UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL MAPA CONCEPTUAL :TÉCNICAS PARA EL AISLAMIENTO, IDENTIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DE CEPAS DE RALSTONIA SOLANACEARUM RELACIONADAS A MOKO DEL PLÁTANO CURSO : BIOTECNOLOGIA AMBIENTAL DOCENTE : HEBERT HERNAN SOTO GONZALES ESTUDIANTE :Marcell Gustavo Morón Zeballos CICLO :S E P T I M O Mayo, 2021 ILO-PERU TÉCNICAS PARA EL AISLAMIENTO, IDENTIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DE CEPAS DE RALSTONIA SOLANACEARUM RELACIONADAS A MOKO DEL PLÁTANO El aislamiento de R. solanacearum es usualmente difícil, aún sobre medios semiselectivos, debido a su crecimiento lento y a la frecuente contaminación con bacterias Pseudomonas, Klebsiella y Erwinia Ralstonia solanacearum es uno de los fitopatógenos más destructivos en la agricultura INFORMACIÓN COMPLETA El plátano es la fruta tropical de mayor producción a nivel mundial. En el 2013 se reportó una producción de alrededor de 17 millones de toneladas (FAO, 2014). El Moko bacteriano es uno de los problemas fitosanitarios más importantes en la agroindustria platanera en países tropicales, siendo la principal enfermedad bacteriana en este cultivo ELISA= ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa SMSA=cultivo semiselectivo South África http:// www.s cielo.o rg.mx/ scielo. php?scr ipt=sci _arttex t&pid= S0185330920 170003 00509 Comparación esquemática del protocolo generalmente usado para el aislamiento de R. solanacearum relacionadas a la enfermedad Moko (Panel A), y el protocolo recomendado en el presente estudio (panel B). El panel A se basa en Álvarez-Restrepo et al. (2008); Dööolotkeldieva y Bobusheva (2016); Hong et al. (2012); Sánchez-Pérez et al. (2008) MUESTREO DE TEJIDOS vegetales Se realizaron muestreos en Tabasco (20-24 de octubre, 2014) con apoyo del personal del Comité Local de Sanidad Vegetal de Tabasco (CESVETAB) DETECCIÓN DE R solanacearum por pruebas inmunológicas Para la detección de R. solanacearum se utilizó el ensayo ELISA (“Enzyme-Linked Immunosorbent Assay”) (Agdia®, N.C. SRP 33900), en placa de 96 pozos AISLAMIENTO Y CONFIRMACIÓN DE LA IDENTIDAD R. solanacearum Mediante el uso secuencial de 2 medios de cultivo, el SMSA y el B-King, se logró aislar 25 cepas de R. solanacearum de las 28 muestras positivas. Los síntomas incluyen hojas amarillas y flácidas que finalmente colapsan y quedan adheridas a la planta; los frutos son chiclosos, de aspecto oscuro y tendiendo a degradarse El aislamiento e identificación de R. solanacearum es difícil, como han mencionado otros autores La modificación del procedimiento citado en la literatura para el aislamiento de R. solanacearum facilitó aislar la bacteria a partir de plátanos enfermos: