Relatório Global
Terceira Avalição Externa da
Qualidade
Testes de Carga Viral do HBV
AEQ03 – CV – HBV
1
Ministério da Saúde
Secretaria de Vigilância em Saúde
Departamento de DST, Aids e Hepatites virais
Relatório Global
Avaliação Externa da Qualidade
Testes de Carga Viral do HBV
AEQ03 – CV – HBV
Agosto/2015
Brasília – DF
2
SUMÁRIO
1.
INTRODUÇÃO .............................................................................................................................. 4
2.
OBJETIVOS ................................................................................................................................... 4
3.
OBTENÇÃO DAS AMOSTRAS........................................................................................................ 5
4.
MONTAGEM DOS PAINÉIS........................................................................................................... 5
5.
CRITÉRIOS UTILIZADOS NA ANÁLISE DOS DADOS ....................................................................... 6
6.
ANÁLISE DOS RESULTADOS ......................................................................................................... 8
6.1. Resultados obtidos das quantificações da carga viral .............................................................. 9
6.2. Avaliação das médias gerais das amostras A, B e C ............................................................... 12
6.3. Avaliações das médias gerais das diferenças (A-B e B-C)....................................................... 15
6.4. Avaliação do desvio-padrão das médias individuais (reprodutibilidade) .............................. 18
7.
PONTUAÇÃO DOS LABORATÓRIOS ........................................................................................... 20
8.
PROBLEMAS INFORMADOS PELOS LABORATÓRIOS ................................................................. 23
9.
RESULTADO FINAL ..................................................................................................................... 24
10.
CONCLUSÕES ......................................................................................................................... 25
3
1. INTRODUÇÃO
A Rede Nacional de Laboratórios para Quantificação da Carga Viral do vírus da
hepatite B (HBV) possui atualmente 49 laboratórios distribuídos pelo país. Os testes para a
quantificação da carga viral do HBV visam o monitoramento da evolução clínica das
pessoas infectadas pelo vírus da hepatite B.
Com a finalidade de avaliar o desempenho dos laboratórios e para dar
continuidade ao Programa de Avaliação Externa da Qualidade dos testes de carga viral do
HBV do Departamento de DST, Aids e Hepatites Virais do Ministério da Saúde, em agosto
de 2015 foi elaborado e enviado aos laboratórios o terceiro painel de Carga Viral (AEQ03CV-HBV).
2. OBJETIVOS

Avaliar a variação das médias individuais das amostras A, B e C de cada
laboratório com relação à média geral dos laboratórios participantes.

Avaliar a variação das diferenças de carga viral entre as médias individuais das
amostras A, B e C com relação à média geral das diferenças obtidas por todos os
laboratórios participantes.

Avaliar o grau de reprodutibilidade (desvio padrão das médias individuais) da
quantificação da carga viral das amostras A, B e C testadas em cada triplicata.

Avaliar a contaminação de reações através das três amostras negativas para
HBV.
4
3. OBTENÇÃO DAS AMOSTRAS
A matriz deste painel foi proveniente de uma amostra excedente de plasma
contendo carga viral do HBV DNA de 8,93 log10 UI/mL do Laboratório de Hepatites
Virais/Instituto Oswaldo Cruz/Fiocruz do Rio de Janeiro. Três diluições em série foram
realizadas para a obtenção de plasmas com cargas virais esperadas de 6 log10 UI/mL, 5
log10 UI/mL e 4 log10 UI/mL. Para as diluições seriadas foi utilizado plasma comercial
desfibrinado e negativo para HBV DNA, HCV RNA e HIV RNA, da empresa Basematrix,
SeraCare, Life Sciences.
Após a confecção das diluições seriadas, cada diluição foi testada em triplicata na
plataforma m2000 da Abbott RealTime HBV® (Abbott Molecular Inc., IL, EUA) pelo
Laboratório de Hepatites Virais/Instituto Oswaldo Cruz/Fiocruz.
4. MONTAGEM DOS PAINÉIS
Cada painel foi composto por 12 criotubos contendo 1 mL de volume de amostra.
Para a AEQ de carga viral, cada painel incluiu três diferentes diluições em triplicata (tabela
01). O painel incluiu um adicional de três amostras negativas provenientes de um plasma
comercial. As amostras do painel foram randomizadas através do programa
computacional Graph Pad™, gerando como resultado uma lista contendo números de 1 a
12. As amostras destinadas ao painel foram previamente retiradas do freezer a -70 °C e
descongeladas a temperatura ambiente.
Seguindo a orientação da lista de randomização, foram preparadas as alíquotas
contendo 1 mL de amostra. Para certificar o volume estabelecido, cada criotubo foi
individualmente pesado, registrado e, posteriormente, armazenado no freezer a -70 °C.
Três dias antes do envio dos painéis, as caixas contendo as amostras foram retiradas do
5
freezer a -70 oC e um exemplar de amostra de cada caixa foi colocado em sacos plásticos
com fecho hermético. Os painéis foram enviados dentro de caixas de isopor contendo 1 kg
de gelo reciclável, obedecendo as normas internacionais de biossegurança para transporte
de amostras biológicas. Os painéis foram entregues dentro do prazo limite de 48 horas,
segundo o relatório de operações da empresa responsável pelo transporte.
Tabela 1. Caracterização das amostras da AEQ03-CV- HBV.
Numeração dos Tubos
Carga viral esperada
Painel (análise de dados)
(Log UI/mL)
A
B3(A1), B8(A2) e B10(A3)
6,0
B
B6(B1), B11(B2) e B12(B3)
5,0
C
B4(C1), B7(C2) e B9(C3)
4,0
D
B1(D1), B2(D2) e B5(D3)
Não detectado
Amostra
5. CRITÉRIOS UTILIZADOS NA ANÁLISE DOS DADOS
Para a análise dos dados, elaborou-se um sistema de pontuação com a finalidade
de realizar a avaliação quantitativa do desempenho dos laboratórios e medir a variação
intra-ensaios. Os parâmetros e critérios de pontuação estão descritos na Tabela 2.
Os laboratórios foram codificados aleatoriamente, para resguardar as
identificações originais. Esse procedimento tem como objetivo a garantia da
confidencialidade dos resultados e a completa isenção dos membros do Comitê Assessor
durante o processo de avaliação.
6
Tabela 2. Sistema de pontuação de acordo com os parâmetros analisados na AEQ03-CV- HBV.
Item
Avaliado
Amostra
A
B
C
Amostra
A
B
C
Diferença
A-B
B-C
Amostra
D
Parâmetro
Média Individual da Amostra
Entre a média
geral +/- 1 DP
(inclusive)
Entre a média geral
+/- 1DP e a média
geral +/- 2 DP
Acima da média geral
+/- 2 DP
4 pontos
2 pontos
0 ponto
4 pontos
2 pontos
0 ponto
4 pontos
2 pontos
0 ponto
Desvio Padrão da Média Individual (reprodutibilidade)
Entre 0,0 e 0,15
Entre 0,15 e 0,30
Acima de 0,30
(inclusive)
(inclusive)
4 pontos
2 pontos
0 ponto
4 pontos
2 pontos
0 ponto
4 pontos
2 pontos
0 ponto
Diferença entre as médias individuais das amostras
Entre a média geral da
Média geral +/- 1
Acima da média geral
diferença +/- 1 DP e
DP (inclusive)
da diferença +/- 2 DP
+/- 2 DP
3 pontos
1,5 pontos
0 ponto
3 pontos
1,5 pontos
0 ponto
Contaminação de Amostras Negativas
Reprovação (independente da pontuação obtida com as outras
amostras)
Os critérios descritos na Tabela 2 permitem que um determinado laboratório atinja
a pontuação máxima de 30 pontos. Foram definidas faixas de pontuação para outorga dos
certificados, de acordo com o seguinte:
7

Laboratórios que obtiverem 30 pontos receberão o certificado de excelência;

Laboratórios que obtiverem pontuação entre 21 e 29 pontos receberão o
certificado de aprovação;

Laboratórios que obtiverem pontuação igual ou inferior a 20 pontos, ou obtiverem
contaminação em qualquer uma das amostras negativas, serão reprovados.
6. ANÁLISE DOS RESULTADOS
A Tabela 3 apresenta um resumo da AEQ, detalhando o tempo e as condições do
recebimento das amostras, a pontuação total e as falhas geradas na execução da AEQ.
Essas informações estão detalhadas por laboratório.
Tabela 3. Lista do tempo de entrega, condições de recebimento do material, pontuação, relato de
falhas e desempenho por amostra nos equipamentos Abbott Real Time HBV® (Abbott Molecular
Inc., IL, EUA) do painel AEQ03-CV-HBV por laboratório.
Nº
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
Laboratório
MHB333
RY96YV§
UYWKWW
5QSSIK
EIJKS9
AG8F5W§
FHMMX8
KY91FF
WXYXEQ
JPQ4W4
384U5N
WELEIL
3Y9PBM
M3LNKV
LE4LFG*
MXADW8
S2EUWY
MG4GA3
S2RR34
MPXL45
Condições Pontos Falhas
descongelado
27
1
congelado
21
0
descongelado
30
0
descongelado
29
0
congelado
27
0
congelado
21
0
congelado
18
0
descongelado
26
0
descongelado
25
0
descongelado
0
12
descongelado
30
0
congelado
30
0
descongelado
24
0
congelado
24
0
descongelado
30
0
descongelado
27
0
congelado
25
0
congelado
30
0
congelado
25
0
congelado
27
0
Erro
4448
0
0
0
0
0
0
0
0
sinalização
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
B1
B2
B3
B4
B5
B6
B7
B8
B9 B10 B11 B12
8
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
PWLT21
93UM4K
LHL4A6
81N56P
WXY4E5
N553PW
31JV8N
AFDV2A*
J48VKA
HV55PH
3PEV7H§
QTHMYT
QTHMYY
QF7MMM
5WQKRR
6LT2NT
RJQJAW
W4BTTT
AJQJAW
JC32EB
N7XNJ9
L1XPVE
L1XPRR
H117EE
HX71LJ*
FXYJJJ
ARZD4U
3GJQFG
NNGR3T
descongelado
descongelado
descongelado
descongelado
descongelado
congelado
congelado
descongelado
descongelado
descongelado
congelado
congelado
congelado
congelado
congelado
congelado
congelado
descongelado
descongelado
descongelado
descongelado
congelado
congelado
descongelado
congelado
congelado
descongelado
descongelado
descongelado
27
22
22
27
0
26
22
30
25
26
30
15
30
0
29
27
12
30
23
0
30
24
23
30
30
23
23
30
0
0
0
0
0
12
0
0
0
0
0
1
0
0
12
0
0
0
0
0
12
0
0
0
0
0
0
0
0
12
0
0
0
0
3127
0
0
0
0
0
4442
0
0
calibração
0
0
0
0
0
calibração
0
0
0
0
0
0
0
0
sem resultado
= leitura adequada; = falha ou código de erro; = resultado discordante; *= contaminação; §=
inconsistência nas informações de condições de chegada das amostras.
6.1. Resultados obtidos das quantificações da carga viral
A Tabela 4 apresenta os resultados obtidos, por laboratório, das quantificações da
carga viral para as amostras A, B, C e D. Esses dados são apresentados sob a unidade
UI/mL.
9
Tabela 4. Resultados obtidos das quantificações da carga viral para as amostras A, B, C e D.
Cod
Instituição
A1
A2
A3
B1
B2
B3
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
MHB333
RY96YV
UYWKWW
5QSSIK
EIJKS9
AG8F5W
FHMMX8
KY91FF
WXYXEQ
JPQ4W4
384U5N
WELEIL
3Y9PBM
M3LNKV
LE4LFG
MXADW8
S2EUWY
MG4GA3
S2RR34
MPXL45
PWLT21
93UM4K
LHL4A6
81N56P
WXY4E5
N553PW
31JV8N
AFDV2A
J48VKA
HV55PH
3PEV7H
QTHMYT
QTHMYY
QF7MMM
5WQKRR
6LT2NT
4753450
13271901
5235654
7714029
5801718
9749741
3869803
3949666
7430055
NR
8923728
9974571
10924223
4566777
5250130
7092580
6235297
6819123
4586278
9702718
9140815
6770258
3504524
7160089
NR
5438114
5850530
7886503
4991820
4437453
9462110
1443818
7813746
NR
6492250
5291961
4467754
8950954
4786301
7440089
6834935
9889468
2941560
4786301
4669866
NR
9462579
7413923
9648802
4566777
5250130
12615675
15678519
7476493
5175940
3280336
9623565
7285578
3626648
5487156
NR
4395765
5973315
6252865
4819957
4532414
6823930
1104507
7234525
NR
5459724
4048607
4953993
14040120
5345203
6723716
5884993
12776458
2881671
4201267
4604608
NR
9189204
10428484
11248042
4769046
6104161
5393259
4786301
6628728
5139245
7489747
7718727
8325092
4046781
5981772
NR
4652412
5891175
6708511
4248802
4728478
7952082
1582394
7034717
NR
5731041
4754362
409437
1032935
487237
512327
427465
726387
280027
396520
373462
NR
652006
665538
939147
329428
627821
527565
556701
640947
399590
472324
687140
780223
329732
522335
NR
441535
629546
564115
429691
394222
632553
94995
669148
NR
473151
481541
453998
1116027
436291
975130
518152
796778
304042
375341
406365
NR
861394
722114
873007
403269
404966
535028
493003
500279
487677
357025
624505
845228
310015
411976
NR
417178
544360
592585
397816
429066
664108
115725
732914
NR
403453
447350
395578
796249
445420
613850
564408
1533243
310361
418895
415035
NR
733125
795208
981213
388965
504229
620052
455725
592928
527377
510111
601965
744638
341222
479144
NR
388613
567449
556235
355625
453990
790216
107090
673849
NR
476441
465687
C1
C2
C3
D1
102832
39770
55638
37370
75608
28746
31095
31819
NR
52400
57144
79567
31496
39430
49130
43083
46691
35820
55132
49790
73122
25962
52290
NR
37674
167781
55766
40515
33100
70257
10832
63650
NR
39884
39631
38570
74932
37633
43197
79534
76692
24891
37682
29449
NR
58062
59745
74506
32654
44300
42692
39260
44433
33598
39405
47641
75601
24916
43684
NR
32003
53906
53087
35965
35772
49622
15962
54563
NR
43946
39631
38305
99979
41739
46436
42787
58942
24891
40082
39298
NR
59790
67272
71834
32419
34147
47103
43083
45387
35064
27387
46261
86966
24577
37291
NR
32692
56193
50182
39672
34048
ND
ND
ND
ND
ND
ND
ND
ND
ND
NR
ND
ND
ND
ND
25
ND
ND
ND
ND
ND
ND
ND
ND
ND
NR
ND
ND
48
ND
ND
ND
ND
ND
NR
ND
ND
8113
53429
NR
30230
41255
10
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
RJQJAW
W4BTTT
AJQJAW
JC32EB
N7XNJ9
L1XPVE
L1XPRR
H117EE
HX71LJ
FXYJJJ
ARZD4U
3GJQFG
NNGR3T
2384765
6525471
3916884
NR
8665779
12564549
10810904
8749244
5420512
12380105
11793495
6250329
NR
1423183
7151276
5686440
NR
7093695
11593592
9612910
7259127
5200282
11316881
9572260
5355515
NR
2352163
6479664
5045571
NR
7142829
10934909
11549243
7855794
4988999
11660736
10160339
5134531
NR
200151
558335
452006
NR
702461
803921
752727
622716
472334
806396
630396
427340
NR
242691
513077
452006
NR
642171
1038367
792416
600754
499192
908960
888183
430352
NR
193381
656539
478170
NR
480557
910320
798254
659538
513188
922666
1144329
481532
NR
11115
42083
34932
NR
45973
77464
74003
53037
47261
71922
61625
38424
NR
15574
52724
29300
NR
56551
65474
59376
48310
40593
74108
45400
44844
NR
12668
37863
36183
NR
55392
74139
60254
57810
44718
57461
59815
34582
NR
ND
ND
ND
NR
ND
ND
ND
ND
25
ND
ND
ND
NR
Legenda: NR – Não Reportado; ND – Não Detectado.
11
6.2. Avaliação das médias gerais das amostras A, B e C
Nas Tabelas 5.1 e 5.2 são apresentados os resultados para as médias gerais dos resultados em
Log UI/mL e os desvios-padrão para os laboratórios participantes da AEQ03-CV-HBV antes e após a
depuração. Isto significa que os laboratórios cujas médias individuais estavam fora da faixa aceitável de
+/- 2 desvios-padrão, tiveram suas médias excluídas e foram então calculadas novas médias e desviospadrão, seguindo este critério de exclusão.
Tabela 5.1. Média geral, Desvio-Padrão e Média das diferenças entre as amostra A, B e C da AEQ03-CV-HBV de
todos os Laboratórios (sem depuração).
Amostra
N
Média
Desvio Padrão
A
44
6,79
0,19
B
44
5,72
0,18
C
44
4,64
0,18
Tabela 5.2. Média geral, Desvio-Padrão e Média das diferenças entre as amostra A, B e C da AEQ03-CV-HBV após a
depuração.
Amostra
N
Média
Desvio Padrão
A
41
6,83
0,14
B
41
5,75
0,13
C
39
4,68
0,12
As figuras 1.1, 1.2 e 1.3, ilustram respectivamente, para as amostras A, B e C, a distribuição dos
valores das médias individuais com relação ao valor da média geral, por laboratório participante da
AEQ03-CV-HBV. Nos gráficos são representados com
padrão da média geral, com
padrão, e com
os laboratórios que apresentaram até um desvio-
os laboratórios que apresentaram médias dentro do segundo desvio-
os laboratórios que apresentaram valores de média superiores a dois desvios-padrão.
12
Média da Amostra A
3,00
Índice de Desvio Padrão (SD) da amostra
2,00
1,00
0,00
-1,00
Media
-2,00
Am
-3,00
-4,00
-5,00
-6,00
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52
Código do Laboratório
Figura 1.1. Distribuição dos valores das médias individuais com relação ao valor da média geral para a amostra
A.
13
Média da Amostra B
3
Índice de Desvio Padrão (SD) da amostra
2
1
0
-1
Media
-2
Bm
-3
-4
-5
-6
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52
Código do Laboratório
Figura 1.2. Distribuição dos valores das médias individuais com relação ao valor da média geral para a amostra B.
14
Média da Amostra C
3,00
índice de Desvio Padrão (SD) da amostra
2,00
1,00
0,00
-1,00
Media
-2,00
Cm
-3,00
-4,00
-5,00
-6,00
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52
Código do Laboratório
Figura 1.3. Distribuição dos valores das médias individuais com relação ao valor da média geral para a
amostra C.
6.3. Avaliações das médias gerais das diferenças (A-B e B-C)
Nas Tabelas 6 e 7 são apresentadas as médias gerais das diferenças e os respectivos desviospadrão para os laboratórios participantes da AEQ03-CV-HBV, antes e após a exclusão dos laboratórios
cujas diferenças entre médias individuais das amostras estavam fora da faixa aceitável de +/- 2 DP.
15
Tabela 6. Média geral e desvios-padrão das diferenças entre amostras da AEQ03-CV-HBV (sem depuração).
Amostra
N
Média
Desvio Padrão
A-B
44
1,07
0,05
B-C
44
1,08
0,06
Tabela 7. Média geral e desvios-padrão das diferenças entre amostras da AEQ03-CV-HBV (com depuração).
Amostra
N
Média
Desvio Padrão
A-B
41
1,07
0,04
B-C
40
1,08
0,04
As figuras a seguir ilustram as diferenças das médias das amostras A-B, B-C e a distribuição dos
valores dessas diferenças com relação ao valor da média geral das diferenças por laboratório.
16
Média A-B
índice de Desvio Padrão(SD) da diferença A-B
4,00
3,00
2,00
1,00
Media
AmBm
0,00
-1,00
-2,00
-3,00
0 2 4 6 8 10121416182022242628303234363840424446485052
Código do Laboratório
Figura 2.1. Distribuição das médias individuais das amostras A e B (A-B) em relação ao valor da média geral das
diferenças.
17
Média B-C
Índice de Desvio Padrão(SD) da diferença B-C
4,00
3,00
2,00
1,00
0,00
Media
-1,00
BmCm
-2,00
-3,00
-4,00
-5,00
-6,00
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52
Código do Laboratório
Figura 2.2. Distribuição das médias individuais das amostras B e C (B-C) com relação ao valor da média geral das
diferenças.
6.4. Avaliação do desvio-padrão das médias individuais (reprodutibilidade)
Este parâmetro foi analisado para as amostras A, B e C testadas em triplicata. As figuras 3.1, 3.2 e
3.3 apresentam as distribuições dos desvios-padrão obtidos por laboratório.
18
Desvio Padrão da Amostra A
Desvio Padrão da Amostra A
0,35
0,30
0,25
0,20
Asd
0,15
0,3Log
0,10
0,05
0,00
1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49
Código do Laboratório
Figura 3.1. Desvio-padrão da média individual (reprodutibilidade) com relação à amostra A.
Desvio Padrão da Amostra B
0,35
Desvio Padrão da Amostra B
0,30
0,25
0,20
Bsd
0,15
0,3Log
0,10
0,05
0,00
1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49
Código do Laboratório
Figura 3.2. Desvio-padrão da média individual (reprodutibilidade) com relação à amostra B.
19
Desvio Padrão da Amostra C
0,35
Desvio Padrão da Amostra C
0,30
0,25
0,20
Csd
0,15
0,3Log
0,10
0,05
0,00
1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49
Código do Laboratório
Figura 3.3. Desvio-padrão da média individual (reprodutibilidade) com relação à amostra C.
7. PONTUAÇÃO DOS LABORATÓRIOS
A Tabela 8 apresenta a pontuação das amostras A, B e C de cada laboratório, de acordo com os
parâmetros analisados na AEQ03-CV-HBV, onde Am, Bm e Cm representam as médias individuais das
amostras A, B e C, respectivamente, e Asd, Bsd e Csd representam os desvios padrão das médias
individuais das amostras A, B e C, respectivamente.
20
Tabela 8. Pontuação geral entre as amostra A, B, C e D da AEQ03-CV-HBV.
Cod
Instituição
Res-Am
Res-Asd
Res-Bm
Res-Bsd
Res-Cm
Res-Csd
Res-D
Res(AmBm)
Res(BmCm)
Pontos
1
MHB333
2
4
4
4
4
4
0
3
2
27
2
RY96YV
2
4
2
4
0
4
0
3
2
21
3
UYWKWW
4
4
4
4
4
4
0
3
3
30
4
5QSSIK
4
4
4
4
4
4
0
3
2
29
5
EIJKS9
4
4
4
4
4
2
0
3
2
27
6
AG8F5W
2
4
2
2
2
4
0
3
2
21
7
FHMMX8
0
4
0
4
0
4
0
3
3
18
8
KY91FF
2
4
2
4
4
4
0
3
3
26
9
WXYXEQ
4
4
2
4
2
4
0
2
3
25
10
JPQ4W4
0
0
0
0
0
0
1
0
0
0
11
384U5N
4
4
4
4
4
4
0
3
3
30
12
WELEIL
4
4
4
4
4
4
0
3
3
30
13
3Y9PBM
2
4
2
4
2
4
0
3
3
24
14
M3LNKV
2
4
2
4
2
4
0
3
3
24
15
LE4LFG
4
4
4
4
4
4
1
3
3
30
16
MXADW8
4
2
4
4
4
4
0
2
3
27
17
S2EUWY
4
2
4
4
4
4
0
0
3
25
18
MG4GA3
4
4
4
4
4
4
0
3
3
30
19
S2RR34
4
4
4
4
2
4
0
2
2
25
20
MPXL45
4
2
4
4
4
4
0
2
3
27
21
PWLT21
4
4
4
4
4
4
0
2
2
27
22
93UM4K
4
4
2
4
2
4
0
0
2
22
23
LHL4A6
2
4
2
4
0
4
0
3
3
22
24
81N56P
4
4
4
4
4
4
0
2
2
27
25
WXY4E5
0
0
0
0
0
0
1
0
0
0
26
N553PW
2
4
4
4
2
4
0
3
3
26
27
31JV8N
4
4
4
4
2
2
0
2
0
22
28
AFDV2A
4
4
4
4
4
4
1
3
3
30
29
J48VKA
2
4
2
4
4
4
0
3
2
25
30
HV55PH
2
4
4
4
2
4
0
3
3
26
31
3PEV7H
4
4
4
4
4
4
0
3
3
30
32
QTHMYT
0
4
0
4
0
4
0
3
0
15
21
33
QTHMYY
4
4
4
4
4
4
0
3
3
34
QF7MMM
0
0
0
0
0
0
1
0
0
0
35
5WQKRR
4
4
4
4
4
4
0
2
3
29
36
6LT2NT
2
4
4
4
4
4
0
2
3
27
37
RJQJAW
0
4
0
4
0
4
0
0
0
12
38
W4BTTT
4
4
4
4
4
4
0
3
3
30
39
AJQJAW
2
4
4
4
2
4
0
2
2
23
40
JC32EB
0
0
0
0
0
0
1
0
0
0
41
N7XNJ9
4
4
4
4
4
4
0
3
3
30
42
L1XPVE
2
4
2
4
2
4
0
3
3
24
43
L1XPRR
2
4
2
4
2
4
0
2
3
23
44
H117EE
4
4
4
4
4
4
0
3
3
30
45
HX71LJ
4
4
4
4
4
4
1
3
3
30
46
FXYJJJ
2
4
2
4
2
4
0
2
3
23
47
ARZD4U
2
4
2
4
4
4
0
3
0
23
48
3GJQFG
4
4
4
4
4
4
0
3
3
30
49
NNGR3T
0
0
0
0
0
0
1
0
0
0
30
22
8. PROBLEMAS INFORMADOS PELOS LABORATÓRIOS
Alguns laboratórios relataram problemas durante a execução da AEQ03-CV-HBV,
os quais foram registrados no Qualilab. Seguem as observações:

O equipamento m2000sp apresentou erro mecânico código 3127 pelo laboratório
WXY4E5, que impossibilitou a realização do teste;

O laboratório MHB333 reportou o erro 4448 (erro de ruído/interferência de sinal)
na execução da leitura da amostra B4 no equipamento m2000rt, no qual não
apresentou resultado para esta amostra, porém não sendo desqualificado;

O laboratório 3PEV7H relatou erro 4442 (erro de controle interno) na leitura da
amostra B9, na qual não inseriu o resultado referente a esta amostra, porém não
sendo desqualificado;

O laboratório JPQ4W4 justificou o erro como sendo do controle interno. Porém, ao
avaliar o resultado constante no documento gerado pelo equipamento m2000rt,
nota-se que os erros ocorreram nos controles externos (4440: A concentração do
controle positivo está fora do intervalo; 4447: Nível insuficiente do corante de
referência do ensaio), o que geraram a sinalização (código de letras) nas amostras
da AEQ;

Os laboratórios QF7MMM e JC32EB relataram problemas na calibração de ensaio,
não emitindo resultados. O laboratório QF7MMM reportou erro na calibração,
enquanto que o laboratório JC32EB reportou uso de calibrador vencido.
Comentários: Na confecção deste painel com plasma comercial desfibrinado não houve
nenhum relato de fibrina pelos laboratórios e nenhum laboratório relatou volume
insuficiente. Apesar do descongelamento não ser uma variável que afete os resultados, foi
observado uma inconsistência dos dados em relação à condição de chegada das amostras
com o tempo de entrega. Assim, tivemos, por exemplo, relato por um dos laboratórios
23
(3GJQFG) sobre a chegada de um painel descongelado com tempo de entrega de 3 horas e
50 minutos, enquanto que em outro laboratório (RJQJAW), o painel foi recebido ainda
congelado com tempo de entrega de 49 horas e 25 minutos. Adicionalmente, três
laboratórios (RY96YV, AG8F5W, 3PEV7H) mencionaram ainda que receberam o material
em temperatura ambiente, entretanto inseriram a informação no Qualilab relatando as
condições de chegada do material como congelado.
9. RESULTADO FINAL
Na Tabela 9 é apresentada a classificação geral dos laboratórios com relação à
pontuação alcançada.
Tabela 9. Classificação geral da AEQ03-CV-HBV.
Laboratórios Participantes do Programa
N=49
Resultado Pontuação
Nº de
Laboratórios
%
5
10,2
44
89,8
Nº de Laboratórios participantes que
obtiveram pontuação máxima
10
22,73
Nº de Laboratórios participantes com até
70% da pontuação máxima
28
63,64
Nº de Laboratórios participantes com
Pontuação inferior a 70% da pontuação
máxima
3
6,82
Nº de Laboratórios com contaminação
3
6,82
Nº de Laboratórios que não participaram
da análise da AEQ03-CV-HBV
Nº de Laboratórios participantes da
AEQ03-CV-HBV
24
10.CONCLUSÕES
Analisando o conjunto dos resultados, dos 44 laboratórios participantes do
Programa de Avaliação Externa da Qualidade (AEQ03-CV-HBV) para Carga Viral do HBV, 38
(86%) laboratórios foram aprovados, desses, 10 (26,3%) obtiveram pontuação máxima e
foram aprovados com excelência.
Dentre os 6 (13,6%) laboratórios reprovados, três obtiveram a pontuação inferior
à mínima aceitável (21 pontos) e três obtiveram pontuação máxima de 30, porém foram
reprovadas por contaminação (vide Tabela 8).
Tabela 10. Resultado final da AEQ03-CV-HBV dos laboratórios.
Resultado Final dos Laboratórios
Laboratórios aprovados com excelência. Pontuação = 30
UYWKWW, 384U5N, WELEIL, MG4GA3, 3PEV7H,
QTHMYY, W4BTTT, N7XNJ9, H117EE, 3GJQFG
N=10
Laboratórios aprovados. Pontuação entre 21 e 29
N=28
RY96YV, AG8F5W, 93UM4K, 31JV8N, LHL4A6,
L1XPRR, FXYJJJ, AJQJAW, ARZD4U, 3Y9PBM,
M3LNKV, L1XPVE, WXYXEQ, J48VKA, S2EUWY,
S2RR34, KY91FF, N553PW, HV55PH, MHB333,
EIJKS9, MXADW8, MPXL45, 6LT2NT, PWLT21,
81N56P, 5QSSIK, 5WQKRR
Laboratórios reprovados. Pontuação< 21
RJQJAW, QTHMYT, FHMMX8
N=3
Laboratórios reprovados por contaminação
LE4LFG, AFDV2A, HX71LJ
N=3
25
Os Laboratórios WXY4E5, JPQ4W4, QF7MMM e JC32EB não conseguiram obter os
resultados por falhas/erros técnicos e não participaram da avaliação da AEQ03-CV-HBV. O
laboratório NNGR3T, não liberou os resultados e nem justificou o motivo no sistema
QUALILAB.
O Laboratório de Hepatites Virais do Instituto Oswaldo Cruz/Fiocruz continuará
utilizando plasma comercial no intuito de eliminar a presença de coágulos de fibrina, já
que estes podem prejudicar o processo de pipetagem do equipamento. O controle
individual de pesagem de cada amostra após a confecção dos painéis é uma etapa
importante para assegurar o volume necessário para realização dos testes.
Recomendamos que os laboratórios que obtiveram pontuação inferior a 21,
verifiquem com atenção a rotina de trabalho, com o intuito de identificar possíveis
problemas de processamento como, por exemplo: calibração de pipetas, manutenção de
equipamento e outros. Os laboratórios que apresentaram contaminação necessitam
realizar medidas corretivas de descontaminação.
Em relação ao envio de amostras, seguindo manual de instruções, o
descongelamento não é uma variável de impacto nos resultados, uma vez que se
constatou que as mesmas podem ser mantidas a 42 °C por 7 dias (de Almeida et al., 2015)
ou até a 37 oC por 14 dias (Lee et al., 2002) sem alterações nas cargas virais do vírus da
hepatite B. Porém, verificou-se que houve registros incoerentes por diversos laboratórios.
Isto ressalta a necessidade de um cuidado e veracidade das informações reportadas no
sistema.
Lembramos que os resultados das Avaliações Externas da Qualidade dos testes de
carga viral são absolutamente confidenciais.
26
A adesão dos laboratórios da Rede Nacional de Carga Viral ao Programa de
Avaliação Externa da Qualidade reflete o compromisso dos laboratórios que a compõem e
demonstra o empenho das equipes em atingir um elevado nível de proficiência. Somente
laboratórios com comprovada qualidade podem garantir resultados confiáveis aos
usuários do Sistema Único de Saúde.
27
PROGRAMA DE AVALIAÇÃO EXTERNA DA QUALIDADE (AEQ) DOS TESTES DE CARGA
VIRAL DO HBV DO DEPARTAMENTO DE DST, AIDS E HEPATITES VIRAIS DO MINISTÉRIO
DA SAÚDE
PRODUÇÃO DO PAINEL
Lia Laura Lewis-Ximenez - Laboratório de Hepatites Virais – Instituto Oswaldo Cruz –
Fundação Oswaldo Cruz – Rio de Janeiro - FIOCRUZ –RJ
ANÁLISE DOS RESULTADOS
Orlando C. Ferreira Jr - Universidade Federal do Rio de Janeiro
ELABORAÇÃO DO RELATÓRIO FINAL
Laboratório de Hepatites Virais – Instituto Oswaldo Cruz –Fundação Oswaldo Cruz – Rio de
Janeiro - FIOCRUZ –RJ
Lia Laura Lewis-Ximenez
Juliana Gil Melgaço
MEMBROS
DA
COMISSÃO
TÉCNICA
ASSESSORA
PARA
O
MONITORAMENTO
LABORATORIAL
Maria Luiza Bazzo - Coordenadora do Programa AEQ - Universidade Federal de Santa
Catarina – UFSC
Milena Brunialti - Universidade Federal de São Paulo – UNIFESP-SP
Maria Cecilia Araripe Sucupira - Universidade Federal de São Paulo – UNIFESP-SP
Mônica Barcellos Arruda - Universidade Federal do Rio de Janeiro – UFRJ-RJ
MINISTÉRIO DA SAÚDE
SECRETARIA DE VIGILÂNCIA EM SAÚDE
DEPARTAMENTO DE DST, AIDS E HEPATITES VIRAIS
Diretor do Departamento de DST/AIDS e Hepatites Virais
Fábio Mesquita
28
Diretora Adjunta do Departamento de DST/AIDS e Hepatites Virais
Adele Schwartz Benzaken
Coordenação de Laboratório:
Miriam Franchini (Coordenadora Geral de Laboratório)
Ana Flávia Nacif Coelho Pires
Bruna Lovizutto Protti Wöhlke
Daniela Cristina Soares
Igor Massaki Kohiyama
Mariana Villares Martins
Nazle Mendonça Collaço Véras
Pâmela Cristina Gaspar
Regina Aparecida Comparini
Roberta Barbosa Lopes Francisco
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