JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258. Evaluación de recuento de células somáticas, prueba de California Mastitis y composición química de leche de cabra Avaliação da contagem de células somáticas, California Mastitis Test e constituintes químicos de leite de cabra Evaluation of somatic cells counts, California Mastitis Test and chemical constituents of goat's milk Márcio Manhães Folly1*, Gina Nunes Teixeira 1, Leonardo Serafim2, Carlos Eurico Travassos1, Luis Bernabe Castillo3 Resumen La leche de cabra tiene nutrientes que se recomiendan para personas que sufren de problemas digestivos o reacciones a la leche de vaca. El seguimiento del recuento de células somáticas (RCS) y su relación con los componentes químicos de la leche son parámetros que deben seguirse en la evaluación de la calidad de la leche de cabra. Se encontró una correlación mensual entre la grasa, proteína, lactosa y sólidos de leche de cabra con RCS abajo y arriba de 1,0 x 106 células / ml en una finca de creación de cabra en la Región Norte de Río de Janeiro, por un período de un año. Se recogieron 336 muestras de leche de cabra de un año. Un estudio bacteriológico se realizó en 71 muestras donde se determinaron RCS arriba de 1,0 x 10 RCS 1,0 x 10 6 6 células / ml. Se demostró que valores arriba de células / ml en la leche de cabra no causó diferencias significativas en proteínas, grasa, lactosa y sólidos. La prueba del CMT no ha dado buenos resultados en comparación con el RCS. El Staphylococcus coagulasa negativo (49 muestras), fue la colonia de bacterias aislada en mayor porcentaje. Llegamos a la conclusión de que el CMT, con una o dos cruces, en comparación con el RCS presenta 1 Laboratório de Sanidade Animal, CCTA, Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro. * E-mail: [email protected] 2 Laboratório de Morfologia e Patologia, CCTA, Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro. 3 Médico veterinário autônomo. 247 JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258. resultados dudosos que lleva a falsas interpretaciones positivas sobre la presencia de infección en los senos de la cabra, aunque la mayor fiabilidad es cuando el CMT presenta tres cruces. Valores altos de RCS en la leche de cabra no interfiere en los índices cuantitativos de los componentes químicos. Palabras-clave: células somáticas, grasa, proteína, lactosa, leche, cabra Resumo O leite de cabra tem nutrientes recomendados para pessoas que sofrem de problemas digestivos ou que apresentam reações ao leite de vaca. O monitoramento da contagem de células somáticas (CCS) e sua relação com os componentes químicos do leite são parâmetros que devem ser seguidos na avaliação da qualidade do leite caprino. Foram coletadas 336 amostras de leite de cabra durante um ano em um capril da região Norte do Estado do Rio de Janeiro. Verificou-se a correlação mensal entre os teores de gordura, proteína, lactose e extrato seco do leite com CCS abaixo e acima de 1,0 x 10 6 céls/mL. Um estudo bacteriológico foi realizado em 71 amostras, das quais foram determinadas a CCS acima de 1,0 x 10 6 céls/mL. Foi demonstrado que uma CCS acima de 1,0 x 10 6 céls/mL no leite de cabra não causou diferenças significativas nos teores de proteína, gordura, lactose e extrato seco. O teste de CMT não demonstrou bons resultados quando comparado com a CCS. Staphylococcus coagulase negativa (49 amostras) foi a bactéria mais isolada. Conclui-se que o teste de CMT, com uma e duas cruzes, quando comparado com a CCS apresenta resultados dúbios levando a interpretações de falsos positivos em relação à presença de infecção mamária, porém há maior confiabilidade quando o CMT apresenta três cruzes. A alta CCS do leite de cabra não interfere nos índices qualitativos dos componentes químicos. Palavras-chave: células somáticas, gordura, proteína, lactose, leite, cabra. Abstract Goat milk has nutrients that are recommended for people suffering from digestive problems or have reactions to cow's milk. The monitoring of somatic cell count (SCC) and its relationship with the chemical components 248 JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258. of milk are parameters that must be followed in assessing the quality of goat milk. In this study, a correlation between fat, protein, lactose and goatmilk-solids with SCC below and above 1.0X106 cels/ml were showed in the Northern Region of the State of Rio de Janeiro. 336 samples of goat milk were collected for one year. A bacteriological study was performed in 71 milk samples with SCC above 1.0X106 cels/ml. It was demonstrated that a CCS above 1.0X106 cels/ml in goat milk did not cause significant differences in protein, fat, lactose and solids. The CMT has not shown good results when compared with SCC. Staphylococcus coagulase negative (49 samples) bacteria were isolated. In conclusion the CMT, with one or two crosses, compared with the SCC, presents mixed results leading to false positive interpretations, although the highest reliability when CMT presents three crosses. High SCC of goat milk does not interfere with quantitative indices of the chemical components. Keywords: somatic cells, fat, protein, lactose, milk, goat. ejemplo: Introducción la raza, estado de lactancia, el clima, la estación y la La leche de cabra tiene un alto valor nutricional y por su alta digestibilidad puede ser adecuado 1 para niños, ancianos y debilitados . La mejora caprinos, producción en el la creación aumento de leche de de la y el mejoramiento de razas de cabras lecheras, ha dando lugar a una acción combinada de estos mismos factores en las condiciones ambientales de cada país2. Las propiedades también se físico-químicas modifican con la mastitis, determinando inclusive, la disminución de la producción y estableciendo limitaciones para el uso de la leche3. necesidad de mejorar la calidad de la leche y sus derivados. El recuento de células somáticas (SCC) de la leche de La composición de la leche de cabra es muy variable dependiendo de varios factores, por cabra es mucho más alto que el SCC de leche de vaca. Aunque se reconoce que el aumento del SCC 249 JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258. en la leche de vaca, resulta en la a las células somáticas de la leche disminución en la producción, no de cabra. hay evidencia de que esto ocurre en Las la producción de leche de cabra. Con relación al recuento de células somáticas, es diferente entre cabras y vacas. En general, el SCC en leche de la cabra libre de infección en el ubre, puede variar entre 5,0 x 105 a 4,0 x 106 células/ml4. Ya Zeng y Escobar, 19955, informan de que un SCC de 1.0 x 106 células/ml se puede considerar como límite de calidad jurídica de la leche de cabra en los Estados Unidos. En un estudio de 380 cabras, se concluyó que las cabras sin mastitis, procedentes de granjas con buenas prácticas de gestión, a menudo tiene CCS arriba o abajo de 1,0 x 106 células/ml6. Las citoplásmicas se partículas encuentran comúnmente en la leche de cabra y puede ser contado erróneamente como las células somáticas, por eso, sólo los procedimientos de recuento específicos para el ADN puede ser utilizado para el SCC de leche cabras 4,7 . Estos estudios muestran que hay conclusiones que propiedades físico- químicas de la leche de cabra puede ser modificado por la mastitis, determinando inclusive, la disminución de la producción y el establecimiento de limitaciones para la utilización de leche3. la Schaellibaum 20008, informa que el aumento de la cantidad de células causada por la mastitis resulta en una serie de eventos que causan cambios en los tres principales componentes de la leche (grasa, proteína y lactosa) y otros componentes más pequeños, como las enzimas y minerales. Estos cambios se producen debido a una lesión a las células del tejido secretor de la ubre, lo que reduce la síntesis de componentes sintetizados en la glándula mamaria (como la lactosa y la grasa) y el cambio en la permeabilidad de la membrana (barrera sanguínea), resultando lactoen el aumento del paso de componentes de la sangre a la leche. difieren entre los autores en relación 250 JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258. El objetivo de este trabajo fue alimentación se basó alimento entre la grasa, proteína, lactosa y respetando sólidos de leche de cabra con SCC intensivo. inferiores y superiores de 1,0 x106 obtuvieron muestras de los dos células/ml en la leche de una pezones de cada cabra, con un total granja, con la realización de un de 28 muestras de leche por mes. en paralelo sobre evaluación de la prueba de “Mastitis Test“ (CMT), tipo de De esta heno, manejo granja se la Para realizar la prueba del microbiología de la leche y una California el y un investigar la correlación mensual estudio balanceado en en "California Mastitis Test (CMT) se recogieron aproximadamente 2 ml de leche de cada pezón y se añadió comparación con SCC. 1 ml del reactivo (FATEC, São Paulo, Material y métodos Las muestras fueron recolectadas mensualmente en una desde marzo 1999 a febrero 2000. En total se recogieron 336 muestras de leche de cabra durante el periodo de la mañana correspondiente al primer ordeño. La granja estaba compuesta por animales de la raza pardaalpina, donde fueron estudiadas 14 cabras en lactación. El ordeño era manual y se realizó dos veces al día. Los animales fueron confinados en jaulas suspendidas y recibían el sol de la mañana. Las condiciones higiénicas eran satisfactorias, había una sala del ordeño separada, la en una bandeja propia, evaluándose el resultado de la prueba inmediatamente. granja de la Región Norte de Río de Janeiro, Brasil) Para la realización de la prueba químico del SCC de la y el análisis leche, fueron recolectadas 50 ml de leche en un envase adecuado, de plástico, contiendo el conservante dicromato de potasio Posteriormente, (K2Cr2O7). estas muestras fueron enviadas al Centro Nacional de Investigación del Ganado Lechero (CNPGL) de EMBRAPA, Juiz de Fora - MG, Brasil. Las muestras se mantuvieron en la temperatura de 4 a 8°C, y fueron examinadas en el máximo de 5-7 días después de su recogida. Las 251 JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258. muestras fueron analizadas por el mediante un programa informático dispositivo y SAEG (1997), obteniendo así la Bentley" correlación de las células somáticas para la (arriba y abajo de 1 millón de análisis de células somáticas y las células) con el contenido de grasa, concentraciones los proteína, lactosa y sólidos de las componentes químicos de la leche, muestras de leche recolectadas grasa, proteína, lactosa y sólidos. mensualmente. "2000 "Somacount Instrumentos (EE.UU.), del 300" de CNPGL de Para el análisis microbiológico se obtuvieron aproximadamente 5 mL, Resultados y discusión en tubos de ensayo estériles, y a continuación, colocados estireno en con inmediatamente los tubos espuma hielo al fueron de La búsqueda de la calidad de la leche se basa en el hecho de que poli la leche con bajo recuento de llevo células somáticas se asocia con un laboratorio mayor ingreso, mayor porcentaje de y se (LSA/UENF), donde se realizaron grasa y pruebas microbiológicas de rutina. rendimiento en los derivados de la En la análisis estadística fue realizado la prueba de correlación leche, caseína, y un mayor llevando a una mayor conservación de los productos y sus derivados. Tabla 1. Relación entre la CMT y el SCC de 336 muestras de leche recogida en una granja desde marzo 1999 a febrero de 2000. Muestras CMT (-) CMT (+) CMT (++) SCC < de 1,0 x 106 céls/mL 136(96%) 54(90%) 52(70,3%) SCC >de 1,0 x 106 céls/mL 06(4%) 06(10%) 22(29,7%) Total 142(100%) 60(100%) 74(100%) Los resultados presentados en la Tabla 1 indican que en la CMT (+++) 23(38,3% ) 37(61,7% ) 60(100%) suma de la granja, el 64% de las muestras de leche había un SCC 252 JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258. abajo de 1,0 x 106 células/ml y 36% Los resultados mostrados de las muestras obtuvieron un SCC sugieren que el CMT podría ser una arriba de 1,0 x 106 células/ml. A prueba de fiabilidad cuando tiene pesar la resultados negativos. Sin embargo, corrales al interpretar los resultados con una resultados CMT (1+), CMT (2+) o CMT (3+) concuerdan con las observaciones de pueden ser resultados dudosos en de la diferencia administración de estudiados, los White y Hinckley los en 9 que comparación con el SCC. Otro encontraron resultados similares en hecho que debe ser considerado es muestras de leche de cabra de raza que la secreción de leche, siendo Saanen y Nubiana, donde el 38,2% apocrinas en la cabra, resulta en la de las muestras mostraron SCC presencia de células que no son los arriba de 1,0 x106 células/ml. Por otra leucocitos, son partículas de células parte, los resultados mostraron que, en la leche de cabra que puede de las 142 muestras que tenían CMT causar un error al leer la SCC. Estas negativos, (96%) partículas citoplásmicas son similares tenían un SCC abajo de 1,0 x 106 en tamaño a los leucocitos en la células/ml y sólo 06 muestras (4%) leche, que miden alrededor de 5 – 136 (1999) muestras 6 tuvieron una CCS superior a 1,0 x 10 30 células/ml. De las 60 muestras que apical del epitelio mamario, donde a tuvieron CMT (3 +), 37 muestras partir de ahí se origina las micro (61,7%) tenían una SCC arriba de vellosidades 1,0 x 106 células/ml y 23 muestras endoplásmico (38,3%) tenían un SCC inferior a partículas no son células, y su 6 y muestran orgánulos en la parte y el áspero. retículo Estas células/ml, ocurriendo en presencia en la leche no indica un estas situaciones, la consistencia de proceso patológico, se considerando los resultados entre las dos pruebas productos del proceso de secreción (CMT y el SCC). Se observa que de de la leche normal10. A pesar de la las 74 muestras obtenidas con el presencia CMT (2+), 52 muestras (70,3%) McDougall tenían un SCC inferior a 1,0 x 106 argumentan que la SCC es el la células/ml. mejor prueba para la evaluación de 1,0x10 de et estas partículas, al. (2001)11 253 JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258. la mastitis subclínica en cabras, infección porque se detecta el estado de mamaria. de la glándula Tabla 2: Las bacterias aisladas a partir de 71 muestras de leche de cabra con SCC arriba de 1,0 x106 células/ml en el período comprendido entre marzo 1999-febrero 2000. Muestras Staphylococcus sp coagulasa positiva Staphylococcus sp coagulasa negativa Enterobactérias Sin crecimiento Total La tabla 2 muestra que de 71 muestras de leche de cabra Total 6 49 01 14 71 Porcentaje 8,45% 69,02% 1,41% 19,72% 100% (8,45%), donde identifican como Estos ambas se Staphylococcus resultados son conseguidas con SCC superior a aureus. 1,0 x 106 células/ml, se obtuvo consistentes con el trabajo de White crecimiento E.C y Hincley L.S.9 que observaron bacteriano en 56 muestras (79%), principalmente por una Staphylococcus coagulasa negativo Staphylococcus sp, con 49 muestras aisladas (69,02%) negativos sp en casos de mastitis y coagulasa positivo con 6 muestras subclínica mayor prevalecía de coagulasa en cabras. 254 JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258. Tabla 3: Correlación mensual entre el SCC superior a 1,0 x106 células/ml y la concentración de componentes químicos de la leche de cabra en la granja, a partir de marzo 1999 a febrero de 2000. Mes Marzo Abril Mayo Junio Julio Agosto Setiembre Octubre Noviembre Diciembre Enero Febrero Variable CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS CCS Variable G P L ES G P L ES G P L ES G P L ES G P L ES G P L ES G P L ES G P L ES G P L ES G P L ES G P L ES G P L ES Observacione s 11 11 11 11 03 03 03 03 05 05 05 05 10 10 10 10 04 04 04 04 04 04 04 04 10 10 10 10 02 02 02 02 05 05 05 05 07 07 07 07 06 06 06 06 04 04 04 04 Correlación -0,4940 0,1745 0,1537 -0,0627 -0,4809 0,1541 -0,0757 -0,0760 -0,7872 -0,8931 0,6764 -0,7291 0,4549 0,6302 -0,7442 0,4750 0,6971 0,9799 -0,9768 0,6448 0,8494 0,8819 -0,2485 0,8299 -0,1693 -0,0206 -0,1291 -0,1721 0,0147 -0,2503 -0,1301 -0,1484 0,1429 -0,3288 -0,3949 0,6490 -0,0832 0,0452 -0,5605 -0,1361 -0,7919 -0,8920 0,5291 -0,9040 0,5632 0,5397 -0,6422 0,4082 Significancía 0,0612 0,3039 0,3259 0,4273 0,6786 0,2708 0,4231 0,3822 0,0570 *0,0207 0,1050 0,0811 0,1287 *0,0470 *0,0171 0,1171 0,2545 0,0639 0,0687 0,2770 0,0753 0,0591 0,3758 0,0850 0,3201 0,4775 0,3612 0,3173 0,4716 0,1088 0,2632 0,2347 0,2739 0,2132 0,1665 *0,0408 0,4296 0,4617 0,0953 0,3855 *0,0302 *0,0084 *0,0067 *0,0067 0,2184 0,2302 0,1789 0,2959 255 JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258. Leyenda: SCC – Recuento de células somáticas. G – Contenido de grasa. L – El contenido de lactosa. ES – El contenido de sólidos. P – El contenido de proteína. N = 71 muestras. *Significativo al 5% de probabilidad (p <0,05). En la demostrado tabla 3 se que no ha correlación significativa de grasa y hubo proteína en la leche de cabra con 10 6 correlación significativa mensual en SCC el nivel de 5% de probabilidad (p células/ml. Pero, Lima Junior et <0,05) entre SCC inferior a 1,0 x106 al. (1994) 13 no encontró ninguna células/ml y la concentración de los variación de concentración en el componentes químicos de la leche porcentaje en la granja en estudio. Tuvo muestras de leche de cabra de uniformidad en las correlaciones animales con o sin infección mensuales de la SCC superiores a inducida experimentalmente. superior de a 1,0 x grasa en las 1,0 x 106 células/ml. En el SCC Se concluye que la prueba inferior a 1,0 x 106 células/ml no hubo ninguna significativa correlación entre SCC concentraciones y de las los componentes químicos de la leche de cabra. Barros y Leitão (1992)3, describen que la lactosa puede aparecer disminuida en la leche de cabra de animales con mastitis, lo que sugiere un vínculo entre la enfermedad y el contenido de lactosa. Las observaciones correspondientes a la grasa y proteínas en este trabajo no están estudios (1986)12, de de acuerdo Park que y con los Humphrey mostraron una de CMT puede resultados presentar dudosos comparación con en SCC. Las principales bacterias aisladas de leche de cabra con altos índices de células somáticas Staphylococcus sp. son los coagulasa negativo. Durante el período de estudio se verificó que el aumento de las células somáticas en leche de cabra no interfirió en la proteína, grasa, lactosa y sólidos, pero se produjo un cambio en el contenido de lactosa en uno de los corrales. 256 JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2011 4 (7): 247 – 258. Referências bibliográficas 1. EGITO AS & PINHEIRO RR (1989). Produção higiênica do leite de cabra. Embrapa – CNPC, Comunicado Técnico 20, 6 p. 2. GUIMARÃES MPMP et al. (1989). Caracterização de alguns componentes celulares e físico-químicos do leite para diagnóstico da mamite caprina. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, 41: 129-142. 3. BARROS GC, LEITÃO CHS (1992). Influência da mastite sobre as características físico-químicas do leite de cabra. Pesquisa Veterinária Brasileira, 12: n.3/4, 45-48. 4. PAAPE MJ, CAPUCO AV (1997). Cellular defense-mechanisms in the udder and lactation of goats. Journal of Animal Science. 75: p.556-565. 5. 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