JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258.
Evaluación de recuento de células somáticas, prueba de
California Mastitis y composición química de leche de cabra
Avaliação da contagem de células somáticas, California Mastitis
Test e constituintes químicos de leite de cabra
Evaluation of somatic cells counts, California Mastitis Test and
chemical constituents of goat's milk
Márcio Manhães Folly1*, Gina Nunes Teixeira 1, Leonardo Serafim2,
Carlos Eurico Travassos1, Luis Bernabe Castillo3
Resumen
La leche de cabra tiene nutrientes que se recomiendan para personas que
sufren de problemas digestivos o reacciones a la leche de vaca. El
seguimiento del recuento de células somáticas (RCS) y su relación con los
componentes químicos de la leche son parámetros que deben seguirse en
la evaluación de la calidad de la leche de cabra. Se encontró una
correlación mensual entre la grasa, proteína, lactosa y sólidos de leche de
cabra con RCS abajo y arriba de 1,0 x 106 células / ml en una finca de
creación de cabra en la Región Norte de Río de Janeiro, por un período de
un año. Se recogieron 336 muestras de leche de cabra de un año. Un
estudio bacteriológico se realizó en 71 muestras donde se determinaron
RCS arriba de 1,0 x 10
RCS 1,0 x 10
6
6
células / ml. Se demostró que valores arriba de
células / ml en la leche de cabra no causó diferencias
significativas en proteínas, grasa, lactosa y sólidos. La prueba del CMT no
ha
dado
buenos
resultados
en
comparación
con
el
RCS.
El
Staphylococcus coagulasa negativo (49 muestras), fue la colonia de
bacterias aislada en mayor porcentaje. Llegamos a la conclusión de que el
CMT, con una o dos cruces, en comparación con el RCS presenta
1
Laboratório de Sanidade Animal, CCTA, Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro.
* E-mail: [email protected]
2
Laboratório de Morfologia e Patologia, CCTA, Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy
Ribeiro.
3
Médico veterinário autônomo.
247
JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258.
resultados dudosos que lleva a falsas interpretaciones positivas sobre la
presencia de infección en los senos de la cabra, aunque la mayor fiabilidad
es cuando el CMT presenta tres cruces. Valores altos de RCS en la leche
de cabra no interfiere en los índices cuantitativos de los componentes
químicos.
Palabras-clave: células somáticas, grasa, proteína, lactosa, leche, cabra
Resumo
O leite de cabra tem nutrientes recomendados para pessoas que sofrem de
problemas digestivos ou que apresentam reações ao leite de vaca. O
monitoramento da contagem de células somáticas (CCS) e sua relação
com os componentes químicos do leite são parâmetros que devem ser
seguidos na avaliação da qualidade do leite caprino. Foram coletadas 336
amostras de leite de cabra durante um ano em um capril da região Norte
do Estado do Rio de Janeiro. Verificou-se a correlação mensal entre os
teores de gordura, proteína, lactose e extrato seco do leite com CCS
abaixo e acima de 1,0 x 10
6
céls/mL. Um estudo bacteriológico foi
realizado em 71 amostras, das quais foram determinadas a CCS acima de
1,0 x 10
6
céls/mL. Foi demonstrado que uma CCS acima de 1,0 x 10
6
céls/mL no leite de cabra não causou diferenças significativas nos teores
de proteína, gordura, lactose e extrato seco. O teste de CMT não
demonstrou
bons
resultados
quando
comparado
com
a
CCS.
Staphylococcus coagulase negativa (49 amostras) foi a bactéria mais
isolada. Conclui-se que o teste de CMT, com uma e duas cruzes, quando
comparado com a CCS apresenta resultados dúbios levando a
interpretações de falsos positivos em relação à presença de infecção
mamária, porém há maior confiabilidade quando o CMT apresenta três
cruzes. A alta CCS do leite de cabra não interfere nos índices qualitativos
dos componentes químicos.
Palavras-chave: células somáticas, gordura, proteína, lactose, leite, cabra.
Abstract
Goat milk has nutrients that are recommended for people suffering from
digestive problems or have reactions to cow's milk. The monitoring of
somatic cell count (SCC) and its relationship with the chemical components
248
JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258.
of milk are parameters that must be followed in assessing the quality of
goat milk. In this study, a correlation between fat, protein, lactose and goatmilk-solids with SCC below and above 1.0X106 cels/ml were showed in the
Northern Region of the State of Rio de Janeiro. 336 samples of goat milk
were collected for one year. A bacteriological study was performed in 71
milk samples with SCC above 1.0X106 cels/ml. It was demonstrated that a
CCS above 1.0X106 cels/ml in goat milk did not cause significant
differences in protein, fat, lactose and solids. The CMT has not shown
good results when compared with SCC. Staphylococcus coagulase
negative (49 samples) bacteria were isolated. In conclusion the CMT, with
one or two crosses, compared with the SCC, presents mixed results
leading to false positive interpretations, although the highest reliability when
CMT presents three crosses. High SCC of goat milk does not interfere with
quantitative
indices
of
the
chemical
components.
Keywords: somatic cells, fat, protein, lactose, milk, goat.
ejemplo:
Introducción
la
raza,
estado
de
lactancia, el clima, la estación y la
La leche de cabra tiene un
alto valor nutricional y por su alta
digestibilidad puede ser adecuado
1
para niños, ancianos y debilitados .
La
mejora
caprinos,
producción
en
el
la
creación
aumento
de
leche
de
de
la
y
el
mejoramiento de razas de cabras
lecheras, ha dando lugar a una
acción combinada de estos mismos
factores
en
las
condiciones
ambientales de cada país2. Las
propiedades
también
se
físico-químicas
modifican
con
la
mastitis, determinando inclusive, la
disminución de la producción y
estableciendo limitaciones para el
uso de la leche3.
necesidad de mejorar la calidad de
la leche y sus derivados.
El
recuento
de
células
somáticas (SCC) de la leche de
La composición de la leche
de
cabra
es
muy
variable
dependiendo de varios factores, por
cabra es mucho más alto que el
SCC de leche de vaca. Aunque se
reconoce que el aumento del SCC
249
JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258.
en la leche de vaca, resulta en la
a las células somáticas de la leche
disminución en la producción, no
de cabra.
hay evidencia de que esto ocurre en
Las
la producción de leche de cabra.
Con relación al recuento de células
somáticas, es diferente entre cabras
y vacas. En general, el SCC en
leche de la cabra libre de infección
en el ubre, puede variar entre 5,0 x
105 a 4,0 x 106 células/ml4. Ya Zeng
y Escobar, 19955, informan de que
un SCC de 1.0 x 106 células/ml se
puede considerar como límite de
calidad jurídica de la leche de cabra
en los Estados Unidos. En un
estudio de 380 cabras, se concluyó
que
las
cabras
sin
mastitis,
procedentes de granjas con buenas
prácticas de gestión, a menudo
tiene CCS arriba o abajo de 1,0 x
106
células/ml6.
Las
citoplásmicas
se
partículas
encuentran
comúnmente en la leche de cabra y
puede ser contado erróneamente
como las células somáticas, por
eso, sólo los procedimientos de
recuento específicos para el ADN
puede ser utilizado para el SCC de
leche cabras
4,7
. Estos estudios
muestran que hay conclusiones que
propiedades
físico-
químicas de la leche de cabra
puede
ser
modificado
por
la
mastitis, determinando inclusive, la
disminución de la producción y el
establecimiento de limitaciones para
la
utilización
de
leche3.
la
Schaellibaum 20008, informa que el
aumento de la cantidad de células
causada por la mastitis resulta en
una serie de eventos que causan
cambios en los tres principales
componentes de la leche (grasa,
proteína
y
lactosa)
y
otros
componentes más pequeños, como
las enzimas y minerales. Estos
cambios se producen debido a una
lesión a las células del tejido
secretor de la ubre, lo que reduce la
síntesis
de
componentes
sintetizados en la glándula mamaria
(como la lactosa y la grasa) y el
cambio en la permeabilidad de la
membrana
(barrera
sanguínea),
resultando
lactoen
el
aumento del paso de componentes
de la sangre a la leche.
difieren entre los autores en relación
250
JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258.
El objetivo de este trabajo fue
alimentación
se
basó
alimento
entre la grasa, proteína, lactosa y
respetando
sólidos de leche de cabra con SCC
intensivo.
inferiores y superiores de 1,0 x106
obtuvieron muestras de los dos
células/ml en la leche de una
pezones de cada cabra, con un total
granja, con la realización de un
de 28 muestras de leche por mes.
en
paralelo
sobre
evaluación de la prueba de “Mastitis
Test“
(CMT),
tipo
de
De
esta
heno,
manejo
granja
se
la
Para realizar la prueba del
microbiología de la leche y una
California
el
y
un
investigar la correlación mensual
estudio
balanceado
en
en
"California Mastitis Test (CMT) se
recogieron aproximadamente 2 ml
de leche de cada pezón y se añadió
comparación con SCC.
1 ml del reactivo (FATEC, São
Paulo,
Material y métodos
Las
muestras
fueron
recolectadas mensualmente en una
desde
marzo
1999
a
febrero 2000. En total se recogieron
336 muestras de leche de cabra
durante el periodo de la mañana
correspondiente al primer ordeño.
La granja estaba compuesta
por animales de la raza pardaalpina, donde fueron estudiadas 14
cabras en lactación. El ordeño era
manual y se realizó dos veces al
día. Los animales fueron confinados
en jaulas suspendidas y recibían el
sol de la mañana. Las condiciones
higiénicas eran satisfactorias, había
una sala del ordeño separada, la
en
una
bandeja
propia, evaluándose el resultado de
la prueba inmediatamente.
granja de la Región Norte de Río de
Janeiro,
Brasil)
Para la realización de la
prueba
químico
del
SCC
de
la
y
el
análisis
leche,
fueron
recolectadas 50 ml de leche en un
envase
adecuado,
de
plástico,
contiendo el conservante dicromato
de
potasio
Posteriormente,
(K2Cr2O7).
estas
muestras
fueron enviadas al Centro Nacional
de
Investigación
del
Ganado
Lechero (CNPGL) de EMBRAPA,
Juiz de Fora - MG, Brasil. Las
muestras se mantuvieron en la
temperatura de 4 a 8°C, y fueron
examinadas en el máximo de 5-7
días después de su recogida. Las
251
JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258.
muestras fueron analizadas por el
mediante un programa informático
dispositivo
y
SAEG (1997), obteniendo así la
Bentley"
correlación de las células somáticas
para
la
(arriba y abajo de 1 millón de
análisis de células somáticas y las
células) con el contenido de grasa,
concentraciones
los
proteína, lactosa y sólidos de las
componentes químicos de la leche,
muestras de leche recolectadas
grasa, proteína, lactosa y sólidos.
mensualmente.
"2000
"Somacount
Instrumentos
(EE.UU.),
del
300"
de
CNPGL
de
Para el análisis microbiológico se
obtuvieron aproximadamente 5 mL,
Resultados y discusión
en tubos de ensayo estériles, y a
continuación,
colocados
estireno
en
con
inmediatamente
los
tubos
espuma
hielo
al
fueron
de
La búsqueda de la calidad de
la leche se basa en el hecho de que
poli
la leche con bajo recuento de
llevo
células somáticas se asocia con un
laboratorio
mayor ingreso, mayor porcentaje de
y
se
(LSA/UENF), donde se realizaron
grasa y
pruebas microbiológicas de rutina.
rendimiento en los derivados de la
En la análisis estadística fue
realizado la prueba de correlación
leche,
caseína, y un mayor
llevando
a
una
mayor
conservación de los productos y sus
derivados.
Tabla 1. Relación entre la CMT y el SCC de 336 muestras de leche recogida en
una granja desde marzo 1999 a febrero de 2000.
Muestras
CMT (-)
CMT (+)
CMT (++)
SCC < de 1,0 x 106 céls/mL
136(96%)
54(90%)
52(70,3%)
SCC >de 1,0 x 106 céls/mL
06(4%)
06(10%)
22(29,7%)
Total
142(100%)
60(100%) 74(100%)
Los resultados presentados
en la Tabla 1 indican que en la
CMT
(+++)
23(38,3%
)
37(61,7%
)
60(100%)
suma de la granja, el 64% de las
muestras de leche había un SCC
252
JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258.
abajo de 1,0 x 106 células/ml y 36%
Los
resultados
mostrados
de las muestras obtuvieron un SCC
sugieren que el CMT podría ser una
arriba de 1,0 x 106 células/ml. A
prueba de fiabilidad cuando tiene
pesar
la
resultados negativos. Sin embargo,
corrales
al interpretar los resultados con una
resultados
CMT (1+), CMT (2+) o CMT (3+)
concuerdan con las observaciones de
pueden ser resultados dudosos en
de
la
diferencia
administración
de
estudiados,
los
White
y
Hinckley
los
en
9
que
comparación con el SCC. Otro
encontraron resultados similares en
hecho que debe ser considerado es
muestras de leche de cabra de raza
que la secreción de leche, siendo
Saanen y Nubiana, donde el 38,2%
apocrinas en la cabra, resulta en la
de las muestras mostraron SCC
presencia de células que no son los
arriba de 1,0 x106 células/ml. Por otra
leucocitos, son partículas de células
parte, los resultados mostraron que,
en la leche de cabra que puede
de las 142 muestras que tenían CMT
causar un error al leer la SCC. Estas
negativos,
(96%)
partículas citoplásmicas son similares
tenían un SCC abajo de 1,0 x 106
en tamaño a los leucocitos en la
células/ml y sólo 06 muestras (4%)
leche, que miden alrededor de 5 –
136
(1999)
muestras
6
tuvieron una CCS superior a 1,0 x 10
30
células/ml. De las 60 muestras que
apical del epitelio mamario, donde a
tuvieron CMT (3 +), 37 muestras
partir de ahí se origina las micro
(61,7%) tenían una SCC arriba de
vellosidades
1,0 x 106 células/ml y 23 muestras
endoplásmico
(38,3%) tenían un SCC inferior a
partículas no son células, y su
6
y muestran orgánulos en la parte
y
el
áspero.
retículo
Estas
células/ml, ocurriendo en
presencia en la leche no indica un
estas situaciones, la consistencia de
proceso patológico, se considerando
los resultados entre las dos pruebas
productos del proceso de secreción
(CMT y el SCC). Se observa que de
de la leche normal10. A pesar de la
las 74 muestras obtenidas con el
presencia
CMT (2+), 52 muestras (70,3%)
McDougall
tenían un SCC inferior a 1,0 x 106
argumentan que la SCC es el la
células/ml.
mejor prueba para la evaluación de
1,0x10
de
et
estas
partículas,
al.
(2001)11
253
JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258.
la mastitis subclínica en cabras,
infección
porque se detecta el estado de
mamaria.
de
la
glándula
Tabla 2: Las bacterias aisladas a partir de 71 muestras de leche de cabra con
SCC arriba de 1,0 x106 células/ml en el período comprendido entre marzo
1999-febrero 2000.
Muestras
Staphylococcus sp coagulasa positiva
Staphylococcus sp coagulasa negativa
Enterobactérias
Sin crecimiento
Total
La tabla 2 muestra que de 71
muestras
de
leche
de
cabra
Total
6
49
01
14
71
Porcentaje
8,45%
69,02%
1,41%
19,72%
100%
(8,45%),
donde
identifican
como
Estos
ambas
se
Staphylococcus
resultados
son
conseguidas con SCC superior a
aureus.
1,0 x 106 células/ml, se obtuvo
consistentes con el trabajo de White
crecimiento
E.C y Hincley L.S.9 que observaron
bacteriano
en
56
muestras (79%), principalmente por
una
Staphylococcus coagulasa negativo
Staphylococcus
sp, con 49 muestras aisladas (69,02%)
negativos sp en casos de mastitis
y coagulasa positivo con 6 muestras
subclínica
mayor
prevalecía
de
coagulasa
en
cabras.
254
JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258.
Tabla 3: Correlación mensual entre el SCC superior a 1,0 x106 células/ml y la
concentración de componentes químicos de la leche de cabra en la granja, a
partir de marzo 1999 a febrero de 2000.
Mes
Marzo
Abril
Mayo
Junio
Julio
Agosto
Setiembre
Octubre
Noviembre
Diciembre
Enero
Febrero
Variable
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
CCS
Variable
G
P
L
ES
G
P
L
ES
G
P
L
ES
G
P
L
ES
G
P
L
ES
G
P
L
ES
G
P
L
ES
G
P
L
ES
G
P
L
ES
G
P
L
ES
G
P
L
ES
G
P
L
ES
Observacione
s 11
11
11
11
03
03
03
03
05
05
05
05
10
10
10
10
04
04
04
04
04
04
04
04
10
10
10
10
02
02
02
02
05
05
05
05
07
07
07
07
06
06
06
06
04
04
04
04
Correlación
-0,4940
0,1745
0,1537
-0,0627
-0,4809
0,1541
-0,0757
-0,0760
-0,7872
-0,8931
0,6764
-0,7291
0,4549
0,6302
-0,7442
0,4750
0,6971
0,9799
-0,9768
0,6448
0,8494
0,8819
-0,2485
0,8299
-0,1693
-0,0206
-0,1291
-0,1721
0,0147
-0,2503
-0,1301
-0,1484
0,1429
-0,3288
-0,3949
0,6490
-0,0832
0,0452
-0,5605
-0,1361
-0,7919
-0,8920
0,5291
-0,9040
0,5632
0,5397
-0,6422
0,4082
Significancía
0,0612
0,3039
0,3259
0,4273
0,6786
0,2708
0,4231
0,3822
0,0570
*0,0207
0,1050
0,0811
0,1287
*0,0470
*0,0171
0,1171
0,2545
0,0639
0,0687
0,2770
0,0753
0,0591
0,3758
0,0850
0,3201
0,4775
0,3612
0,3173
0,4716
0,1088
0,2632
0,2347
0,2739
0,2132
0,1665
*0,0408
0,4296
0,4617
0,0953
0,3855
*0,0302
*0,0084
*0,0067
*0,0067
0,2184
0,2302
0,1789
0,2959
255
JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258.
Leyenda: SCC – Recuento de células somáticas. G – Contenido de grasa. L – El contenido de
lactosa. ES – El contenido de sólidos. P – El contenido de proteína. N = 71 muestras.
*Significativo al 5% de probabilidad (p <0,05).
En
la
demostrado
tabla
3
se
que
no
ha
correlación significativa de grasa y
hubo
proteína en la leche de cabra con
10 6
correlación significativa mensual en
SCC
el nivel de 5% de probabilidad (p
células/ml. Pero, Lima Junior et
<0,05) entre SCC inferior a 1,0 x106
al. (1994) 13 no encontró ninguna
células/ml y la concentración de los
variación de concentración en el
componentes químicos de la leche
porcentaje
en la granja en estudio. Tuvo
muestras de leche de cabra de
uniformidad en las correlaciones
animales con o sin infección
mensuales de la SCC superiores a
inducida experimentalmente.
superior
de
a
1,0
x
grasa
en
las
1,0 x 106 células/ml. En el SCC
Se concluye que la prueba
inferior a 1,0 x 106 células/ml no
hubo
ninguna
significativa
correlación
entre
SCC
concentraciones
y
de
las
los
componentes químicos de la leche
de cabra. Barros y Leitão (1992)3,
describen que la lactosa puede
aparecer disminuida en la leche de
cabra de animales con mastitis, lo
que sugiere un vínculo entre la
enfermedad y el contenido de lactosa.
Las observaciones correspondientes a
la grasa y proteínas en este trabajo
no
están
estudios
(1986)12,
de
de
acuerdo
Park
que
y
con
los
Humphrey
mostraron
una
de
CMT
puede
resultados
presentar
dudosos
comparación
con
en
SCC.
Las
principales bacterias aisladas de
leche de cabra con altos índices
de
células
somáticas
Staphylococcus
sp.
son
los
coagulasa
negativo. Durante el período de
estudio se verificó que el aumento
de las células somáticas en leche
de
cabra
no
interfirió
en
la
proteína, grasa, lactosa y sólidos,
pero se produjo un cambio en el
contenido de lactosa en uno de
los corrales.
256
JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258.
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Recebido em: Maio de 2010
Aceito em: Março de 2011
Publicado em: Junho de 2011
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247 Evaluación de recuento de células somáticas, prueba