SILVA, Roseli Lopes da. Efeito do oxigênio dissolvido na produção de lipases
por Yarrowia lipolytica e sua ação na obtenção de carotenóides naturais. Rio de
Janeiro, 2012. Dissertação (Mestrado em Ciências de Alimentos). Instituto de
Química, Universidade Federal do Rio de Janeiro.
As lipases (triacilglicerol ester hidrolases, E.C. 3.1.1.3) são enzimas que
pertencem à classe das serino hidrolases e se destacam por sua versatilidade
possuindo uma ampla faixa de substratos. Devido à característica de ser
estritamente aeróbia, a produção de enzimas pela levedura Yarrowia lipolytica
está intimamente ligada ao conteúdo de oxigênio dissolvido no meio de cultura
e, assim para melhorar essa transferência são utilizadas estratégias como o
emprego de perfluorocarboneto (PFC). O objetivo do trabalho foi estudar a
influência do oxigênio dissolvido na produção de lipases, bem como o efeito da
presença do PFC no perfil de lipases produzidas, e avaliar a aplicação do
extrato rico em lipases na obtenção de carotenóides naturais de óleo de buriti
refinado. Para tanto, foram testadas duas condições de agitação (550 e 650
rpm), na presença ou ausência do carreador de oxigênio. Sem a utilização do
PFC, a condição com maior produção de lipases foi a de 650 rpm, resultando
numa melhor transferência de oxigênio, e assim em um aumento de
produtividade de 2,5 vezes em relação a 550 rpm. A presença do carreador
promoveu maior produção de lipases na menor agitação em relação ao
produzido em sua ausência, o que não foi obtido na condição de 650 rpm.
Extratos ricos em lipases produzidos na ausência e presença de PFC foram
submetidos à eletroforese (SDS-PAGE), sendo coradas com Coomasie Blue e
Prata. As revelações mostraram bandas próximas a 40 e 60 kDa, típicas de
lipases sob as duas agitações, porém a presença de PFC, tornou as bandas
mais intensas. Em 650 rpm, na presença ou ausência de PFC,
os perfis
proteicos obtidos nos extratos foram mais límpidos e seletivos, comprovando o
aumento na atividade específica observada com o aumento da agitação. O
extrato rico em lipases de Yarrowia lipolytica foi aplicado ao óleo de buriti, e
obteve resultados com pequena atividade hidrolítica, devendo ser investigada a
sua utilização em outros tipos de substratos.