CROMOSSOMOS
HUMANOS
IVANISE C.S.MOTA
O Ciclo Celular
Compactação do
Material Genético
Mitose
Célula mãe
A cromatina condensase em cromossomos e a
carioteca é desfeita
Prófase
Metáfase
Anáfase
Alinhamento dos
cromossomos
Separação das
cromátides irmãs
Descondensação das
cromatinas, divisão
do citoplasma
Telófase
Duas células filhas
Padronização
Cariotípica
Conferências:
Denver (1960)
Londres (1963)
Chicago (1966)
Paris (1971,1975)
ISCN (1978 a 1995)
Conferência de
Denver (1960)
Propostas
• Classificação básica para cromossomos mitóticos
humanos
• Divisão em 7 grupos, distribuídos de acordo com
tamanho e morfologia
p
q
Conferência de
Londres (1963)
Propostas
• Os 7 grupos foram denominados com letras(A a G)
• Descrição morfológica detalhada dos grupos A, C,
D, E e G
Conferência de
Chicago (1966)
Propostas
• Regras para a descrição do cariótipo (fórmula
cariotípica)
• Criação dos símbolos utilizados na descrição de
cariótipos normais e anormais, em coloração
convencional
46,XX mulher
46, XY homem
47,XY+21 - homem, trissomia do 21
45,X0 - mulher com Síndrome de Turner
Sangue
Periférico
linfócito
• Protocolos otimizados
• Microcultura e macrocultura
• Cultura a curto prazo - 48 a 72h
• Cultura a longo prazo - 92h
• Pouco invasivo
Meio
de Cultura
• RPMI 1640
• Fitohemaglutinina
• Soro fetal bovino
• Penicilina
• Estreptomicina
• L-Glutamina
• Colchicina
Rotina
Citogenética



Diante da cultura efetivada realiza-se a
técnica de squash, a qual consiste de gotejar
o material cultivado sobre uma lâmina de
vidro (com um breve afastamento para ação
da gravidade).
Observa-se a metáfase mais apropriada para
avaliação, fotografa, amplia e realiza o
cariótipo simples. Caso seja solicitação de
Cariótipo por bandeamentos cora-se o
material com a banda adequada e
posteriormente realiza-se o cariótipo.
Obs.: A técnica de bandeamento refere-se a
frações sensíveis a corantes expostos e não a
frações gênicas.




Metacêntrico → Centrômero
posicionado no centro do cromossomo;
Submetacêntrico → Centrômero
deslocado para uma das extremidades
do cromossomo;
Acrocêntrico → Cromossomo portador
de uma esfera terminal (satélite),
localizada na extremidade do braço
curto;
Telocêntrico → Cromossomo formado
por apenas um braço, com centrômero
estritamente terminal.
Classificação dos cromossomos
Classificação Universal de
Denver
Grupos
Morfologia
Pares
A
Grandes - Metacêntricos ou
Submetacêntricos
1a3
B
Grandes – Submetacêntricos
4e5
C
Médios – Submetacêntricos
6 a 12 – X
D
Médios -Acrocêntricos
13 a 15
E
Pequenos – Metacêntricos ou
Submetacêntricos
16 a 18
F
Pequenos – Metacêntricos
19 e 20
G
Muito Pequenos – Acrocêntricos
21 e 22 -Y
Bandeamento G
Os cromossomos são inicialmente
tratados com tripsina, para a
desnaturação das proteínas
cromossômicas e em seguida são
corados com o corante Giemsa.
Identificação dos Cromossomos
Bandeamento GTG
• Permitiu o pareamento cromossômico
• Localizar o local afetado
• Identificar bandas claras e escuras
Bandeamento
GTG
Tripsina
NaCl
Giemsa
5%
100%
4%
dH2O
Bandeamento Q

Os cromossomos são tratados com
mostarda de quinacrina ou compostos
semelhantes e, em seguida, examinados
por microscopia de fluorescência. Os
cromossomos coram-se num padrão
específico de bandas brilhantes e opacas
Identificação dos Cromossomos

Bandeamento R
Os cromossomos recebem pré-tratamento
com calor antes da coloração Giemsa.
Nesse caso, as bandas claras e escuras
resultantes são o inverso das produzidas
por bandeamento G.

Bandeamento C
Envolve a coloração da região centromérica
de cada cromossomo e outras regiões que
contenham heterocromatina.
Identificação dos Cromossomos

Bandeamento de alta resolução
Esse tipo de bandeamento cora cromossomos
preparados num estágio inicial da mitose
(prófase ou prometáfase) que estão ainda em
uma condição relativamente não-condensada.

Citogenética molecular
Podem-se usar sondas de DNA específicas
para cromossomos ou regiões cromossômicas
particulares ou diagnosticar rapidamente a
existência de um número anormal de
cromossomos no material clínico.
Identificação dos Cromossomos
Banda NOR
 Identificação cromossômica mediante o
uso de nitrato de prata.

Autoradiografia
 Os cromossomos são identificados
mediante a eliminação de substâncias
radiotivas expelidas. É prejudicada a
visualização em detrimento de não haver
homeostasia celular.

Análise
Citogenética
• Indicação Clínica
• Tipo de Amostra
• Qualidade do
material
• Experiência do
analista
• Recursos de análise
Tipos
de Amostras
Sangue periférico e biópsia de pele
Contagem: 15-20 células
Análise: 4-5 células
Cariótipo: 2 células
fibroblastos
linfócito
Tipos
de Amostras
Medula Óssea
Contagem: 15-20 células
Análise: 4-5 células
Cariótipo: 2 células
Tipos
de Amostras
Líquido Amniótico
Cultura em frascos
Contagem: 15-20 células de duas culturas
Análise: 4-5 células
Cariótipo: 2 células
AMNIONCENTESE
Tipos
de Amostras
Vilosidades Coriônicas
Direto
Contagem: 15-20 células, se possível
Análise: 4-5 células, se possível
Cariótipo: 2 células (1 de cada teste)
Cultura
Contagem: 15-20 células (de cada cultura)
Análise: 4-5 células
Cariótipo: 2 (de cada cultura)
Tipos
de Amostras
Células Tumorais
Contagem: Não se recomenda apenas a contagem
sem a análise completa da célula
Análise: 15-20 células
Cariótipo: 2 células
Métodos e
Ferramentas de
Análise
Métodos e Ferramentas de
Análise
Axioplan-Imaging®
Carl Zeiss
Aspectos Metodológicos e Aplicações
1p22.2
Cromossomo: 1
Braço: Curto
Região: 2
Banda: 2
Sub-banda:2
Componente
Explicação
6
Número do cromossomo.
p
Encontra-se no braço curto do cromossomo
(p);
21.3
O número seguinte a letra representa a
posição no braço: banda 21, sub-banda 3.
As bandas são visíveis ao microscópio
quando o cromossomo está devidamente
corado. Cada banda é numerada sendo a
número 1 a mais próxima do centrômero.
Sub-bandas e sub-sub-bandas são visíveis a
resoluções mais altas.
Ex.:
6p21.3
– Síndrome de Marfan – HAD (fibrilina – 15)