VI Board Review Curso de Revisão em Hematologia e
Hemoterapia
25 anos de Transplante de Medula Óssea
VI Simpósio de Transplante de Medula Óssea
Margareth Torres
São Paulo, 22 de junho de 2012
2008 - 15th IHIW Novas Normas Nomenclatura HLA
HLA..
-Delimitantes (:) introduzidos para a denominação e diferenciação dos
alelos..
alelos
A nova nomenclatura entrou em vigor a partir de Abril de 2010.
HLA – A * 24 : 02 : 01 : 02 L
AA# Mutação Polimorfismo no
Grupo do
Intron 3’ou 5’
silenciosa
alelo
(sinônima) Fora da região
(equivalente
codificante
sorológico)
Nulo = N
Low = L
Secr = S
Quest=Q
Quest
=Q
Baixa Resolução
Média Resolução
Alta Resolução
Nível Alélico
A*02
A*02:01/02:05/02:09/02:40
A*02:01/02:09
A*02:01
Paciente:
Doador 1:
Doador 2:
Doador 3:
MXM
CFBS
BSEM
B*15:01,
B*15:MXM,
B*15:CFBS,
B*15:BSEM,
07:02
07:02
07:02
07:02
15:01/15:01N/15:05/15:08
15:02/15:15/15:88
15:03/15:29/15:61
HLA-DRB1*14:01:01 TAC Tirosina
HLA- DRB1*14:54
CAC Histidina
HLA-DRB1*14:01:01G
HLA-DRB1*14:01:01 OU
HLA-DRB1*14:54
Caracterização dos Alelos HLA-DRB1*14:01:01G
em uma amostra da
População Brasileira de São Paulo
Maria Elisa Moraes, Marcia Romero, Malvina Romero, Roberta
Foster, Simone Gregorio, Susana Rosa, Andreza Feitosa,
Margareth Torres.
LIG - Laboratório de Imunogenética, SP
HIAE - Hosp. Israelita Albert Einstein, SP
SBTMO – 04/08/ 2009
INTRODUÇÃO
Polimorfismos HLA não sinônimos encontrados no sítio de
reconhecimento do antígeno (SRA) causam impacto clínico nos
transplantes de células troncotronco-hematopoiéticas (TCTH).
Diferenças fora do sítio de reconhecimento do antígeno parecem não
influenciar o alo reconhecimento.
Nas moléculas
HLA de classe I,
pelos domínios α1
e α 2, codificados
pelos exons 2 e 3
SRA
SRA
Nas moléculas de
classe II, pelos
domínios α1 e β1,
codificados pelo
exon 2
HLAHLA-DRB1*140101, difere de DRB1*1454 no codon 112, do exon 3, pela
substituição do nucleotídeo T (TAC) por C (CAC), resultando na
substituição do aminoácido Y por H.
P.A. Horn, et al. Tissue Antigens 70 (2007), pp. 335–337.
Xiao, Y et al. Tissue Antigens 73(2009), pp595-598.
tirosina
histidina
RESULTADOS
DISTRIBUIÇÃO DO ALELO DRB1*14 e DRB1*1401g EM SÃO PAULO
A frequência de DRB1*14 foi de 8,2% (4173/50859).
Em 43/167 tipificados para o exon 3, observamos DRB1*14:54 em 76,7%
(33/43), e DRB1*14:01:01 em 23,3% (10/43).
Pai
Mãe
Lei de Mendel
25% de chance para
cada combinação
Doadores: Tipificação HLA classe I baixa resolução
Análise Familiar
Potenciais doadores
HLA class II (DRB1,DQB1)
Impossível Segregação
Haplótipos
Tipificação Alta resolução
ABCDRB1DQB1
Possibilidade Recombinantes
(Pais Homozigotos)
Segurança Tipificação Alta resolução
TIPAGEM CLASSE I BAIXA RESOLUÇÃO
RECEPTOR E DOADOR
A*02 A*31 B*35
B*51
DRB1*04 DRB1*14
TIPAGEM CLASSE II ALTA RESOLUÇÃO
PACIENTE
IRMÃO
DRB1*04:11
DRB1*04:
11 DRB1*14:02
DRB1*04:04
DRB1*04:
04
DRB1*14:02
TIPAGEM CLASSE I ALTA RESOLUÇÃO
PACIENTE
IRMÃO
A*02:01 A*31:01 B*35:
B*35:02
02
B*51:01
A*02:01 A*31:01
B*51:01
B*35:08
B*35:
08
Coleta nova amostra de sangue do paciente e
doador selecionado
Repetir a tipificação HLA classe I e II baixa
resolução
Cuidado: Paciente com homozigose ( blastos)
BUSCA DE DOADOR
FAMÍLIA
NUCLEAR
FAMÍLIA
ESTENDIDA
DOADORES NÃO
APARENTADOS/Sangue Cordão Umbilical
TCPH Não Aparentado
Critérios de Seleção
DP DQ DR
BC
A
Quais os locos devem ser tipados?
Quais os locos devem ser analisados?
Qual o nível de resolução?
Comparação entre os locos?
.
DP DQ DR
BC
A
BLOOD, 1 OCTOBER 2004 VOLUME 104, NUMBER 7
Flomenberg et al, BLOOD, 1 OCTOBER 2004 VOLUME 104, NUMBER 7
MSOffice3
Slide 18
MSOffice3
A importancia das variaveis dos locos e nivel de resolucao ainda nao estao totalmente definidos. NMDP analisou 3857 tx realizados de
1988-2003
Full type ABCDRDQADQBDPADPB
; 10/03/2010
Compatibilidade alélica nos locos
HLA-A, -B, -C e DRB1 (8x8 alélico)
Minimizar incompatibilidade alélica
Evitar incompatibilidade antigênica
Assumir que os locos A,B,C e DRB1 tem a
mesma importância??
Paciente
Alta resolução
HLA-A,B,C, DRB,1DQB1
Doadores:
Alta resolução
HLA-A,B,C, DRB1, DQB1
HLA-DPB1 :
- Vários doadores
- Presença de anticorpo anti-HLA Doador Especifico
Petersdorf et al, 2007
Petersdorf et al, 2007
Transplantados com doadores não aparentados
Período 2009-2012
38,75% doadores voluntarios dos registros e
61,25% SCUP
26,66% ABCDRB1DQB1 alelica
- 86% compatibilidade alélica 10x10
47,82% doadores REDOME
34,78% doadores DEDKM
13% doadores NMDP
Critérios de Seleção
DP DQ DR
Bc
A
Quais os locos devem ser tipados?
Quais os locos devem ser analisados?
Qual o nível de resolução?
Comparação entre os locos?
.
HLA e SCUP
-Tipificação HLA – A, B (obrigatória) e -C
(recomendável) sorologia ou baixa/média resolução
-Tipificação HLA-DRB1 – alta resolução
-Confirmatória – segmento da bolsa de cordão
.
Redome – solicita amostra de DNA para
tipificação confirmatória
Simultaneamente –
- Tipificação HLA do segmento
- Tipificação HLA da mãe
Epitopos Imunogênicos DPB1
Zino et al, 2004
ALGORITMO
•
Risco de transplantar uma unidade não compatível.
• Erro na registro do resultado do HLA.
• Troca de amostra na execução do exame
• Erro na identificação da amostra
•
Risco de transplantar uma unidade sem capacidade de
reconstituir a hematopoiese.
• Análise de viabilidade,
• Contagem de células CD34+,
• CFU.
MSOffice1
Células NK (Natural Killer)
• - Imunidade inata
• - Ativação depende do equilíbrio entre sinais estimulantes e
inibitórios.
• A célula NK desencadeia lise de alvo celular quando detecta a
ausência de expressão
KIR de moléculas-próprias de MHC Classe I
(Killer
Immunoglobulin
Receptor)
HLA-Classe I
(C ou B ou A)
Célula Alvo
Cortesia Dr. Fábio Pires
Célula NK
Slide 40
MSOffice1
Celulas NK 10% linfocitos CD3 - CD56+
Funçao citotoxicidade e producao de citocinas.
Elas sao inibidas por ligantes HLA classe I
; 25/08/2008
C1 asparagina na posição 80
C*01, C*03, C*07, C*08, C*12:02, C*12:03, C*12:06,
C*12:08, C*13:01, C*14:02, C*14:03, C*14:05, C*15:07,
C*16:01, C*16:04
C2 lisina na posição 80
C*02, C* 03:07, C*04, C*05, C* 06, C*07:07, C*07:09,
C*12:04, C*12:05, C*12:07, C*14:04, C*15, C*16:02, C*17,
C*18
Selecting donor/recipient pairs with donor-versus-recipient NK alloreactivity.
HLA-C*12:02, 12:05
HLA –C group 1, 2
HLA-C*04, 05
HLA –C group 2
HLA-C*01, 07
HLA –C group 1
HLA-C*07, 13
Bw 4 Bw6
Reisner Y et al. Blood 2011;118:6006-6017
©2011 by American Society of Hematology
HLA-B*08, 18
Bw6
NK-cell alloreactivity and the “mother donor effect.” (A-B) Transplantation from haploidentical
NK-alloreactive donors improves EFS. (A) EFS in patients transplanted in CR from NKalloreactive versus non–NK-alloreactive donors.
©2011 by American Society of Hematology
Reisner Y et al. Blood 2011;118:6006-6017
Ruggeri L, Blood 2007;10(1):433-440
Stern M, Blood 2008;112(7):2990-2995
MSOffice2
Slide 44
MSOffice2
Receptor tx LMA Ruggeri et al demonstraram que a presença de incompatibilidade HLA ligante na direçao GVHD, aloreatividade protegeu contra
recaida, rejeicao e GV
; 24/08/2008
KIR-ligand incompatibility in the graft-versus-host
direction improves outcomes after
umbilical cord blood transplantation for acute leukemia
R Willemze1,2, CA Rodrigues1, M Labopin3, G Sanz4, G Michel5, G Socie´6, B Rio7, A
Sirvent8, M Renaud9, L Madero10,
M Mohty11, C Ferra12, F Garnier1,13, P Loiseau6, J Garcia14, L Lecchi15, G Ko¨
gler16, Y Beguin17, C Navarrete18, T Devos19,
I Ionescu1, K Boudjedir1, A-L Herr1, E Gluckman1 and V Rocha1,3,6
Leukemia (2009) 23, 492–500
p=0.004
KIR-ligand compatible n=68
43%±9 at 2 years
KIR-ligand incompatible n=26
6%±6 at 2 years
Negative effect of KIR alloreactivity in recipients of
umbilical cord blood transplant depends on
transplantation conditioning intensity
Claudio G. Brunstein1, John E. Wagner1, Daniel J. Weisdorf1, Sarah Cooley1, Harriet
Noreen1, Juliet N. Barker1, Todd DeFor1, Michael R. Verneris1, Bruce R. Blazar1, and
Jeffrey S. Miller1
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umbilical cord blood transplantion. Biol Blood
Marrow Transplant 2011 17:1698-1720
Alo anticorpo
PE anti-IgG
Antígeno HLA
Bead Luminex
Número de Amostras
Percentual
Ausência de Anticorpos
45
68.18%
Classe I Positiva
6
9%
Classe II Positiva
5
7.57%
Classe I e II Positiva
10
15.15%
D.S.A.
2
3.03%
n
66
PROPOSTA PARA TCTH NÃO APARENTADO
SCREENING
Anticorpo Anti HLA
Positivo
Negativo
Pesquisa D.S.A.
Positivo
•Selecionar outros Doadores
ou
•Remover anticorpo anti HLA
TRANSPLANTE
Obrigada….