BIOTECNOLOGIA E ENGENHARIA GENÉTICA DR. ACESSO 2015 BIOTECNOLOGIA Envolve técnicas que permitem ao homem utilizar organismos para a obtenção de substâncias de utilidade para o ser humano. Panificação, produção de vinho, vinagre, iogurte, vacinas, soros, entre outros. ENGENHARIA GENÉTICA Conjunto de técnicas que permitem a transferência de genes do DNA de uma espécie para o DNA de espécie diferente. Dessa maneira, é formado o chamado DNA recombinante (ou quimérico), que é a associação de duas ou mais moléculas de DNA de espécies diferentes que não são encontradas juntas na natureza. Uso de bactérias em biotecnologia Uso de bactérias em biotecnologia • Células (bactérias, leveduras) são usadas para inserção de genes de interesse para produção de um determinado produto. • Ex.: insulina, somatropina, anticorpos monoclonais, ente outros. PRODUÇÃO DE INSULINA HUMANA A PARTIR DE BACTÉRIAS - O gene da insulina humana é localizado e, posteriormente, isolado utilizando-se enzimas de restrição para cortar o DNA humano; - O gene é inserido em um plasmídeo bacteriano que também foi cortado com a mesma enzima de restrição; - O gene é replicado com o uso da técnica PCR (Reação em Cadeia da Polimerase); - Ativa-se o plasmídeo, para a transcrição do gene e produção da proteína (insulina); - Retira-se a insulina da bactéria. ENZIMAS DE RESTRIÇÃO São enzimas especiais também chamadas de ENDONUCLEASES, que cortam a molécula de DNA em pontos específicos (à escolha do técnico). Com a ação das enzimas de restrição é possível a retirada de um gene do DNA permitindo a introdução de outro gene pertencente ao DNA de outra espécie, obtendo o DNA recombinante. ENZIMAS DE RESTRIÇÃO A enzima de restrição EcoRI, por exemplo, corta o DNA entre as bases G e A. A EcoRI é uma endonuclease descoberta a partir da Escherichia coli (Eco). O R, vem da cepa RY13 e I porque foi a primeira enzima de restrição descoberta. Técnica da PCR