GRUPO HOSPITALAR CONCEIÇÃO
HOSPITAL NOSSA SENHORA DA CONCEIÇÃO
C.R. LABORATÓRIO DE ANÁLISES CLÍNICAS – SETOR DE BIOQUÍMICA
CK MASSA STAT
SORO / PLASMA
Automação Roche – E601
Elaborado por: Antônio do Amaral Batista
Procedimento Operacional Padrão
Data da 1ª versão: 20.10.2004
Versão/Revisão: 4/0
Data da efetivação: 20.02.2014
POP n.º: B38
Página 1 de 8
Revisado por: Daniela Sandra de Castilhos
Aprovado por: Andréa Cauduro de Castro
1. Sinonímia:
CPK MASSA, CPK-MB MASSA, MB MASSA Mnemônico: MBM
2. Aplicabilidade:
Bioquímicos do setor de bioquímica do LAC-HNSC.
3. Aplicação clínica:
Determinação quantitativa in vitro da massa da isoenzima MB da creatinaquinase em soro ou
plasma humano.
4. Princípio do teste:
Eletroquimioluminescência (ECLIA): Técnica de sandwich.
Duração do ensaio: 9 minutos (STAT).
1ª incubação: 15 µl de amostra, um anticorpo monoclonal biotinilado específico anti-CK-MB
e um anticorpo monoclonal específico anti-CK-MB marcado com complexo de rutênio
reagem entre si formando um complexo sandwich.
2ª incubação: Após a incorporação das micropartículas revestidas de estreptavidina, o
complexo formado liga-se à fase sólida pela interação da biotina e da estreptavidina.
A mistura de reação é aspirada para a célula de leitura, onde as micropartículas são fixadas
magneticamente à superfície do eletrodo. Os elementos não ligados são removidos com
ProCell M. A aplicação de uma corrente elétrica ao eletrodo induz uma emissão
quimioluminescente que é medida por um foto multiplicador. Os resultados são determinados
com base numa curva de calibração, que é gerada especificamente pelo analisador por uma
calibração de 2 pontos e uma curva principal incluída no código de barras do reagente.
5. Amostra:
5.1 Preparo do paciente:
Sem restrições. Vide POP-L4 – Coleta.
5.2 Tipo de amostra:
Soro ou plasma. Tubos sem anticoagulante e com gel separador ou tubos com anticoagulante:
EDTA, heparina (Li, Na) e citrato de sódio.
5.3 Colheita:
Quantidade mínima de sangue: 1 ml. Quantidade ideal: 5 ml.
5.4 Preservação e transporte:
Transportar o material colhido a temperatura ambiente e dentro das normas de segurança
legais.
CÓPIA IMPRESSA NÃO CONTROLADA
GRUPO HOSPITALAR CONCEIÇÃO
HOSPITAL NOSSA SENHORA DA CONCEIÇÃO
C.R. LABORATÓRIO DE ANÁLISES CLÍNICAS – SETOR DE BIOQUÍMICA
CK MASSA STAT
SORO / PLASMA
Automação Roche – E601
Elaborado por: Antônio do Amaral Batista
Procedimento Operacional Padrão
Data da 1ª versão: 20.10.2004
Versão/Revisão: 4/0
Data da efetivação: 20.02.2014
POP n.º: B38
Página 2 de 8
Revisado por: Daniela Sandra de Castilhos
Aprovado por: Andréa Cauduro de Castro
5.5 Identificação da amostra:
Etiqueta com código de barras gerado pelo sistema de gerenciamento de dados do LAC
(Sistema Pleres). A etiqueta deve ser posicionada nos frascos de colheita a partir da tampa
para o fundo em linha reta de forma que o código de barras fique visível e alinhado, sem
enrugamentos.
5.6 Estabilidade e armazenamento:
A estabilidade da amostra colhida é de 4h à temperatura ambiente, 8h se refrigerada (2 a
8°C) e 3 meses a -20°C. Congelar apenas uma vez. Amostras descongeladas devem ser
invertidas várias vezes e estar a temperatura ambiente antes da análise.
5.7 Amostras Inadequadas:
Amostras mal identificadas. Amostras inativadas pelo calor. Amostras com volume
insuficiente. Amostras com fibrina.
6. Reagentes e materiais:
Reagentes para automação Roche E601:
Dispositivo de reagentes CK-MB STAT – 100 testes.
M – Micropartículas revestidas de estreptavidina (tampa transparente), 1 frasco, 6,5 ml:
micropartículas revestidas de estreptavidina, 0,72 mg/ml, conservante.
R1 – Anticorpo anti-CK-MB-biotina (tampa cinza), 1 frasco, 10 ml: anticorpo anti-CK-MB
monoclonal biotinilado (ratinho) 1,2 mg/l, tampões de fosfato: 100 mmol/l , pH 7,0;
conservante.
R2 – Anticorpo anti-CK-MB-Ru (tampa preta), 1 frasco, 10,0 ml, anticorpo monoclonal antiCK-MB (ratinho) marcado com complexo de rutênio 1,2 mg/l, tampão fosfato 100 mmol/l,
pH 7,0; conservante.
Reagentes para calibração e controle de qualidade:
Calibrador: E601 CK-MB STAT CalSet.
Preparação: pronto para uso. Estabilidade: a –20°C: 12 semanas.
Elecsys ProCell M: tampão do sistema.
Elecsys CleanCell M: solução de limpeza para célula de leitura.
Elecsys Precicontrol Cardiac 1 e 2: soros controles.
Preparação, estabilidade e conservação: Ver POP Calibradores/Controles.
6.1 Preparo: pronto para uso.
6.2 Estabilidade: estável até o fim do prazo de validade, quando fechado e acondicionado
entre 2 e 8 °C. Após abertura: 12 semanas. No analisador: 8 semanas.
6.3 Armazenamento:
Entre 2 e 8 °C.
7. Equipamentos:
CÓPIA IMPRESSA NÃO CONTROLADA
GRUPO HOSPITALAR CONCEIÇÃO
HOSPITAL NOSSA SENHORA DA CONCEIÇÃO
C.R. LABORATÓRIO DE ANÁLISES CLÍNICAS – SETOR DE BIOQUÍMICA
CK MASSA STAT
SORO / PLASMA
Automação Roche – E601
Elaborado por: Antônio do Amaral Batista
Procedimento Operacional Padrão
Data da 1ª versão: 20.10.2004
Versão/Revisão: 4/0
Data da efetivação: 20.02.2014
POP n.º: B38
Página 3 de 8
Revisado por: Daniela Sandra de Castilhos
Aprovado por: Andréa Cauduro de Castro
E 601(Roche). Para maiores detalhes vide POPE-B20 – E 601.
8. Calibração:
O dispositivo de reagente contém um código de barras com informações específicas para a
calibração do lote de reagentes em questão. A curva principal previamente definida é
adaptada ao analisador através do código de barras do CK-MB STAT CalSet. O software do
analisador verifica automaticamente a validade da curva e alerta para eventuais desvios.
8.1 Frequência das calibrações:
• Uma calibração por lote de reagente dentro de um máximo de 24h após ter sido registrado
no analisador.
• Passado 1 mês (28 dias) quando se utiliza o mesmo lote de reagentes.
• Passados 7 dias quando se utiliza o mesmo dispositivo de reagentes no analisador.
• Sempre que necessário, quando os resultados de ensaios de controle de qualidade
estiverem fora dos limites específicos.
9. Procedimento:
9.1 Fluxo:
As amostras devem ser centrifugadas. O auxiliar de laboratório as leva para a estante da mesa
do E601, onde será realizada a análise pelo bioquímico. Após a manutenção diária do
equipamento, colocar o reagente, com a tampa destravada, no disco dos reagentes do
analisador evitando a formação de espuma. O sistema regula automaticamente a temperatura
do reagente e a abertura dos frascos. Selecionar a tecla REAGENTE SCAN para a leitura do
código de barras do Kit (onde serão lidos os parâmetros específicos do teste) e a ressuspensão
das micropartículas automaticamente antes de ser usada. Após a corrida dos soros controles,
colocar o tubo primário com identificação da amostra por código de barras na rack e autorizar
a corrida na tecla START. Caso não seja possível utilizar tubo primário, transferir a amostra
para copinhos específicos informando a rack e a posição respectivamente na tela
WORKPLACE – Test Selection. O analisador calcula automaticamente a concentração do
analito de cada amostra e envia para o LINK do interfaceamento para ser avaliado e liberado
pelo operador. O E601 é o equipamento de backup. Rotina diária.
9.2 Definição do teste:
Intervalo do teste: 0,100-500 ng/ml
Intervalo pós-diluição: 0,100-1000 ng/ml
Sensibilidade analítica: 0,100 ng/ml
Os valores inferiores ao limite de detecção são liberados como < 0,100 ng/ml.
Os valores superiores ao limite de detecção são liberados como > 500,00 ng/dl.
Nº do teste no E601: 118.
CÓPIA IMPRESSA NÃO CONTROLADA
GRUPO HOSPITALAR CONCEIÇÃO
HOSPITAL NOSSA SENHORA DA CONCEIÇÃO
C.R. LABORATÓRIO DE ANÁLISES CLÍNICAS – SETOR DE BIOQUÍMICA
CK MASSA STAT
SORO / PLASMA
Automação Roche – E601
Elaborado por: Antônio do Amaral Batista
Procedimento Operacional Padrão
Data da 1ª versão: 20.10.2004
Versão/Revisão: 4/0
Data da efetivação: 20.02.2014
POP n.º: B38
Página 4 de 8
Revisado por: Daniela Sandra de Castilhos
Aprovado por: Andréa Cauduro de Castro
Unidade: ng/ml
9.2 Diluição:
NÃO DILUIR, liberar > 500,00 ng/dl.Se necessário diluir manualmente (1:2) com diluente
universal.
10. Controle de qualidade:
10.1 Interno:
Controles: Precicontrol Cardiac 1 e 2.
Frequência: diariamente; a cada troca de lote; após calibração.
Preparo: dissolução em 2 ml de água destilada e armazenamento em –20°C em alíquotas de
250 µl.
10.2 Externo:
Ver tabela de CQE 3.2.3 / 3.2.54 POP B114.
11. Resultados:
11.1 Unidades:
Os resultados são expressos em nanograma por mililitro: ng/ml.
11.2 Cálculos:
O aparelho calcula automaticamente a concentração do analito de cada amostra.
11.3 Critérios de aceitação:
Resultados cujas amostras foram coletadas, preparadas e processadas dentro das condições
estabelecidas, dentro dos limites de normalidade e sem nenhum alarme dos equipamentos
podem ser liberadas diretamente na rede, via interfaceamento. Resultados fora dos limites de
normalidade ou com alarmes do equipamento devem ser liberados após avaliação com
exames anteriores e se necessário repetição do processo anotando nas observações: exame
confirmado após repetição.
12. Valores de referência:
< 5 ng/ml
13. Valores críticos:
N/A
14. Especificações de Desempenho:
14.1Linearidade: Até 500 ng/ml
CÓPIA IMPRESSA NÃO CONTROLADA
GRUPO HOSPITALAR CONCEIÇÃO
HOSPITAL NOSSA SENHORA DA CONCEIÇÃO
C.R. LABORATÓRIO DE ANÁLISES CLÍNICAS – SETOR DE BIOQUÍMICA
CK MASSA STAT
SORO / PLASMA
Automação Roche – E601
Elaborado por: Antônio do Amaral Batista
Procedimento Operacional Padrão
Data da 1ª versão: 20.10.2004
Versão/Revisão: 4/0
Data da efetivação: 20.02.2014
POP n.º: B38
Página 5 de 8
Revisado por: Daniela Sandra de Castilhos
Aprovado por: Andréa Cauduro de Castro
14.2Precisão:
- Fabricante: interensaio: PC Cardíaco 1: 2,30% PC Cardíaco 2: 1,80%
- Validação pelo Laboratório:
- PC Cardíaco 1: 2,20% PC Cardíaco 2: 2,25% (Módulo 1-Célula 1)
- PC Cardíaco 1: 1,69% PC Cardíaco 2: 2,17% (Módulo 1-Célula 2)
- PC Cardíaco 1: 2,09% PC Cardíaco 2: 1,98% (Módulo 2-Célula 1)
- PC Cardíaco 1: 1,99% PC Cardíaco 2: 1,92% (Módulo 2-Célula 2)
15. Limitações do método:
15.1 Interferentes:
• Ligados à amostra:
Icterícia: o ensaio não é afetado pela icterícia (bilirrubina até 34 mg/dl).
Lipemia: o ensaio não é afetado pela lipemia (triglicerídios até 1500 mg/dl).
Hemólise: o ensaio não é afetado pela hemólise (hemoglobina até 1,5 g/dl)
Nos pacientes em tratamento com doses elevadas de biotina (> 5 mg/dia), as amostras só
deverão ser colhidas após intervalo mínimo de 8h da última administração. Títulos
extremamente elevados de anticorpos para estreptavidina e para rutênio podem causar
interferência.
• Ligados ao equipamento de automação:
Aspiração de volumes inadequados de amostra ou reagentes. Antes da determinação,
certifique-se que as amostras dos pacientes, os calibradores e os controles estejam à
temperatura ambiente (20-25°C). Devido a possíveis efeitos de evaporação, as amostras, os
calibradores e os controles colocados no equipamento deverão ser analisados no prazo de
duas horas.
16. Interpretação dos resultados:
A creatina-quinase é uma enzima dimérica que ocorre em quatro formas diferentes: uma
isoenzima mitocondrial e as 3 isoenzimas cistosólicas CK-MM (tipo muscular), CK-BB (tipo
cerebral) e CK-MB. A determinação da massa da CK-MB no soro é um elemento importante
no diagnóstico da isquemia do miocárdio, por exemplo, no infarto agudo do miocárdio
(IAM), na miocardite, etc. A CK-MB é detectável no sangue cerca de 3-8h após o início dos
sintomas cardíacos, podendo continuar detectável por um período de tempo relativamente
longo, fato que está dependente da evolução da doença. A CK-MB pode também surgir
noutros estados clínicos: por exemplo, na rabdomiólise e na apoplexia. No âmbito do
diagnóstico laboratorial, a determinação da CK total, da troponina T e/ou da mioglobina
pode contribuir para a diferenciação destes estados clínicos. O teste Elecsys CK-MB STAT
CÓPIA IMPRESSA NÃO CONTROLADA
GRUPO HOSPITALAR CONCEIÇÃO
HOSPITAL NOSSA SENHORA DA CONCEIÇÃO
C.R. LABORATÓRIO DE ANÁLISES CLÍNICAS – SETOR DE BIOQUÍMICA
CK MASSA STAT
SORO / PLASMA
Automação Roche – E601
Elaborado por: Antônio do Amaral Batista
Procedimento Operacional Padrão
Data da 1ª versão: 20.10.2004
Versão/Revisão: 4/0
Data da efetivação: 20.02.2014
POP n.º: B38
Página 6 de 8
Revisado por: Daniela Sandra de Castilhos
Aprovado por: Andréa Cauduro de Castro
utiliza dois anticorpos monoclonais diferentes dirigidos especificamente contra a CK-MB
humana.
17. Biossegurança:
Usar equipamento de proteção individual (luvas, óculos etc.). Fazer a descontaminação de
bancadas e equipamentos conforme as normas de segurança do laboratório. Vide Manual de
biossegurança.
18. Anexos:
N/A
19. Bibliografia:
Bula do kit CK-MB STAT/ E601 / Roche.
CÓPIA IMPRESSA NÃO CONTROLADA