Detecção Molecular de Espécies de Riquetsias
Circulantes no Sul e Centro de Moçambique
Por: Vlademiro Magaia, Nidia Cangi, Elisa Taviani e Luis Neves
5º Seminário Nacional de
Divulgação de Resultados dos Projectos Financiados pelo FNI
Maputo, 20-21 de Novembro 2014
Estrutura da Apresentação
I. . Introdução;
II. Objectivos do projecto;
III. Metodologia e resultados;
IV. O papel da instituição que aloja o projecto;
V. Desafios e constrangimentos;
VI. Proposta de solução;
VII. Sustentabilidade do projecto;
I. Introdução
• Riquétsias são bactérias intracelulares obrigatórias e causam doenças que
afectam o Homem e animais bravios e domésticos
• São transmitidas principalmente por carraças dos géneros Amblyomma,
Rhipicephalus, Dermacentor e Ixodes causando uma doença designada
riquetsiose.
• O género Rickettsia divide-se em dois grupos: tifo e febre maculosa.
• O quadro sintomatológico é moderado, mas a doença pode ser mais grave em
idosos, sendo caracterizada por febre, dor de cabeça, náuseas, e mialgia
Introdução (2)
• Em África as espécies R.africae, R.conorii são consideradas as mais
importantes. As carraças do género Amblyomma e Rhipicephalus servem
simultaneamente como vector e reservatório de R.africae, e R. conorrii
respectivamente
• Nos últimos anos os métodos serológicos contribuíram bastante para o
diagnóstico de riquétsias, contudo apresentam algumas limitações
relacionadas principalmente com baixa sensibilidade e especificidade,
quando comparados aos moleculares baseados em PCR
II. Objectivos do projecto
Geral:
• Detectar e caracterizar molecularmente bactérias do género Ricketttsia circulantes
na região Sul e Centro de Moçambique, em carraças e sangue humano.
Específicos:
• Optimizar e validar a técnica molecular para a detecção de bactérias do género
Rickettsia do grupo da febre maculosa;
• Caracterizar molecularmente estirpes do género Rickettsia, circulantes na região
Sul e Centro de Moçambique;
• Aferir a consistência de detecção das estirpes do género Rickettsia, circulantes na
região Sul e Centro de Moçambique;
III. Metodologia e Resultados
Colheita de carraças
(A.hebraeum=600,
A.variegatum=100 e
1000 larvas) em 13
distritos
Colheita de sangue
humano no INS -150
Extracção de DNA
de carraças
Detecção por PCR
(gltA, ompB e
ompA)
Alinhamento e
construção de
árvores
filogenéticas
Sequenciamento
(32 amostras)
Locais de colheita de amostras
Principais resultados alcançados
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
1
C- C+ M
2 3 4 5 6 7 8 9 10
C- C+ M
500Pb
650Pb
Análise do produto de PCR para o gene ompA,
Análise do produto de PCR, para o gene ompB,
• A técnica molecular usada neste estudo (PCR), mostrou ser sensível e
eficaz na detecção de riquétsias do grupo da febre maculosa;
Principais resultados alcançados (2)
As riquétsias ocorrem em Moçambique nos locais estudados com
homólogia as espécies R.africae e R.conorii.
IV. O papel da instituição que aloja o projecto
• Garantir a plataforma técnica e infraestrutural para a
realização do estudo em ambiente apropriado;
• Acompanhar e supervisionar a realização do estudo.
V. Desafios, constrangimentos
• Detecção de riquétsias em sangue humano
• Atraso verificado na tranferência e autorização para utilização dos fundos do projecto,
por parte do FNI;
• A dificuldade para aquisição de reagentes de fornecedores no estrangeiros, dada a
especificidade da área de estudo e debilidade do mercado Nacional em prover a
tempo os mesmos;
• Morosidade no fornecimento de consumíveis (procurement e entrega) que prende-se
fundamentalmente à ineficiência das empresas fornecedoras e aos procedimentos
caóticos adoptados pelas Alfândegas de Moçambique.
VI. Proposta de solução
• Optimizar os protocolos para detecção de riquétsias em sangue humano
• Mais abertura e flexibilidade por parte do FNI na gestão dos fundos, principalmente
no que concerne a transferência e comunicação;
• Melhorar os mecanismos para as excepções na aquisição de produtos de
fornecedores no estrangeiros, tornando a investigação em Moçambique mais
competitiva e relevante;
• Proposição concertada inter sectorial de uma “linha verde” para para consumíveis e
equipamentos de investigação.
VII. Sustentabilidade do projecto
• O projecto irá contribuir para o estabelecimento de um sistema de
vigilância, diagnóstico e controlo de riquetsioses em Moçambique, onde se
prevê a colaboração estreita entre o CB-UEM e o INS;
Obrigado