3° Colegial – Biologia Molecular Professor Fernando Borella 1. (Unifesp) Alguns antibióticos são particularmente usados em doenças causadas por bactérias. A tetraciclina é um deles; sua ação impede que o RNA transportador (RNA t ) se ligue aos ribossomos da bactéria, evitando a progressão da doença. a) Que processo celular é interrompido pela ação da tetraciclina? Qual é o papel do RNA t nesse processo? b) Em que local, na bactéria, ocorre a síntese do RNA t ? Cite dois outros componentes bacterianos encontrados nesse mesmo local. 2. (Ufg) Os esquemas I e II abaixo mostram as etapas da expressão gênica em dois organismos distintos, um procarioto e um eucarioto. a) Indique, com justificativa, qual esquema se refere ao eucarioto. Em qual ou quais compartimentos celulares ocorrem as etapas indicadas por 1 e 2 no esquema I, e as etapas 3 e 5 do esquema II? b) A remoção diferencial de íntrons do RNA mensageiro pode resultar na produção de diferentes peptídeos. Qual das etapas indicadas nos esquemas corresponde ao processo de remoção de íntrons? Explique por que a remoção diferencial de introns pode acarretar a produção de diferentes peptídeos. mensageiro (RNAm). Já no caso dos eucariotos, frequentemente essa técnica não é adequada para determinar a sequência completa dos nucleotídeos do gene. Explique por que, no caso dos eucariotos, nem sempre é possível obter a sequência de um gene a partir do mRNA. 5. (Ufrj) Usando a tabela do código genético, é possível deduzir a sequência de aminoácidos de uma proteína a partir da sequência de nucleotídeos do RNA mensageiro que a codifica. Indique se é possível, dada a sequência de aminoácidos de uma proteína de um eucarioto, deduzir a sequência de seu gene. Justifique sua resposta. 6. (Unesp) Um cientista analisou a sequência de bases nitrogenadas do DNA de uma bactéria e verificou que era formada pelos códons AGA-CAA-AAA-CCG-AAT. Verificou também que a sequência de aminoácidos no polipeptídio correspondente era serina-valina-fenilalanina-glicina-leucina. Ao analisar o mesmo segmento de DNA de outra bactéria da mesma colônia, verificou que a sequência de bases era AGA-CAA-AAG-CCG-AAT, porém não verificou qualquer alteração na composição de aminoácidos da cadeia polipeptídica. Como você explica o fato de bactérias de uma mesma colônia apresentarem, para o mesmo segmento de DNA, diferentes sequências de bases e o fato dessas bactérias apresentarem a mesma composição de aminoácidos na cadeia polipeptídica correspondente? 7. (Ufu) Analise a figura a seguir que representa a ocorrência de importantes processos biológicos nas células. 3. (Ufg) Em setembro de 1957, após os primeiros experimentos que culminaram na determinação da estrutura tridimensional do DNA, o cientista Francis Crick fez a seguinte declaração: É difícil resistir à conclusão de que o DNA é material genético. Se este for o caso, nosso problema é aprender como o DNA reproduz a si mesmo [....]. A ideia básica é que duas cadeias de DNA, que se encaixam como uma mão em uma luva, são separadas de alguma forma e a mão então serve como molde para uma nova luva, enquanto a luva atua como molde para uma nova mão. Consequentemente, teremos duas mãos usando luvas onde havia apenas uma. Em termos químicos, imaginávamos que os monômeros fornecidos pela célula se alinham ao longo da cadeia molde com bases complementares formando pares. Tendo como base a declaração de Crick, explique o processo de duplicação semiconservativa do DNA. 4. (Ufrj) A sequência de DNA de um gene dos procariotos pode ser deduzida a partir da sequência de seu RNA Faça o que se pede. a) Quais processos biológicos estão representados na figura? b) Identifique as estruturas assinaladas pelos números I, II, III, IV. c) Quais são as diferenças entre as estruturas assinaladas pelos números I e II? d) Que tipo(s) de organismo(s), classificado(s) quanto à presença do envoltório nuclear, está/estão representado(s) no processo esquematizado na figura acima? Justifique. 8. (Ufrj) Se extrairmos o DNA total de células de músculo, baço e rim de um mesmo indivíduo, verificaremos que os tecidos apresentam genomas idênticos. Os RNA mensageiros das células desses três tecidos serão os mesmos? Justifique sua resposta. 9. (Ueg) O esquema a seguir é uma representação do código genético. 1: a) O processo interrompido pelo antibiótico é a tradução do RNAm, isto é, a síntese das proteínas bacterianas. O RNA t conduz os aminoácidos ativados aos ribossomos. b) O RNA t é transcrito a partir do DNA disperso no citosol da bactéria. No plamídeos. citosol bacteriano encontram-se ribossomos e 2: a) O esquema II refere-se a um organismo eucarioto. Nos procariotos (esquema I) o genoma não contém íntrons. Nos organismos procariotos a transcrição (1) e a tradução (2) ocorrem simultaneamente no citoplasma celular. Em eucariotos, a transcrição (3) ocorre no núcleo e a tradução (5) se passa no citoplasma. b) A remoção diferencial dos íntrons ocorre na etapa 4. O agrupamento alternativo dos íntrons (regiões codificantes) pode dar origem a diferentes tipos de RNAs mensageiros que serão traduzidos em peptídeos distintos. 3: Primeiramente, ocorre o rompimento das pontes de hidrogênio que ligam as bases nitrogenadas, separando as duas fitas da molécula de DNA. Em seguida, ocorrerá a síntese de novas fitas, a partir de nucleotídeos livres na célula, tendo como molde as fitas originais. Formam-se então duas novas moléculas de DNA iguais entre si quanto à sequência de bases; nesse caso cada molécula contém uma fita original e uma fita recém-sintetizada. De acordo com o esquema apresentado, responda ao que se pede. a) O que é o código genético? b) Explique por que se diz que ele é degenerado. 10. (Ufu) Em 1958, Meselson e Stahl cultivaram bactérias 'Escherichia coli' por 14 gerações em meio de cultura, onde 15 a única fonte de nitrogênio era o N (isótopo pesado). No desenho a seguir, a seta do Tubo 1 indica a posição (Ill) 15 ocupada pelo DNA com N após ultracentrifugação em meio de cloreto de césio. Uma amostra de bactérias contendo 15 DNA com N foi transferida para meio de cultura onde a 14 única fonte de nitrogênio era o N (isótopo normal). Após cada geração, foram retiradas amostras de DNA e verificada(s) a(s) posição(ões) ocupada(s) por estas amostras em meio de cloreto de césio. A seta do Tubo 2 indica a posição (II) ocupada pelo DNA, após a primeira 14 geração em meio com N. 4: Nos eucariotos, logo após a transcrição, ocorre um processo denominado splicing do RNA, que consiste na eliminação das sequências não codificantes (íntrons) e na junção das extremidades remanescentes (éxons) que comporão o RNAm. A dedução da sequência do gene não é possível porque o caminho inverso produzirá informação incompleta, isto é, sem as sequências dos íntrons. 5: Não. O código genético é degenerado, isto é, podem haver códons diferentes para um determinado aminoácido. 6: A diferença observada na sequência de bases nitrogenadas do DNA de bactérias distintas deve-se ao fato de que ocorreu mutação por transição, isto é, a troca de uma adenina (A) por guanina (G) no terceiro códon. Em razão da degeneração do código genético, diferentes sequências de nucleotídeos especificam o mesmo aminoácido durante a síntese ribossômica das proteínas celulares. 7: a) Síntese de Proteínas ou Transcrição e Tradução. b) I. DNA ou Ácido desoxirribonucleico ou ADN. II. RNA mensageiro ou mRNA. III. Ribossomo ou Subunidade maior do Ribossomo. IV. Cadeia polipeptídica ou polipeptídeo ou proteína ou cadeia de aminoácidos ou fita de aminoácidos ou sequência de aminoácidos. c) Observe a tabela: DNA RNA Fita ou cadeia dupla de nucleotídeos Açúcar: Desoxirribose Fita ou cadeia nucleotídeos Açúcar: Ribose A, T, C. G A, U, C. G Carbono 2’ – H Carbono 2’ – OH simples de d) Procarionte ou Procarioto ou Organismos/Seres/Indivíduos com ausência de envoltório/membrana nuclear Justificativas: 1) O DNA não está envolto pela membrana nuclear e a síntese de mRNA ocorre no citoplasma com uma concomitante síntese de proteínas. 2) Transcrição simultânea à tradução. 3) Ausência de processamento do RNA. 8: Não, porque a diferenciação celular envolve a expressão (transcrição) e a inativação de diferentes genes nos diversos órgãos. Com relação aos dados apresentados, responda: 14 a) Após a segunda geração em meio com N, o DNA extraído das bactérias irá ocupar qual(is) posição(ções) no Tubo 3? b) Qual conclusão pode ser tirada a partir da realização deste experimento? c) Qual é a principal enzima envolvida no processo descrito? 9: a) É a correspondência entre as trincas de bases dos códons e os aminoácidos por eles codificados. b) Por que um único aminoácido pode ser codificado por mais de um códon. 10: a) O DNA vai ocupar as posições I e II do tubo 3. b) A duplicação do DNA é semiconservativa. c) DNA - polimerase.