Instituto Politécnico de Coimbra – Escola Superior Agrária/CERNAS
Estágio Ciência Viva (23/07/2012 a 27/07/2012)
Reprodução Animal: da teoria
à prática
Anita Carvalho, Joana Pereira, Lia Bruno, Miguel Oliveira
Trabalho realizado sob a orientação das investigadoras
Leila Rodrigues e Sandra Gamboa, com a colaboração
da biotecnóloga Andreia Quaresma
Introdução
O espermograma sumário é um método de análise que pode ser
utilizado para avaliar a fertilidade potencial de um determinado equino
(garanhão). Nesse exame avalia-se a viabilidade, a concentração ([SPZ]) e a
morfologia espermáticas (Gamboa, 2012).
Com base na informação acima referida, o objectivo do estágio
realizado foi determinar o potencial reprodutivo do machos examinados.
Fig. 1 – Colheita de sémen ao garanhão Sino
Materiais
• Meio INRA 96
• Vagina artificial para equinos
• Microscópio com platina aquecida
• Microscópio de fluorescência
• Microscópio óptico
• Lâminas
• Lamelas
• Micropipetas
• Eosina – nigrosina
• Tinta da china
• HH
• Água destilada
• IP-SYBR 14
• Fotocolorímetro
• Amostras de sémen equino
• Centrifuga
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Fita medidora de pH
Banho maria
Geladeira
Provetas
Pipetas
Pompetes
Eppendorffs
Tubos de ensaio
FITC-PSA
Reagente de SEDMAK
Espectofotómetro
Estufa
Solução tampão
Solução de formaldeído
Etanol
Gase
Funil
Contador de laboratório
JC-1
Albumina
Fig. 2 - fotocolorímetro
Fig. 3 – microscópio com platina
de aquecimento
Fig. 4 – vagina artificial
Método
• Exame macroscópico: volume, aspecto (cor e cheiro), pH,
[SPZ] e teor proteico.
• Exame microscópico: mobilidade, vitalidade, morfologia e
potencial mitocondrial.
Fig. 5 – cuvetes com preparação proteica
Fig. 6 – esfregaços de sémen para
análise
Resultados e discussão
Tabela 1 - Comparação entre os resultados obtidos nos dos espermogramas
Parâmetro
Sino
Garrano-do-Mondego
Volume
58,5 ml
14 ml
Mobilidade
40%
0%
Coloração vital
56%
0%
Morfologia
62,5% normais
0% normais
Idade
14
24
• Através dos parâmetros analisados, é possível verificar que a qualidade do esperma
do Sino é superior à do Garrano-do-Mondego.
• No mesmo ejaculado do Sino foi possível encontrar uma grande diversidade de
espermatozóides (vivos e mortos, presença/ausência de acrossomas e
espermatozóides normais ou anormais).
• No ejaculado do Garrano-do-Mondego só se observaram cabeças e flagelos isolados.
Conclusão
A partir do trabalho realizado, podemos concluir que:
• Diferentes garanhões ejaculam sémen com distintos potenciais
de fertilidade;
• A idade pode influenciar o potencial de fertilidade dos machos
equinos.
Fig. 7 - esfregaço de esperma observado ao
microscópio óptico
Bibliografia
• FRAGA, João J. R. (2001) – Guia Prático para elaboração e
apresentação de trabalhos científicos. 11ª ed. Lisboa: Edições
Cosmos. p. 133-134.
• GAMBOA, Sandra C. (2008) – Textos de apoio às aulas práticas de
reprodução animal. Coimbra: Escola Superior Agrária. Disponível
na ESAC.
• GAMBOA, Sandra C. (2012) – Infertilidade equina: múltiplas
fragilidades ou um fado do espermatozóide? Coimbra: Universidade
de Coimbra, Faculdade de Ciência e Tecnologia. Tese de
Doutoramento em Biologia Celular.
• RODRIGUES, Leila C. S. (2010) – Noções para apresentação de
trabalhos escritos de pesquisa. Coimbra: ESAC, Loja do Aluno.