DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DA INFECÇÃO
PELO HIV
Josenildo Moraes
Leonardo Buri
Alunos do Curso de Biomedicina 6º semestre
Profª: Marcia Cristina
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Recomendações para terapia anti-retroviral em
adultos e adolescentes infectados pelo HIV
2007/2008
Documento preliminar
Ministério da Saúde- Secretaria de Vigilância em Saúde Programa Nacional de DST e Aids
O documento completo pode ser conferido no site:
www.aids.gov.br ou
www.saude.rio.rj.gov.br/aids//media/dstaids_consenso_adu
lto_2008.pdf.
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6º SEMESTRE
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O diagnóstico da infecção pelo HIV no Brasil em
indivíduos com idade acima de dois anos é
baseado na detecção de anticorpos, de acordo
com a Portaria Nº 59/GM/MS, de 29 de janeiro de
2003 (disponível na página www.aids.gov.br).
Alternativamente, para a identificação da infecção
pelo HIV em crianças nascidas de mães
soropositivas, utilizam-se testes para
quantificação da carga viral do HIV-1, em função
da transferência passiva de anticorpos da mãe
para o bebê, que pode ocasionar resultados falsopositivos nos testes para detecção de anticorpos.
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Os testes para detectar anticorpos anti-HIV
podem ser classificados como:
-
Ensaios de triagem: desenvolvidos para detectar
todos os indivíduos infectados, ou
-
Ensaios confirmatórios: desenvolvidos para
identificar os indivíduos que não estão infectados,
mas têm resultados reativos nos ensaios de
triagem.
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Janela imunológica
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Anticorpos específicos contra o HIV começam a
ser produzidos após o contágio.
No entanto, o tempo exato para seu
aparecimento depende de vários fatores,
relacionados ao hospedeiro e ao agente viral,
dentre outros.
Ensaios mais recentes, incluindo os ensaios de
terceira geração do tipo sandwich, podem
detectar anticorpos em 3-4 semanas após a
infecção (Fiebig et al)
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O período de janela imunológica para detecção
de anticorpos em um ensaio imunoenzimático
que detecte anticorpos da classe IgM é de 22
dias, para a detecção de antígeno p24 é de
aproximadamente 17 dias e detecção de RNA HIV
é de 12 dias após o período de eclipse.
O período total para a detecção de anticorpos
(janela imunológica) é a soma do período de
eclipse (sete dias) e o período de detecção de
anticorpos anti-HIV da classe IgM (22 dias), ou
seja, em média, 29 dias, já que em torno de
90% das infecções são detectadas nesse período.
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Os anticorpos anti-HIV são detectados mais
precocemente nos testes Elisa (EIA) do que nos
testes Western Blot (WB), em função dos EIA
serem mais sensíveis que os WB.
Esta é a razão pela qual a Portaria Nº 59/
GM/MS determina que em uma amostra com
resultado reagente no EIA e negativo ou
indeterminado no WB, deve-se investigar a
soroconversão no indivíduo, coletando-se uma
nova amostra 30 dias após a coleta da primeira
amostra e realizando todos os testes
preconizados na referida portaria.
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Diagnóstico laboratorial da infecção pelo HIV
 Para a realização do diagnóstico da infecção pelo
HIV em laboratórios no Brasil, um conjunto de
procedimentos seqüenciados (algoritmo ou
fluxograma de testes) é regulamentado por meio
da Portaria Nº 59/GM/MS, de 28 de janeiro de
2003.
Diagnóstico da infecção pelo HIV utilizandose os testes rápidos
 O desempenho dos testes rápidos para detecção
de anticorpos anti-HIV tem sido aprimorado, nos
últimos anos, aumentando sua sensibilidade e
especificidade, à partir de ensaios baseados em
novas tecnologias.
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Para definir sua utilidade no diagnóstico da
infecção do HIV no Brasil, o MS, em cooperação
com o Centers for Disease Control (CDC),
promoveu uma avaliação do desempenho dos
testes registrados no país.
Objetivo: Elaborar um algoritmo para o
diagnóstico da infecção pelo HIV utilizando-se
somente testes rápidos.
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Os resultados do estudo demonstram que a
utilização do algoritmo de testes rápidos
dispensa a necessidade do teste confirmatório.
A vantagem da adoção de um algoritmo com
teste rápido é sua simplicidade e rapidez quando
comparado ao algoritmo que utiliza Elisa e
western blot para confirmação.
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PORTARIA Nº 59, DE 28 DE JANEIRO DE 2003
Procedimentos seqüenciados, para detecção de
anticorpos anti-HIV em indivíduos com idade acima
de dois anos.
Necessidade de definir e normatizar a sub-rede de
laboratórios do Programa Nacional de DST e Aids, que
realizam testes sorológicos para a detecção de anticorpos
anti-HIV, integrante da Rede Nacional de Laboratórios
Clínicos, em conformidade com a Portaria N o 15, de 03 de
janeiro de 2002;
Necessidade de implantar um programa que tem por
objetivo o controle da qualidade analítica do diagnóstico
laboratorial da infecção pelo HIV;
Necessidade de padronizar o conjunto de procedimentos
seqüenciados para detecção de anticorpos anti-HIV com o
objetivo de realizar o diagnóstico laboratorial da infecção
pelo HIV em indivíduos com idade acima de 02 (dois) anos.
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Com o objetivo de realizar a detecção de anticorpos antiHIV para o diagnóstico laboratorial da infecção pelo HIV, é
exigido o cumprimento rigoroso dos procedimentos
seqüenciados, agrupados em três etapas:
- Etapa I - Triagem Sorológica
- Etapa II - Confirmação Sorológica por meio da realização de
um segundo imunoensaio em paralelo ao teste de
Imunofluorescência Indireta para o HIV-1 (IFI/HIV-1) ou
ao teste de Imunoblot para HIV.
- Etapa III - Confirmação Sorológica por meio da realização
do teste de Western blot para HIV-1 (WB/HIV-1).
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RECOMENDAÇÕES:
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Investigação de soroconversão:
Para investigação de anticorpos, recomenda-se
proceder a coleta de uma segunda amostra 30
dias após a emissão do resultado da primeira
amostra e repetir o conjunto de procedimentos
seqüenciados descritos nesta Portaria.

Investigação de HIV-2
Recomenda-se realizar a investigação de HIV-2
quando os dados epidemiológicos forem
sugestivos de infecção por este vírus ou se os
dados clínicos forem compatíveis com a infecção
HIV/aids.
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PORTARIA Nº 34/SVS/MS, DE 28 DE JULHO DE 2005
Regulamenta o uso de testes rápidos para
diagnóstico da infecção pelo HIV em situações
especiais.
Art. 2º O diagnóstico da infecção pelo HIV poderá ser
realizado em serviços de saúde localizados em áreas de
difícil acesso e maternidades, em parturientes que não
tenham sido testadas para o anti-HIV no pré-natal.
Art. 5º O diagnóstico da infecção pelo HIV utilizando-se
testes rápidos somente poderá ser utilizado em indivíduos
com idade acima de 18 (dezoito) meses.
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PROCEDIMENTOS SEQÜENCIADOS PARA
REALIZAÇÃO DO DIAGNÓSTICO DA INFECÇÃO PELO
HIV UTILIZANDO-SE TESTES RÁPIDOS EM
INDIVÍDUOS COM IDADE ACIMA DE 18 (DEZOITO)
MESES.
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Os serviços de saúde que realizam testes rápidos para o
diagnóstico da infecção pelo HIV deverão adotar,
obrigatoriamente, a realização de dois testes - T1 e T2 em paralelo.
Nesta primeira etapa de testes de qualquer amostra de
sangue total, soro ou plasma. Os dois primeiros
imunoensaios deverão apresentar valores de sensibilidade
de 100% na análise de controle a ser realizada no
INCQS/FIOCRUZ.
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ALGORITMO DE TESTES RÁPIDOS PARA
DETECÇÃO DE ANTICORPOS ANTI-HIV EM
INDIVÍDUOS COM IDADE ACIMA DE 18
MESES
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TESTE 1 + TESTE 2
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PORTARIA Nº 151/SVS/MS, DE 14 DE OUTUBRO DE
2009 DOU 16.10.2009.
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Necessidade de se criar alternativas para a ampliação do
acesso ao diagnóstico da infecção pelo HIV, em
atendimento aos princípios da equidade e da integralidade
da assistência, bem como da universalidade de acesso aos
serviços de saúde do SUS;
Necessidade do diagnóstico rápido da infecção pelo HIV em
situações especiais;
Identificação dos indivíduos infectados pelo HIV permitindo
o acompanhamento precoce nos serviços de saúde e
possibilidade da melhora na qualidade de vida;
Definição do estado sorológico de um indivíduo infectado
pelo HIV para a sua maior proteção e para o controle da
infecção e da disseminação do vírus;
O diagnóstico sorológico da infecção pelo HIV realizado em
indivíduos com idade acima de 18 meses
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Art. 1º Aprovar, na forma dos Anexos a esta Portaria,
etapas seqüenciadas e o Fluxograma Mínimo para o
Diagnóstico Laboratorial da Infecção pelo HIV em
indivíduos com idade acima de 18 (dezoito) meses, de uso
obrigatório pelas instituições de saúde públicas e privadas.
Art. 2º Determinar o uso do teste rápido para o diagnóstico
da infecção pelo HIV em situações especiais, conforme
disposto no Anexo II a esta portaria.
Art. 3º Definir que as amostras podem ser de soro, plasma,
sangue total ou sangue seco em papel filtro ...
Parágrafo Único. Fica vedada a mistura de amostras
(pool) para a utilização em qualquer teste laboratorial, com
o objetivo de diagnosticar a infecção pelo HIV.
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Art. 4º Estabelecer que todos os reagentes utilizados para o
diagnóstico da infecção pelo HIV devem ter registros
vigentes na Agência Nacional de Vigilância Sanitária ...
Art. 5º O Ministério da Saúde, por intermédio do DDSTAIDS/SVS/MS, definirá as normas técnicas
necessárias aos programas de validação de reagentes para
uso no diagnóstico da infecção pelo HIV.
Art. 6º Esta Portaria entra em vigor na data de sua
publicação.
Art. 7º Revogar a Portaria nº. 34/SVS de 28 de julho de
2005, publicada no Diário Oficial da União nº. 145, Seção
1, pág. 77, de 29 de julho de 2005.
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ANEXO I
 Diagnóstico Laboratorial da Infecção pelo HIV
1. Da Etapa I : Triagem - TESTE 1 (T1) Para a Etapa I de triagem
deverá ser utilizado um teste capaz de detectar
anticorpos anti-HIV-1, incluindo o grupo O e anticorpos anti-HIV2. Poderão ainda ser utilizados, nessa etapa, testes que
combinem a detecção simultânea desses anticorpos e de
antígeno.
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
É permitida a utilização das seguintes metodologias, no teste da
Etapa I:
a)Ensaio imunoenzimático - ELISA;
b)Ensaio imunoenzimático de micropartículas - MEIA;
c)Ensaio imunológico com revelação quimioluminescente e suas
derivações - EQL;
d)Ensaio imunológico fluorescente ligado a enzima - ELFA;
e)Ensaio imunológico quimioluminescente magnético - CMIA;
f)Testes rápidos: imunocromatografia, aglutinação de partículas
em látex ou imunoconcentração;
g)Novas metodologias registradas na ANVISA e validadas pelo
DDSTAIDS/SVS/MS
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ANEXO I
2. Da Etapa II - Complementar - Teste 2 (T2)
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É permitida a utilização das seguintes metodologias no teste da
Etapa II:
a)Imunofluorescência indireta - IFI;
b)Imunoblot - IB;
c)Imunoblot rápido - IBR;
d)Western Blot - WB;
e)Outras metodologias registradas na ANVISA e validadas pelo
DDSTAIDS/SVS/MS
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ANEXO II
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Diagnóstico da infecção pelo HIV por Testes Rápidos
O diagnóstico rápido da infecção pelo HIV é feito exclusivamente com
testes rápidos validados pelo DDSTAIDS/SVS/MS
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
O diagnóstico rápido poderá ser realizado nas seguintes situações
especiais:
a)Rede de serviços de saúde sem infraestrutura laboratorial ou localizada
em regiões de difícil acesso;
b)Centro de Testagem e Aconselhamento - CTA;
c)Segmentos populacionais flutuantes;
d)Segmentos populacionais mais vulneráveis;
e)Parceiros de pessoas vivendo com HIV/AIDS;
f)Acidentes biológicos ocupacionais, para teste no paciente fonte;
g)Gestantes que não tenham sido testadas durante o pré-natal ou cuja
idade gestacional não assegure o recebimento do resultado do teste
antes do parto;
h)Parturientes e puérperas que não tenham sido testadas no pré-natal ou
quando não é conhecido o resultado do teste no momento do parto;
i)Abortamento espontâneo, independentemente da idade gestacional;
j)Outras situações especiais definidas pelo DDSTAIDS/SVS/MS
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5. Considerações e Recomendações
1. Não existem testes laboratoriais que apresentem 100%
de sensibilidade e 100% de especificidade. Em decorrência
disso, resultados falso-negativos, falso-positivos,
indeterminados ou discrepantes entre os testes distintos
podem ocorrer na rotina do laboratório clínico.
A detecção de anticorpos anti-HIV, em crianças com idade
inferior a 18 meses, não caracteriza infecção, devido à
transferência dos anticorpos maternos anti-HIV pela
placenta, sendo necessária a realização de outros testes
complementares para a confirmação do diagnóstico.
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Referência bibliográfica
Constantine N. HIV Antibody Assays. HIV InSite Knowledge Base Chapter
Bibliografia
1. Constantine N. HIV Antibody Assays. HIV InSite Knowledge Base Chapter
2. Fiebig EW, Wright DJ, Rawal BD, Garret PE, Schumacher RT, Peddada L,
Heldebrant C, Smith R, Conrad A, Kleinman SH, Busch MP. Dinamics of HIV
viremia and Organization. Rapid HIV tests: guidelines for use in HIV testing
and couselling services in resource-constrained settings. Geneva, 2004.
5. Ferreira Jr OC, Ferreira C, Riedel M, Widolin MRV, Barbosa-Júnior A for the
HIV Rapid Test Study Group. Evaluation of rapid tests for anti-HIV detection in
Brazil. AIDS 2005, 19 (suppl 4):S70-S75.
6. Diagnóstico sorológico do HIV – Testes de triagem – Brasília: Ministério da
Saúde, Programa Nacional de Doenças Sexualmente Transmissíveis e AIDS.
1997. (Série TELELAB)antibody seroconversion in plasma donors implications for
diagnosis and staging of primary HIV infection. AIDS 2003, 17;1871-1879
3. Branson, BM. Rapid tests for HIV Antibody. AIDS Rev 2000; 2: 76-83.
4. World Health
7. ________Portaria N. 59, 28 de janeiro de 2003. Diário Oficial da União.
Brasília, 30 de janeiro de 2003
8. ________Portaria n. 34, de 28 de julho de julho de 2005. Diário Oficial da
União. Brasília, 29 de julho de 2005. Seção 1, p-77-78.
9. _______________Portaria Nº 151, DE 14 DE OUTUBRO DE 2009. Diário Oficial da
União. Brasília, 14 de outubro de 2009
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