MINISTÉRIO DA SAÚDE
SECRETARIA DE VIGILÂNCIA EM SAÚDE
INSTITUTO EVANDRO CHAGAS
&
MINISTÉRIO DA CIÊNCIA E TECNOLOGIA
CONSELHO NACIONAL DE DESENVOLVIMENTO
CIENTÍFICO E TECNOLÓGICO
XI SEMINÁRIO INTERNO DO PIBIC-IEC 2006
03 a 05 DE JULHO DE 2006
LIVRO DE RESUMOS
Belém, Pará.
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CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE CEPAS DO VÍRUS TACAIUMA (BUNYAVIRIDAE,
ORTHOBUNYAVÍRUS) ISOLADOS NA AMAZÔNIA BRASILEIRA
Bolsista: SAMIR MANSOUR MORAES CASSEB
Orientador:
MARCIO ROBERTO TEIXEIRA
HEMORRÁGICAS
NUNES
Seção:
ARBOVIROLOGIA
E
FEBRES
Introdução: O vírus Tacaiuma (VTCM) pertence à família Bunyaviridae, gênero Orthobunyavirus. Este vírus é
classificado sorologicamente no grupo Anopheles A. O VTCM é mantido em natureza através de um ciclo
complexo que envolve espécies de mosquitos dos gêneros Haemagogus e Anopheles (Nyssorhynchus) como
principais vetores. Objetivo (s): Caracterizar molecularmente cepas do VTCM isoladas na Amazônia
pertencentes ao acervo da seção de Arbovirologia e Febres Hemorrágicas do Instituto Evandro Chagas / SVS /
MS. Materiais e Métodos: As amostras do VTCM (An73, BeH 411166, BeAr483238, BeAr537334) foram
propagadas em células VERO e o RNA viral foi extraído do fluído das células infectadas através do método
Trizol LS Reagent e alternativamente pelo kit comercial Qiamp Viral RNA mini kit (Qiagen). A amplificação do
genoma das cepas estudadas foi realizada pela técnica de RT-PCR em uma única etapa empregando iniciadores
genéricos para o segmento SRNA dos orthobunyavírus e iniciadores específicos para o gene N do VTCM. Os
produtos de RT-PCR foram clonados e seqüenciados empregando o método de terminação de cadeia por
didesoxirribonucleotideos. As seqüências nucleotídicas foram analizadas com o auxílio dos programas Clustal V,
SeqMan star 5.03 © e Mega 2.1. As árvores filogenéticas foram construídas empregando o método de neighbor
joining (NJ) e máxima parcimônia(MP), implementados nos programas PAUP 4.0 e Mega 2.1. Conjuntamente
realizou-se a análise de bootstrap fixado para 1000 réplicas. Resultados: O segmento SRNA do VTCM foi
determinado em 991 nt, apresentando duas ORFs sobrepostas: uma ORF maior com 706 nt e outra menor com
306 nt que codificam para duas proteínas uma estrutural de nucleocapsídeo (N) e outra não estrutural NSs,
respectivamente. O gene N das cepas do VTCM mostrou baixo grau de divergência nucleotídica entre as mesmas
(0,9% a 2,0%) e diferentes graus de homologia em comparação a determinados vírus representantes dos
sorogrupos Bunyamwera, Califórnia, C e Simbú. Conclusão: o segmento SRNA do VTCM apresenta a mesma
organização genômica dos demais Orthobunyavirus e a análise filogenética comparativa evidenciou que as cepas
do VTCM formam um grupo monofilético à parte, sendo este grupo geneticamente distinto dos demais membros
do gênero.
Palavras-chave: Vírus Tacaiuma, Bunyaviridae, Orthobunyavirus.
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