de fezes
da população pediátrica das creches de Osasco-SP: foi
analisado material fecal de 246 crianças matriculadas
nas creches Alzira Silva Medeiros, localizada na Av.
era possível identificar as bandas protéicas, o gel era
Bandeirantes, nº 08 – Jardim Aliança e na creche Silvia
embebido em solução com glicerol e seco entre folhas
Farah, localizada na Rua Palestina, nº 40 – Jardim
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Análise do perfil protéico em giardia lamblia e
pesquisa de anticorpos anti-giardia na população
pediátrica das creches municipais de Osasco-SP
Munhoz, ambas pertencentes ao município de Osasco-
lumbricoides, T. trichiura, E. histolytica, C. parvum, H.
SP.
nana e C. cayetanensis sendo E. coli o comensal
Oexame microscroscópico de 256 amostras revelou
intestinal mais freqüente (dados não mostrados).
que 63 (24,60%) eram positivas para parasitas
Solicitamossegunda amostra do material fecal para todas
patogênicos ou não, sendo que 36 (14,06%) eram
as crianças que apresentaram resultado negativo no
positivas para G. lamblia e foram encontrados apenas
primeiro exame. Todososresultadosforam encaminhados
cistosnessasamostras(Tab.1). Além de Giardia, osoutros
à Secretaria deSaúde deOsasco. Ascriançascom resultado
parasi tas pat ogêni cos encont rados f oram A .
positivo foram submetidasa tratamento antiparasitário.
Tabela 1 - Prevalência de parasitas encontrados nas amostras de fezes da população pediátrica de duas creches do município
de Osasco-SP, agosto de 2003 a maio de 2004.
Cultura axênica de G. lamblia para obtenção de
para membrana e realização de “immunobloting”. Os
trofozoítas: das 36 amostras de cistos de Giardia
resultados do fracionamento dos extratos antígenos de
inoculadas apenas 27 resultaram positi vas para
G. lamblia estão ilustrados na figura 1.
trofozoítas, e foram separadas para preparo do extrato
protéico. SDS-PAGE realizado sob condições não
redutoras. A maioria dos extratos apresentou proteínas
Análise de “immunoblot”: Anticorpos IgA, IgG e
IgM de pacientescom resultado negativo não reconheceu
entre 116 e 14 kDa. Após análise verificamos que várias
nenhuma molécula antigênica do parasita (fig. 2, painel
amostras demonstravam o mesmo perfil (amostras 1, 2,
A). Bandas de aproximadamente 30 kDa, com igual
4, 5, 7 e 10). Fizemos um pool dessas amostras e
intensidade, foram reconhecidas pelos anticorpos do
aplicamos em outro gel a fim de fazer transferência
tipo IgA e IgG (fig. 2, painel B).
Figura 1 – Gel de acrilamida a 10% (SDS-PAGE) mostrando o fracionamento protéico de diferentes extratos antigênicos de
trofozoítas de Giardia lamblia. Linhas 1 a 27: fracionamento de diferentes amostras de extrato protéico; PM: Marcador de
peso molecular.
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Figura 2 – Teste de Immunoblotting em soros positivos e negativos para giardíase. Painel A: pool de soros negativos; Painel
B: pool de soros positivos; Verificou-se que os anticorpos presentes nos soros de pacientes com giardíase, reagiram em uma
banda de aproximadamente 30kDa com anti-IgA e anti-IgG humanos.
fonte de anticorpos anti-giárdia do tipo IgA, IgG e IgM.
4 Discussão
Muitos trabalhos têm mostrado porcentagens
significantes da infecção por Giardia entre crianças de
50
creches (GUIMARÃES; SOGAYAR, 1995, apud
GUIMARÃES; SOGAYAR, 2002; GOLDIN et al., 1990,
KEYSTONE et al ., 1978, apud FAUBERT, 2000;
PICKERING et al., 1984). No Brasil, Torres et al. (1991)
demonstraram que 32,8% das crianças entre 0 e 6 anos,
freqüentadoras de creches municipais em São Paulo,
eram portadoras de G. lamblia.
As amostras foram anal i sadas pel o método de
“immunoblot”, que de acordo com Rosales-Borjas et al.
(1998) é altamente sensível, e permite verificar a
importância dos epítopos antigênicos deste protozoário
na indução da resposta humoral durante a infecção. No
entanto é difícil avaliar a sensibilidade, já que este
método foi usado somente por alguns laboratórios e
executado em um número limitado de indivíduos com
casos provados de giardíase. Em nosso caso, o padrão
da reatividade encontrada foi diferente daquele
Em nosso estudo 14,06% do total de crianças
demonstrado por Soliman et al. (1998), que encontrou
analisadas apresentaram resultado positivo para este
o reconhecimento de várias moléculas distintas do
parasita. Acreditamos que a variação no número
parasita com tamanhos entre 113 e 18 kDa.
encontrado se deva às vari ações nos métodos
empregados, ao número de amostras analisadas e às
Considerando a variedade dos antígenos que
condições socioeconômicas a que as crianças estão
estimulam o sistema imune de um paciente infectado, é
expostas. Os dados aqui apresentados representam a
surpreendente que o ensaio tenha sido incapaz de
primeira tentativa de se caracterizar o perfil protéico e
detectar anticorpos em todas as amostras com casos
de anticorpos, induzidos pelas cepas de G. lamblia em
provados de giardíase. Entretanto, a sensibilidade dos
crianças com infecção natural, residentes no município
ensaios pode aumentar, caso as proteínas purificadas de
de Osasco. O soro dessas crianças foi utilizado como
Giardia sejam usadas como antígenos, ao invés de usar
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Análise do perfil protéico em giardia lamblia e
pesquisa de anticorpos anti-giardia na população
pediátrica das creches municipais de Osasco-SP
o extrato total como foi o nosso caso. Outros autores
do leite da população mexicana mas em somente 15%
identificaram diversos antígenos fortemente reativos
de amostras do leite da população do Texas (MIOTTI et
cuj as massas moleculares variam imensamente
al., 1985 apud FAUBERT, 2000). Estes resultados
(FAUBERT, 2000). Exames realizados em amostras de
destacam a diferença na resposta imune a Giardia entre
saliva de pacientes com giardíase mostraram 24 faixas
pacientes infectados nas áreas de infecção endêmica e
do antígeno, com a massa molecular variando entre 14
outras áreas.
e 170 kDa (ROSALES-BORJAS et al., 1998). O nível de
anticorpos circulantes anti-giardia tipo IgG, IgM, e IgA
foi comparado entre as pessoas infectadas em Denver,
Coloroado e em Soongnern, Tailândia (JANOFF et al.,
1990 apud FAUBERT, 2000). Os níveis de anticorpos
detectados por ELISA aumentaram significativamente
durante a infância em ambas as áreas geográficas. Os
níveisanticorposanti-giardia do tipo IgA permaneceram
elevados durante toda a vida entre adultos da Tailândia,
mas diminuídos entre adultos em Denver. Por outro
lado, em adolescentes, anticorpos anti-giardia do tipo
O resultado da infecção e da resposta humoral por
anticorpos nos seres humanos pode também variar
dependendo da cepa. Para ilustrar citamos a inoculação
entérica em voluntários saudávei s, com 50.000
trofozoítas de duascepasdistintas com padrõesdistintos
de endonuclease, tamanho do DNA, antígenos de
superfície, e produtos de excreção, o que levou a uma
variedade dosresultados(NASH et al., 1987). A primeira
cepa (Isr) não produziu infecção em voluntários
saudáveis, enquanto os pacientes inoculados com a
segunda cepa (GS/M) desenvolveram uma variedade de
IgM caíram com o avanço da idade em ambas as
sintomas. Os níveis de IgM, de IgG, e de IgA no sangue
populações. Baseado nestes encontros, os autores
e osníveisde IgA no líquido intestinal foram encontrados
concluíram que osníveis de IgM anti-giardia em adultos
em 100, 70, 60, e 50%, respectivamente, nos indivíduos
podem ser úteis caso se deseje diferenciar entre infecção
infectados com a cepa GS/M (NASH et al., 1987).
recente e passada (JANOFF et al, 1990 apud FAUBERT,
Nenhum anticorpo foi detectado em indi víduos
2000).
saudáveis, infectados com a cepa Isr.
Determinando os níveis de anticorpos sistêmicos e
Este estudo mostra não somente variações na
locais de giardia em populações diferentes, respostas
patogenicidade provocada por diferentes cepas de
imunes diferentes em pacientes infectados foram
Giardia nos seres humanos, mas ilustra também as
reconhecidas extensamente (MIOTTI et al., 1985 apud
variações na resposta imune ao estimulo. Com respeito
FAUBERT, 2000). Diversasamostras de sangue e de leite
à infecção experimental em indivíduos saudáveis Nash
foram coletadassimultaneamente em mulhereslactantes
et al., 1987, demonstram a pouca sensibilidade das
no Texas e México. Anticorpos específicos IgG anti-
amostras sorológicas disponíveis para o diagnóstico da
giardia foram detectados em 77% de 153 amostras do
giardíase. Há diversas razões para explicar a pouca
sangue nas mães mexicanas, mas somente 24% de 214
sensibilidade das amostras sorológicas. (i) Os isolados
amostras do sangue das mães do Texas. Os anticorpos
geográficos identificados podem ter sua própria
secretores de IgA foram detectados em 79% de amostras
identidade antigênica (ISSAAC-RENTON et al., 1994 apud
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Sheila Rovagnoli Vieira da Silva
FAUBERT, 2000). (ii) A infecção pode tornar-se crônica
e o parasita interferir com o sistema imune, conduzindo
a imunodepressão, e esta pode afetar o nível dos
anticorpos produzidos. (iii) A variação antigênica pode
Nesse trabalho nós analisamos a resposta imune
durante a infecção por G. lamblia em frações protéicas
do parasita. Para tanto utilizamos amostras de fezes e
interferir na produção dos anticorpos. (iv) Muitos casos
sangue da população pediátrica das creches de Osasco.
humanos de giardíase nunca alcançam o estágio agudo
Foram obtidas 27 amostras de trofozoítas de G. lamblia,
da infecção, e o tipo de resposta imune estimulada nestes
pelo cultivo dos cistos encontrados nas fezes. Esses
pacientes são desconhecidos.
trofozoítas foram processados para obtenção do extrato
À exceção dos níveis diferentes dos anticorpos
detectados, os ensaios sorodiagnósticos não mostraram
52
5 Conclusão
de proteínas. O perfil protéico do protozoário intestinal
G. lamblia foi caracterizado SDS-PAGE em condições
não redutoras. A discriminação dasproteínas do parasita
diferenças em respostas do anticorpo do soro entre
reconhecidas pelo sistema imune foi realizada pela
pacientes sintomáticos e assintomáticos. Desde que os
reação de “immunoblot” com anticorpos efetores (IgA),
trofozoítas de Giardia invadem raramente os tecidos, a
anticorpos da fase aguda (IgM) e anticorpos de memória
resposta i mune sistêmica praticamente nunca é
(IgG). Os resultados mostraram que o uso dessa técnica
estimulada, e a procura por anticorpos de Giardia no
com anticorpos circulantes (oriundos de sangue, obtido
sangue é difícil. Demonstrou-se que IgA secretora tem
por punção digital) não é eficaz para a realização de
um papel importante na imunidade à infecção, podendo
afetar a eliminação do parasita do intestino. Por outro lado,
testes sorológicos na triagem parasitológica, específica
para giardíase.
JoneseBrowm (1974) não encontraram nenhumadiferença
As amostras de cistos de G. lamblia inoculadas em
em níveissecretoresou sangue-específico de anticorpos
meio TYI-S-33 apresentou resultadospouco satisfatórios,
de IgA entre pacientes hipogamaglobulinêmicos com
uma vez que as culturas não produziam trofozoítas em
giardíase em um grupo de controle. Pacientes com AIDS
com contagem baixa de célula T CD4+ não têm os
episódios diarréicos persistentes ou severos (JANOFF
et al., 1988 apud FAUBERT, 2000). Estes resultados
surpreendem, uma vez que o modelo da doença no rato,
abundância, como descritosna literatura analisada. Desta
forma, acreditamos ser necessário fazermos adaptações
para nossa realidade, as quais já estão sendo estudadas
e i mpl antadas no l aborat óri o. Bandas de
aproximadamente 30 kDa, com igual intensidade, foram
reconhecidas pelos anticorpos do tipo IgA e IgG. O
as células de T CD4+ e outros subconjuntos de células-
padrão da reatividade encontrada foi diferente daquele
T têm um papel na eliminação do parasita do intestino
demonstrado por Soliman et al., (1998) que encontrou o
(VINAYAK et al., 1991; ROBERTS-THONSON; MITCHELL,
reconhecimento de várias moléculas distintas do parasita
1978; STEVENS et al., 1978 apud FAUBERT, 2000).
com tamanhosentre 113 e 18 kDa.
Revista PIBIC, v. 2, p. 45-54, 2005
Análise do perfil protéico em giardia lamblia e
pesquisa de anticorpos anti-giardia na população
pediátrica das creches municipais de Osasco-SP
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