EFEITO INIBITÓRIO DE DIFERENTES CONCENTRAÇÕES DE ÓLEOS ESSENCIAIS
SOBRE O CRESCIMENTO DE Clostridium perfringens ATCC 13124
INHIBITORY EFFECT OF DIFFERENT CONCENTRATIONS OF ESSENTIAL OILS ON
GROWTH OF Clostridium perfringens ATCC 13124
Nayane Aparecida Araujo Dias1, Luciana Teixeira de Siqueira2, Cristiane de Oliveira Lopes1,
Maria das Graças Cardoso3 ,Roberta Hildsdorf Piccoli3
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Mestranda em Ciência dos Alimentos – Universidade Federal de Lavras – UFLA
Graduada em Ciências Biológicas – Universidade Federal de Lavras – UFLA
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Professora Associada - Universidade Federal de Lavras – UFLA
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Palavras-chave: Antimicrobianos, Concentração mínima inibitória, bactéria
Introdução
Os consumidores têm buscado alimentos naturais, caracterizados pela ausência ou
presença de baixos níveis de aditivos químicos, bem como baixo impacto ambiental,
retratando o consumismo verde (BURT, 2004). De acordo com SOUZA (2003), além da
propriedade aromatizante, as especiarias vegetais e os óleos essenciais poderiam aumentar
a vida útil dos alimentos por sua atividade bacteriostática e bactericida, retardando o
começo da deterioração e o crescimento de microrganismos indesejáveis. Sendo uma
alternativa para a redução do nitrito em produtos embutidos cárneos, auxiliando no controle
do Clostridium perfringens, responsável por diversas intoxicações alimentares, devido à
produção de enterotoxinas.
Objetivou-se, com este trabalho avaliar a atividade antimicrobiana dos óleos
essenciais de Cinnamomum zeylanicum (canela), Elettaria cardamomum (caradamomo), S.
officinalis (sálvia), Ocimum basilicum (manjerião/basilcão), Rosmarinus Officinalis (alecrim)
sobre Clostridium perfringens tipo A.
Material e Métodos
A cepa utilizada foi o Clostridium perfringens ATCC 13124, o número de células por
mL, de cada cultura, foi quantificado utilizando-se a curva padrão e padronizadas para cerca
de 107 UFC/mL. Os óleos essenciais foram adquiridos da empresa FERQUIMA Indústria e
Comércio Ltda. A metodologia utilizada foi a de Difusão em Disco (NCCLS, 2000). O BHI
ágar foi contaminado com a cultura padronizada, após a solidificação foram adicionados
discos de papel com 6 mm de diâmetro, estes foram preenchidos com 5 μL de óleo
essencial, nas diferentes concentrações. As diluições dos óleos foram preparadas com
etanol, obtendo-se as concentrações de 25; 12,5; 6,25; 3,12; 1,56; 0,78; 0,39; 0,19%.
Utilizou-se como controle negativo o etanol e como controle positivo foi utilizado o
cloranfenicol. O procedimento foi realizado em triplicata e as placas foram incubadas a 37°C
por 24 horas em anaerobiose. A mensuração dos halos de inibição formados foi realizada
com paquímetro digital. A estatística dos dados foi realizada utilizando o programa SISVAR
(FERREIRA, 2000). A análise de variância das médias das concentrações dos diferentes
óleos foi realizada e submetida ao teste comparativo de Tukey 0,05.
Resultados e Discussão
A capacidade das especiarias e óleos essenciais em inibir o crescimento
bacteriano, permite que as mesmas sejam utilizadas como antimicrobianos naturais nas
indústrias de alimentos. Neste contexto, é necessário verificar em qual concentração as
mesmas devem ser utilizadas. Para tal, devem ser realizados testes in vitro que determinem
as concentrações que apresentam efeito bacteriostático ou inibitório (BRUGNERA, 2010).
O óleo essencial de Cinnamomum zeylanicum (canela) apresentou efeito
antibacteriano, com a concentração mínima inibitória (MIC) de 12,5%, havendo também a
formação de halo na concentração de 25%.
Os óleos essenciais de Elettaria cardamomum (caradamomo), S. officinalis (sálvia),
Ocimum basilicum (manjerião/basilcão), Rosmarinus Officinalis (alecrim), não se mostraram
efetivos contra o Clostridium perfringens, não formando halo inibitório em nenhuma das
concentrações utilizadas.
A diferença observada entre a atividade antibacteriana dos diferentes óleos
essenciais pode ser explicada devido a diferente composição química das mesmas,
principalmente no que diz respeito aos constituintes dos óleos essenciais e compostos
fenólicos.
Considerando o número de diferentes grupos de compostos químicos presentes nos
óleos essenciais, é muito provável que a sua atividade antibacteriana não seja atribuível a
um mecanismo específico, mas que existem vários alvos na célula, como a alterações da
membrana citoplasmática, perturbações sobre a força próton motriz, no fluxo de elétrons, no
transporte ativo e coagulação do conteúdo da célula. Nem todos esses mecanismos atingem
alvos separados, podendo ocorrer em consequência de outro mecanismo (BURT, 2004;
CARSON et al., 2002).
Conclusão
Apenas o óleo essencial de canela apresentou atividade antimicrobiana com MIC de
12,5% sobre o Clostridium perfringens ATCC 13124, enquanto os óleos de cardamomo,
sálvia, basilicão e alecrim não apresentaram efeito inibitório.
Agradecimentos
Aos financiadores do projeto FAPEMIG, CAPES e CNPq.
Referências Bibliográficas
BRUGNERA, D. F.; OLIVEIRA, M. M. M. de ; PICCOLI, R. H. Utilização de orégano e sálvia
como antimicrobianos naturais no controle de Staphylococcus aureus. In: 27 Congresso
Nacional de Laticínios, 2010, Juiz de Fora. Anais do 27 Congresso Nacional de Laticínios,
2010.
BURT, S. Essential oils: their antibacterial properties and potential applications in foods – a
review. Int. J. Food Microbiol. 94, 223–253. 2004.
CARSON, C. F., MEE, B. J., RILEY, T. V. Mechanism of action of Melaleuca alternifolia (tea
tree) oil on Staphylococcus aureus determined by time-kill, lysis, leakage and salt tolerance
assays and electronmicroscopy. Antimicrob. Agents Chemother. 46, 1914–1920. 2002.
FERREIRA, D. F. SISVAR. Lavras: UFLA, 2000.
NCCLS (National Committee for Clinical Laboratory Standards), 2000.
SOUZA, E.L. Especiarias: uma alternativa para o controle da qualidade sanitária e de vida
útil de alimentos, frente às novas perspectivas da indústria alimentícia. Higiene Alimentar,
v.17, n.113, p.38-42, 2003.
Autor a ser contactado: Cristiane Lopes de Oliveira – Mestranda em Ciência dos Alimentos –
UFLA - e-mail: [email protected]