INSTITUTO DE ZOOTECNIA PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM PRODUÇÃO ANIMAL SUSTENTÁVEL EFEITOS AMBIENTAIS E DE GRUPOS GENÉTICOS SOBRE CARACTERÍSTICAS DE PRODUÇÃO DE SÊMEN EM TOUROS MESTIÇOS (Bos taurus x Bos indicus) Rafael Ribeiro Coelho de Paula Souza Nova Odessa Janeiro, 2012 GOVERNO DO ESTADO DE SÃO PAULO SECRETARIA DE AGRICULTURA E ABASTECIMENTO AGÊNCIA PAULISTA DE TECNOLOGIA DOS AGRONEGÓCIOS INSTITUTO DE ZOOTECNIA PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM PRODUÇÃO ANIMAL SUSTENTÁVEL EFEITOS AMBIENTAIS E DE GRUPOS GENÉTICOS SOBRE CARACTERÍSTICAS DE PRODUÇÃO DE SÊMEN EM TOUROS MESTIÇOS (Bos taurus x Bos indicus) Rafael Ribeiro Coelho de Paula Souza Orientadora Profª. Dra. Claudia Cristina Paro de Paz Co-orientador Prof. Dr. Aníbal Eugênio Vercesi Filho Dissertação apresentada ao Programa de Pósgraduação do Instituto de Zootecnia, APTA/SAA, como parte dos requisitos para obtenção do título de Mestre em Produção Animal Sustentável. Nova Odessa Janeiro, 2012 Ficha elaborada pelo Núcleo de Informação e Documentação do Instituto de Zootecnia Bibliotecária responsável – Ana Paula dos Santos Galletta - CRB8/7166 S729e Souza, Rafael Ribeiro Coelho de Paula Efeitos ambientais e de grupos genéticos sobre características de produção de sêmen em touros mestiços (Bos taurus x Bos indicus). / Rafael Ribeiro Coelho de Paula Souza. Nova Odessa - SP, 2012. 54p. : il. Dissertação (Mestrado) - Instituto de Zootecnia. APTA/SAA. Orientador: Prof. Dra. Claudia Cristina Paro de Paz. 1. Bovinos – Reprodução animal. 2. Sêmen - Avaliação. 3. Inseminação artificial. I. Paz, Claudia Cristina Paro de. II. Título. CDD 636.20824 GOVERNO DO ESTADO DE SÃO PAULO SECRETARIA DA AGRICULTURA E ABASTECIMENTO AGÊNCIA PAULISTA DE TECNOLOGIA DOS AGRONEGÓCIOS INSTITUTO DE ZOOTECNIA PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM PRODUÇÃO ANIMAL SUSTENTÁVEL CERTIFICADO DE APROVAÇÃO TÍTULO: EFEITOS AMBIENTAIS E DE GRUPOS GENÉTICOS SOBRE CARACTERÍSTICAS DE PRODUÇÃO DE SÊMEN EM TOUROS MESTIÇOS (Bos taurus x Bos indicus) AUTOR: RAFAEL RIBEIRO COELHO DE PAULA SOUZA Orientadora: Profª. Dra. Claudia Cristina Paro de Paz Co-orientador: Prof. Dr. Aníbal Eugênio Vercesi Filho Aprovado como parte das exigências para obtenção de título de MESTRE em Produção Animal Sustentável, pela Comissão Examinadora: Profª. Dra. Claudia Cristina Paro de Paz Profª. Dra.Lenira El Faro APTA/SAA Dr. Luiz Carlos Roma Júnior APTA/SAA Data da realização: 27 de janeiro de 2012 Presidente da Comissão Examinadora Profª. Dra. Claudia Cristina Paro de Paz i AGRADECIMENTOS Agradeço primeiramente a Deus, por me dar oportunidades; A Georgina, Adriana, Fabrícia, Thalita, João e Rafael, pela compreensão e por servirem de exemplo e motivação para continuar; A minha orientadora pela paciência, amizade, dedicação e ensinamentos; Ao meu co-orinetador pela confiança em mim depositada; Aos membros das bancas examinadoras, Dra. Lenira El Faro, Dra. Maria Lúcia Pereira Lima, Dr. Luiz Carlos Roma Júnior, pelos comentários e sugestões, que aperfeiçoaram este trabalho; A todos os professores e colegas do curso de pós graduação, pelos ensinamentos, amizade e dedicação; A todos os funcionários do Instituto de Zootecnia, principalmente aos da biblioteca e da secretaria da pós graduação; E a todos que participaram direta ou indiretamente deste trabalho. ii iii SUMÁRIO LISTA DE FIGURAS ................................................................................................. vi LISTA DE TABELAS .............................................................................................. viii RESUMO.................................................................................................................... x ABSTRACT............................................................................................................... xii 1. INTRODUÇÃO...................................................................................................... 1 2. REVISÃO BIBLIOGRÁFICA.................................................................................. 5 2.1. Inseminação Artificial......................................................................................... 6 2.2. Exame Andrológico............................................................................................ 7 2.3. Efeitos Genéticos............................................................................................... 9 2.4. Efeitos Ambientais.............................................................................................. 10 2.5. Maturidade Sexual.............................................................................................. 12 3. MATERIAL E MÉTODOS...................................................................................... 15 3.1 Animais e Dados Climáticos................................................................................ 15 3.2 Produção e Qualidade do Sêmen....................................................................... 16 3.3 Análises Estatísticas............................................................................................ 17 4. RESULTADOS E DISCUSSÕES.......................................................................... 19 4.1 Grupo Genético................................................................................................... 22 4.2 Idade do Touro.................................................................................................... 24 4.3 Época de Coleta.................................................................................................. 29 4.4 Ano de Coleta...................................................................................................... 31 4.5 Intervalo de Dias entre Coletas........................................................................... 32 5. CONCLUSÕES..................................................................................................... 35 6. REFERÊNCIAS..................................................................................................... 37 iv v LISTA DE FIGURAS FIGURA 1 Volume da produção do sêmen (a), motilidade (b) e concentração espermática (c) e número total de espermatozóides viáveis (d), em função do ano da coleta de sêmen .......................................................................................... 32 vi vii LISTA DE TABELAS TABELA 1 Médias de dados climáticos, referentes ao período de 1992 a 2010, na Embrapa Pecuária Sudeste, São Carlos, SP .................. 16 TABELA 2 Número de observações, o coeficiente de variação, as médias e o desvios-padrão para as características volume (VOL), concentração (CONC), motilidade (MOT) e número total de espermatozóides viáveis (NTZV), para o sêmen de touros leiteiros mestiços em diferentes coletas ........................................ 20 TABELA 3 Correlação entre as características volume (VOL), concentração (CONC), motilidade (MOT) e número total de espermatozóides viáveis (NTZV) ............................................................................... 22 Médias seguidas pelos erros-padrão para volume (VOL), motilidade (MOT), concentração do sêmen (CONC), e número total de espermatozóides viáveis (NTZV) em função dos grupos genéticos dos touros ...................................................................... 22 Média seguidas pelos erros-padrão para volume (VOL), motilidade (MOT), concentração (CONC) do sêmen e número total de espermatozóides viáveis (NTZV) em função das classes de idade do touro na coleta de sêmen (CIDTC) ............................ 24 Frequência observada para a motilidade do sêmen nas diferentes classes de idades na coleta de sêmen de touros mestiços B.taurus x B.indicus ........................................................ 27 Frequência observada para a motilidade do sêmen nas diferentes classes de idades na coleta de sêmen de touros mestiços B.taurus x B.indicus ........................................................ 28 TABELA 4 TABELA 5 TABELA 6 TABELA 7 TABELA 8 Média seguidas pelos erros-padrão para volume (VOL), motilidade (MOT), concentração (CONC) do sêmen e número total de espermatozóides viáveis (NTZV) em função da época de coleta do sêmen ............................................................................. 30 TABELA 9 Médias estimadas, seguidas pelos erros-padrão para volume (VOL), motilidade (MOT), concentração (CONC) do sêmen e número total de espermatozóides viáveis (NTZV), em função do intervalo entre coletas do sêmen, para touros mestiços leiteiros .. viii 33 ix EFEITOS AMBIENTAIS E DE GRUPOS GENÉTICOS SOBRE CARACTERÍSTICAS DE PRODUÇÃO DE SÊMEN EM TOUROS MESTIÇOS (Bos taurus x Bos indicus) RESUMO Os objetivos deste estudo foram avaliar a produção do sêmen de reprodutores mestiços Bos taurus x Bos indicus, avaliando o potencial reprodutivo e verificar quais efeitos influenciaram a produção do sêmen destes reprodutores. Este estudo foi realizado com o conjunto de dados coletado no período de 1979 a 1990 do projeto “Desenvolvimento do Mestiço Leiteiro Brasileiro” implantado pelo CNPGL – EMBRAPA. Os dados se referem a 13. 092 coletas de sêmen de 156 touros com fração de genes de Bos taurus variando entre 5/8 e 7/8, nascidos nos anos de 1968 a 1987, sendo que as coletas foram realizadas entre 1979 a 1990. As médias encontradas neste estudo foram: volume (4,84 ml), concentração (0,93x109/ml), motilidade (46,51%) e número de espermatozóides viáveis (239,14 x109/ml). O grupo genético influenciou (P<0,01), o volume do ejaculado, o número de espermatozóides viáveis e a motilidade, exceto a concentração espermática. Os touros 7/8 e 5/8 apresentaram melhores resultados para a concentração e para a motilidade seminal, e os touros 3/4 tiveram um maior volume e número de espermatozóides viáveis por ejaculado. Os efeitos das classes de idade do touro a coleta, intervalo entre coletas e de ano foram significativos (P<0,01) para o volume, concentração, motilidade e número de espermatozóides viáveis. O efeito da estação foi significativo sobre o volume e sobre o número de espermatozóides viáveis, no entanto, não foi significativo sobre a concentração e a motilidade. PALAVRAS CHAVE: avaliação de sêmen, bovinos leiteiros, qualidade do sêmen, touros mestiços Bos taurus x Bos indicus x xi GENETIC GROUPS AND ENVIRONMENTAL EFFECTS ON CHARACTERISTICS OF SEMEN PRODUCTION IN CROSSBREDS BULLS (Bos taurus x Bos indicus) ABSTRACT The objectives of this study were to evaluate the production of semen of crossbred bulls Bos taurus x Bos indicus, and evaluating the effects which influenced the production of semen of bulls. This study was conducted with the data set collected in the period 1979 to 1990 the project "Development of the Crossbred Brazilian Dairy " deployed by CNPGL - EMBRAPA. The data refer to 13. 092 samples of semen collected from 1979 to 1990, from 156 bulls with a fraction of genes from Bos taurus ranging from 5/8 and 7/8, born in the years 1968 to 1987. The mean values found in this study were: volume (4.84 ml), concentration (0.93 x109/ml), motility (46.51%) and number of viable sperm (239.14 x109/ml). The genetic group affected (P <0.01), ejaculate volume, the number of viable sperm motility, except the sperm concentration. Bulls 7/8 showed better results for the concentration and motility. Bulls 5/8 had an intermediate production in the different characteristics analyzed and bulls 3/4 had a higher semen volume and number of viable sperm. The effects of classes, age of bull on collection, interval between samples and years were significant (P <0.01) for volume, sperm concentration, motility and number of viable sperm. The effect of season was significant on the volume and the number of viable sperm, however, was not significant on the concentration and motility. KEYWORDS: crossbred bulls Bos taurus x Bos indicus, dairy cattle, quality of the semen, semen evaluate xii xiii 1. INTRODUÇÃO As taxas reprodutivas em regiões tropicais são geralmente mais baixas do que as de regiões mais temperadas. As razões para isso são complexas e incluem os efeitos de estresse ambiental, gestão e possíveis efeitos de raças, além de ocorrer diferenças nos indicadores da fertilidade dos touros entre diferentes sistemas de produção, época de colheita, idade e peso corporal. Touros Bos indicus e mestiços (Bos indicus x Bos taurus) têm sido amplamente utilizados nessas regiões devido a sua adaptação, no entanto, o uso destes animais tem sido associado a baixa fertilidade (CHENOWETH et al., 1996). O touro mestiço é uma opção para introduzir material genético de raças especializadas em ambientes tropicais. Entretanto, o seu uso só será vantajoso se forem utilizados touros mestiços comprovadamente superiores, visando o aumento dos índices produtivos e reprodutivos. A manutenção de rebanhos mestiços por meio do uso de touros mestiços provados para produção de leite pode ser uma boa estratégia para diminuir as dificuldades operacionais encontradas pelos produtores, principalmente aquela referente à produção de animais com grande variação na composição genética ou no potencial de produção de leite (BARBOSA, 2006). 1 Um touro representa metade da composição genética de sua progênie assim, sua contribuição é muito importante porque deixa inúmeros descendentes. Devido à ênfase para características produtivas, uma menor atenção está sendo dada ao desempenho reprodutivo dos touros (MARTINEZ et al., 2000). A seleção de touros deve ser baseada na excelência genética para características produtivas e reprodutivas, considerando o ambiente e o mercado (GALLOWAY, 1989). As características produtivas (produção de leite, porcentagem de gordura e proteína, vida produtiva) e reprodutivas (circunferência escrotal, características físicas e morfológicas do sêmen) dos touros devem ser cuidadosamente avaliadas antes de seu uso generalizado. Como não é possível testar a fertilidade de um grande número de touros jovens devido ao tempo necessário para avaliar a progênie e também em razão do limitado número de vacas disponíveis, a avaliação das características do sêmen se torna uma alternativa necessária (MARTINEZ et al., 2000). O objetivo é otimizar o uso de touros com bom desempenho no exame andrológico, maximizando a produção total de espermatozóides e o número de espermatozóides por inseminação artificial, podendo assim inseminar diversas vacas sem diminuir a taxa de prenhez (DEN DAAS et al., 1998). A utilização de reprodutores selecionados pelo exame andrológico tem como finalidade a garantia da qualidade seminal e a melhoria da eficiência reprodutiva do rebanho, visando aumentar a lucratividade (SILVEIRA et al., 2010). Touros que produzem sêmen com qualidade média ou abaixo da média alcançam níveis de fertilidade abaixo da média, mesmo que seja aumentado o número de espermatozóides por dose na tentativa de compensar os baixos níveis de qualidade. Em contraste, os touros que produzem sêmen com qualidade acima da média atingem níveis de fertilidade acima da média mesmo com um número menor de espermatozóides por dose (DeJARNETTE et al., 2004). A aquisição de touros melhoradores deve ser associada à otimização de seu uso, pois os custos por concepção aumentam muito quando a relação touro/vacas é desfavorável. Quando se emprega a proporção touro/vaca de 1:40, 1:60, 1:80 e 1:100, reduz-se em 37,5; 57,5; 67,5 e 75%, respectivamente, o valor para aquisição do touro (BERGMANN, 1993, citado por PIRES, 2010). Segundo Amaral et al. 2 (2003), o custo por concepção de um touro de R$ 1.700,00 servindo 20 fêmeas é semelhante ao de um touro de R$ 4.000,00 que serve a 40 fêmeas. Existe necessidade de utilizar touros avaliados pelo exame andrológico, pois os animais subférteis podem gerar descendentes, e mesmo que esta condição clínica seja afetada por fatores ambientais esta alteração pode ser de caráter genético, sendo assim indesejável o uso destes animais. Segundo Tyagi et al. (2006), citados por (MANDAL et al., 2009), a produção com qualidade de doses de sêmen congelado de touros mestiços mantidos em ambiente tropical é um sério problema e cerca de 60% dos touros mestiços (Bos taurus x Bos indicus) são rejeitados das centrais de coleta de inseminação artificial na Índia, devido à baixa qualidade ou insatisfatória congelabilidade do seu sêmen. Quando há problema de infertilidade numa propriedade, três aspectos devem ser considerados, tais como, problemas no macho, problemas na fêmea e problemas de manejo, onde o homem e o ambiente exercem um importante papel (PIMENTEL, 2008). Efeitos ambientais são causados por diversos fatores, como temperatura ou umidade ambiental, fotoperíodo, qualidade dos alimentos ou instalações, sendo assim a variação ambiental na produção de sêmen não bem compreendida (MATHEVON et al., 1998). Os objetivos deste estudo foram avaliar a produção do sêmen de reprodutores mestiços Bos taurus x Bos indicus, avaliando o potencial reprodutivo desses touros e verificar quais efeitos influenciam a produção e a qualidade do sêmen destes reprodutores. 3 4 2. REVISÃO BIBLIOGRÁFICA A produtividade dos sistemas de produção de leite em áreas de clima tropical, quando comparada aos sistemas de clima temperado é caracteristicamente baixa em todo o mundo. Na tentativa de melhorar a produtividade destes sistemas tem-se utilizado, em larga escala, o cruzamento entre raças zebuínas (ou nativas adaptadas), com raças de origem européia especializadas para produção de leite, onde o principal objetivo deste de cruzamento é utilizar-se da expressão da heterose e da complementaridade entre estes tipos zootécnicos para a obtenção de animais mais adaptados e produtivos sob tais condições (FACÓ et al., 2002). A combinação de raças zebuínas e européias foi responsável pelo o aumento da produção de leite, maior regularidade de parição e produção mais econômica desde, aproximadamente, o ano de 1945 (VILLARES et al., 1947). Devido a uma menor exigência esses animais adaptam-se melhor às limitações de meio, prevalecendo na maioria das fazendas devido a uma menor necessidade energética para a mantença e pela maior resistência a doenças, parasitas e ao stress térmico, podendo assim demonstrar toda a sua capacidade produtiva, reprodutiva e adaptativa. 5 Visando integrar os esforços que diversos criadores e instituições vinham realizando, o Centro Nacional de Pesquisa de Gado de leite (CNPGL) da Embrapa implantou, em 1977, o projeto Desenvolvimento do Mestiço leiteiro Brasileiro (MLB), combinando por meio de cruzamento entre raças, as características de produção de Bos taurus com as características de adaptação do Bos indicus. Este programa produziu touros avaliados para resistência aos carrapatos e com teste de progênie para produção e composição do leite e ganho de peso. Alguns desses touros foram utilizados comercialmente em centrais de inseminação, provando a existência de demanda no mercado de sêmen de touros tropicais provados, fato que não era sabido anteriormente (MADALENA, 1992). 2.1. Inseminação Artificial É de grande importância avaliar a contribuição do touro em relação ao progresso genético e a fertilidade do rebanho, pois o uso da inseminação artificial é, de forma geral, pouco usada e a monta natural prevalece sendo que somente cerca de 9% das fêmeas em idade de reprodução são inseminadas (ASBIA, 2010). A inseminação artificial é a principal ferramenta utilizada para o melhoramento genético do gado leiteiro. Através da inseminação artificial podem ser produzidas filhas de touros superiores nos rebanhos, melhorando as características de importância econômica (MATHEVON et al., 1998), promovendo o melhoramento genético rápido e aumentando a lucratividade (BRITO et al., 2002a). Outra vantagem é a viabilização do cruzamento sem os problemas da monta natural com touros europeus, mantidos em regiões tropicais (AMARAL et al., 2003). Os touros de origem européia de produção leiteira encontrados no Brasil são principalmente das raças Holandesa, Pardo Suíça e Jersey, geneticamente constituídos para clima temperado. Em clima tropical estes animais sofrem com os efeitos do meio ambiente, seja pela elevada temperatura, umidade relativa do ar, presença de ectoparasitas e da redução de pastagens na seca (VALE FILHO, 1997). Comparando touros Holandeses com touros Curraleiros (raça naturalizada brasileira) estes se mostraram mais tolerantes aos efeitos da insulação escrotal, com melhores resultados nas características seminais do que os touros Holandeses. 6 Assim, o uso de raças bovinas adaptadas é uma alternativa promissora em condições ambientais desfavoráveis, como altas temperaturas ou baixa oferta de alimentos (PEZZINI et al., 2006). Devido a estes e a outros fatores, atualmente a raça Girolando é a que mais cresce na venda de sêmen no Brasil, alcançando mais de 291.000 doses comercializadas no ano de 2010, com um aumento de 38,12% em relação ao ano de 2009 e de 164,72% em relação ao ano de 2006 (ASBIA, 2010). A raça Girolando possui grande aceitação no Brasil, sendo que 80% do leite produzido provêm de animais mestiços, por serem capazes de manter um bom nível de produção em diferentes sistemas de manejo e de condições climáticas. Outro dado importante desta raça é o crescente aumento na produção de leite (305 dias) das vacas primíparas, de 3.657kg no ano de 2000 para 4.144kg em 2010, representando um aumento de 13,3%, na produção leiteira (SILVA et al., 2011). 2.2. Exame Andrológico O exame andrológico completo é composto pelo exame clínico geral, exame específico dos órgãos reprodutivos, mensuração do perímetro escrotal, avaliação do comportamento sexual, avaliação dos aspectos físicos e morfológicos do sêmen, (BARBOSA et al., 2007) e pelo exame microbiológico (PIMENTEL, 2008). Entretanto, para que seja considerado viável e potencialmente fértil é necessário que o sêmen possua morfologia, atividade metabólica e membranas plasmáticas normais (ARRUDA et al., 2004). A qualidade do sêmen reflete a saúde dos túbulos seminíferos, epidídimos e glândulas acessórias (SINGH, 2006). Os aspectos físicos de um sêmen com alto poder fecundante, apresenta alta concentração de espermatozóides por ejaculação (> 10 bilhões), motilidade progressiva acima de 70% e vigor 5, além de um alto trubilhonamento (VALE FILHO, 1997). O sêmen com baixo poder fecundante pode ter sua limitação no plasma, devido à insuficiência de açúcares necessários para a combustão energética dos espermatozóides, nos aspectos morfológicos, devido a níveis elevados de 7 espermatozóides anormais ou por a uma baixa condição metabólica (VALE FILHO, 1997), sendo resultante da disfunção dos testículos, dos epidídimos ou de origem genética (SINGH, 2006). A ocorrência de patologia nos espermatozóides é o primeiro sinal de alterações degenerativas no epitélio seminífero (SINGH, 2006), geralmente causada por clima ou trimestres quentes, alta umidade, animais com sobrepeso, baixa circulação de ar ou alimentação com altas porcentagens de concentrados (GALLOWAY, 1989). A subfertilidade genética geralmente está relacionada à hipoplasia testicular (VALE FILHO, 1997). Para Singh (2006), na degeneração testicular o aparecimento de espermatozóides anormais é, frequentemente, acompanhado por outros sinais como a diminuição da concentração e motilidade dos espermatozóides, assim como, diminuição no tônus e no tamanho dos testículos, indicando perdas na gametogênese, baixa eficiência nos processos de mitose e meiose (VALE FILHO, 1997). O uso dos touros depende da obtenção máxima de crescimento testicular, do equilíbrio da produção de células de esperma, e do desenvolvimento completo do impulso sexual, além de uma condição física adequada para assegurar o sucesso da monta (FONSECA, 2000). No entanto, a fertilidade do touro é apenas um dos muitos fatores que contribuem para o desempenho reprodutivo dos rebanhos. Na avaliação do potencial da fertilidade dos touros, os testes estabelecidos, como o exame físico, exame de sêmen e avaliação da libido são usados para eliminar touros de baixa fertilidade, para estimar a proporção touro/vaca (PARKINSON, 2004). Além disso, é uma forma de agregar valor ao touro (PINEDA, 1997). Como a eficiência econômica do sistema de gado de leite está diretamente ligada ao desempenho reprodutivo do rebanho, o exame andrológico se torna necessário pois, conforme Menegassi (2010), se trata de uma prática de manejo de baixo custo que proporciona um aumento da rentabilidade da atividade. Segundo Menegassi (2010), a realização do exame andrológico dos touros aumentou a produção de bezerros em 31%, com uma produtividade estimada do touro durante sua vida útil em 13,8 bezerros. Isso aumentou a receita líquida por 8 vaca e por touro, tendo uma relação benefício/custo de R$35,84. Esse aumento na receita proporciona um valor adicional que pode ser utilizado na aquisição de novos touros. Pineda (1997) e Fonseca et al. (1997), selecionaram touros com alta fertilidade, avaliados com uma proporção de 60 a 94 vacas, e que foram capazes de alcançar taxas de até 95% de prenhez dentro de estações de monta que variaram de 63 a 120 dias. Pode-se gerar uma economia de 18,66% do custo por bezerro desmamado aumentando a proporção touro vaca de 1:25 para 1:60, demonstrando assim, a necessidade da avaliação andrológica (FONSECA et al., 1997). 2.3. Efeitos Genéticos As contribuições dos touros em relação à baixa fertilidade de um rebanho são frequentemente mal definidas, especialmente as que envolvem genótipos tropicais mantidos em ambientes quentes (CHENOWETH et al., 1996). Segundo Koivisto et al. (2009), os animais Bos indicus são conhecidos por serem mais termotolerantes. Assim, a espermatogênese e a maturação do espermatozóide no epidídimo são mais afetadas nos touros B. Taurus do que B. Indicus, sob altas temperaturas ambientais. Touros B. indicus e seus mestiços possuem um maior fornecimento de sangue e uma maior capacidade de termorregulação testicular quando comparado aos touros B. taurus, devido a diferenças morfológicas na vascularização nos testículos (BRITO et al., 2003). No entanto estudos tem demonstrado que touros B. Indicus apresentam uma puberdade atrasada, deficiencias endócrinas, baixa libido, testículos pequenos e uma menor produção e qualidade seminal quando comparados aos touros B. Taurus (FIELDS, 1979; GALINA;ARTHUR, 1991; CHENOWETH et al., 1996; ANCHIETA et al., 2005). Porém, em ambiente tropical sob as mesmas condições, touros Bos indicus tiveram uma produção de espermatozóides igual ou superior aos Bos Taurus, sendo 9 a sua melhor adaptação às condições ambientais a responsável para essa observação (BRITO et al., 2002a). Nas condições térmicas, pluviométricas e de umidade relativa do ar do Sudeste brasileiro, os taurinos apresentam uma maior eficiência no processo de congelação de sêmen do que os zebuínos. Também apresentam, na précongelação, melhores indicadores de avaliação do sêmen, sugerindo pouca susceptibilidade a efeitos climáticos mais severos do que os observados em climas temperados (ANCHIETA et al., 2005). Brito et al. (2002a) verificaram que a produção e a qualidade do sêmen foram influenciadas pelo genótipo dos animais. Diferenças significativas foram encontradas nos touros B. indicus, pois estes apresentaram uma concentração espermática maior e nos touros B. taurus menos espermatozóides com defeitos. No entanto, Brito et al. (2002b) avaliando o efeito da idade nas características de produção e qualidade seminal de touros Bos indicus, Bos taurus e mestiços (Bos indicus x Bos taurus), em três centrais de inseminação artificial no Brasil, verificaram que não houve efeito significativo de grupo genético sobre a qualidade do sêmen. Os touros Bos indicus apresentaram maiores resultados (P<0,01) na concentração e no número de espermatozóides viáveis que os Bos taurus, com resultados intermediários para os mestiços. No entanto, os touros mestiços apresentaram uma maior motilidade, mantendo desta forma uma maior qualidade seminal. Segundo Mandal et al. (2009) há indicação de uma possível incompatibilidade genética nos animais mestiços (Bos taurus x Bos indicus), pelo baixo desempenho reprodutivo, baixa qualidade seminal e alta anomalias morfológicas, quando comparado aos Bos taurus e Bos indicus puros, sob as mesmas condições ambientais, e se não for geral, é evidentemente particular nos cruzamentos Holandes x Sahiwal. 10 2.4. Efeitos Ambientais Como diferentes resultados são encontrados nos exames andrológicos, a idade e o período de colheita de sêmen podem afetar a qualidade do sêmen (características físicas e morfológicas) e a quantidade de doses produzidas por touros. Dairra et al. (1997), investigaram a influência da idade de bovinos europeus sobre a qualidade do sêmen e constataram que a idade do touro afetou significativamente o volume de sêmen ejaculado, a concentração espermática, as anormalidades espermáticas e a quantidade de doses por ejaculado. A idade do touro foi positivamente associada com espermatozóides normais (P<0,001), e negativamente associada com anormalidades primárias (P<0,001). A motilidade aumentou e os espermatozóides com anormalidades primárias diminuíram com o aumento da idade dos touros. Neste estudo, o peso corporal, a circunferência escrotal e as características de qualidade de sêmen melhoraram com o aumento da idade do touro (CHENOWETH et al., 1996). Silva et al. (2009), encontraram similaridades avaliando as características do sêmen de touros nas duas subespécies com idade intermediária. Entretanto, as maiores porcentagens de anormalidades totais, nas duas subespécies, foram observadas nos animais mais jovens (12 a 36 meses) e nos mais velhos (109 e 142 meses). Informações da idade relacionada às alterações no espermiograma de touros mestiços (Bos taurus x Bos indicus) são insuficientes e os problemas como a alta prevalência de anormalidades morfológicas, baixa qualidade e congelabilidade seminal não foram investigadas extensivamente (MANDAL et al., 2009). Avaliando touros das raças Nelore, Gir e Holandês, Oliveira et al. (2006), verificaram que as características físicas e morfológicas do sêmen variam entre as estações seca e chuvosa e dentro da mesma estação, interferindo na qualidade do sêmen de touros doadores em central de inseminação artificial e na sua eficiência para congelação. 11 Brito et al. (2002a), avaliando touros B. indicus e B. taurus, verificaram que a produção ou a qualidade de sêmen não foram significativamente afetadas pela temperatura e umidade ambiental ou pela estação na coleta. Segundo Silva et al. (2009), os resultados de avaliações microscópicas dependem de diversos fatores, como o meio utilizado para diluir o sêmen, as taxas de diluição e da sua congelabilidade, além da influência dos fatores climáticos como as estações do ano e da má nutrição que podem influenciar negativamente o crescimento testicular e a qualidade do sêmen durante a coleta. Sendo asim uma melhor compreensão do efeito de fatores como idade do animal, estação de coleta e freqüência da coleta sobre a produção de sêmen de touros é importante, e com o conhecimento destes efeitos, pode-se adaptar a gestão dos touros para melhorar a produção de sêmen (MATHEVON et al., 1998). 2.5. Precocidade Sexual Segundo Siddiqui et al. (2008), touros jovens devem ser o mais rápido possível avaliados e descartados caso não apresentem bons resultados. Esta prática é desejável por identificar touros superiores precocemente e pela seleção de novos touros com um melhor pedigree em um menor período, além de avançar o desenvolvimento genético do gado leiteiro através da disseminação rápida e eficiente de nova genética. A variabilidade da idade merece uma maior investigação para verificar com exatidão em que idade a produção normal de esperma é atingida, a fim de usa-lá como indicador da fertilidade (TORRES-JUNIOR; HENRY, 2005) e de seleção. A seleção de animais para reprodução visa atualmente não só a qualidade seminal, mas a precocidade dos reprodutores (OSORIO, 2010). Destacam-se como indicativos da eficiência reprodutiva dos touros, os relacionados com a puberdade e a maturidade sexual precoce, por ter reflexos na idade ao primeiro parto das filhas destes animais (GRESSLER, 2000). Existe suporte na literatura para se concluir que os fatores hormonais que promovem o desenvolvimento inicial testicular nos machos são os mesmos que 12 promovem o desenvolvimento inicial ovariano nas fêmeas, e a seleção para a puberdade precoce em um sexo resultará em associada redução da idade a puberdade do outro sexo (MACKINNON et al., 1990). Toelle e Robison (1985), e Gallloway (1989), relataram que touros com maior circunferência escrotal produziram filhas com maior eficiência reprodutiva. Assim a seleção para maiores valores de circunferência escrotal em touros resulta em melhoramento dos índices reprodutivos das fêmeas, filhas desses indivíduos. A circunferência escrotal, associada às outras medidas que determinam a fertilidade do touro, como as características físicas e morfológicas do sêmen, constituem-se em ponto básico para direcionamento dos processos de seleção de reprodutores e suas descendências (SALVADOR, 2001). A concentração, a motilidade e o vigor foram negativamente correlacionados com a idade ao primeiro parto. Assim, a seleção de touros que produzem sêmen de maior qualidade pode trazer, como resposta correlacionada, menor idade ao primeiro parto de suas filhas (SANTANA-JUNIOR et al., 2010). Valentim et al. (2002), avaliando as diferenças entre as médias de circunferência escrotal de zebuínos e cruzados, demonstraram que o início da puberdade é mais tardio nos zebuínos do que nos cruzados. O desenvolvimento sexual de touros B. Indicus e de touros mestiços B. indicus x B. taurus parece ser atrasado quando comparado ao desenvolvimento dos touros B. taurus (BRITO et al., 2004). No entanto, touros das raças Holandesa e Pardo Suíça, mantidos em ambiente tropical mexicano, apresentaram idade a puberdade maior do que as verificadas em ambientes temperados (JIMÉNEZ-SEVERIANO, 2002). Portanto, o manejo, o clima e o fotoperíodo podem contribuir para o atraso no desenvolvimento sexual em touros mantidos em ambientes tropicais (BRITO et al., 2004). A maturidade sexual é altamente influenciada por fatores ambientais, e quando touros zebuínos são submetidos a um manejo adequado pode–se observar precocidade semelhante aos touros europeus (PIRES, 2010). 13 Touros mestiços criados em ambientes tropicais e selecionados com base na circunferência escrotal irão melhorar as características reprodutivas e de crescimento na progênie, pois o impacto genético de touros superiores é limitado pelo número de espermatozóides produzidos, o qual é uma função direta do tamanho testicular (SIDDIQUI et al., 2008). A seleção para a precocidade sexual em touros B. Indicus e touros mestiços B. taurus x B. Indicus, pode diminuir os custos de produção, reduzir o intervalo entre gerações, aumentando o ganho genético e a produtividade (BRITO et al., 2004). 14 3. MATERIAL E MÉTODOS 3.1. Animais e Dados Climáticos Este estudo foi realizado com o conjunto de dados coletado no período de 1979 a 1990, referente ao projeto “Desenvolvimento do Mestiço Leiteiro Brasileiro”, implantado pelo CNPGL - EMBRAPA, devido à necessidade de um gado leiteiro adaptado as diferentes condições tropicais e de produção do Brasil. Sendo executado desde 1977, este programa consistia em realizar pesquisas na área de melhoramento genético, com base no teste de progênie dos melhores tourinhos mestiços de diferentes rebanhos. Estes reprodutores eram filhos de vacas elite com maiores valores genéticos para produção, selecionadas pela produção de leite com base nos controles leiteiros existentes nas fazendas. O grupo genético das vacas variava entre 1/2 a 3/4 de proporção de genes de raças européias, independente da composição racial, cor, tipo ou conformação (MADALENA, 1992). Os dados se referem a 13.092 coletas de sêmen de 156 touros com fração de genes de Bos taurus variando entre 5/8 e 7/8, nascidos entre os anos de 1968 a 1987. As coletas foram realizadas entre os anos de 1979 a 1990, no laboratório da Fazenda Canchim, localizada na cidade de São Carlos (Latitude: 21°57'42"(S), 15 Longitude: 47°50'28”(W), Altitude: 860m), sob o registro EP: 00023. BR-0 do Ministério da Agricultura, para produzir e comercializar sêmen. O clima local é considerado como tropical de altitude, que, segundo a classificação de Koeppen, é o Cwa, clima quente com inverno seco, sendo o mês de janeiro o mais chuvoso, com 274,7 mm em média e, agosto o menos chuvoso, com 22,8 mm. (Tabela 1). A temperatura máxima anual foi de 27,1ºC e a mínima anual de 15,9ºC. A temperatura média anual foi de 21,5ºC, sendo os meses de junho e julho mais frios (12ºC) e fevereiro o mais quente (28ºC) (CPPSE-EMBRAPA, 2011). Tabela 1 - Médias de dados climáticos, referentes ao período de 1992 a 2010, na Embrapa Pecuária Sudeste, São Carlos, SP Janeiro UR (%) 81,5 Temperatura Máxima (ºC) 28,1 Temperatura Mínima (ºC) 18,7 Temperatura Média (ºC) 23,4 Precipitação (mm) 274,7 Fevereiro 80,8 28,7 18,7 23,7 224,4 Março 79,0 28,4 18,1 23,3 142,9 Abril 74,6 27,5 16,6 22,1 62,7 Maio 74,3 24,7 13,6 19,2 50,9 Junho 73,4 24,3 12,4 18,4 28,6 Julho 69,2 24,9 12,1 18,5 28,3 Agosto 64,6 26,9 13,1 20,0 22,8 Setembro 67,1 27,5 15,0 21,3 60,2 Outubro 71,2 27,3 15,9 21,7 102,6 Novembro 75,6 28,3 17,3 22,8 144,5 Dezembro 80,4 28,2 18,1 23,2 218,8 Média anual 74,3 27,1 15,8 21,5 1361,6 * Mês UR = umidade relativa do ar; Fonte: Adaptado de http://www.cppse.embrapa.br/dados-meteorologicos * precipitação acumulada 3.2. Produção e Qualidade do Sêmen Neste experimento os touros só foram considerados aptos a doar sêmen quando apresentaram laudos zootécnicos reprodutivos e sanitários adequados, após a realização de exames de brucelose, tuberculose, tricomonose, campilobacteriose, 16 leptospirose, leucose bovina, febre aftosa, IBR/BVD e língua azul, além do exame semiológico completo dos órgãos genitais internos e externos. Os touros permaneceram em baias individuais com 16m² de área coberta e com acesso a piquete de 60,0 m², contendo cocho para volumoso e sal mineral além de bebedouro. Os mesmos apresentavam condições corporais adequadas com alimentação controlada para que o peso não aumentasse excessivamente, sendo esta baseada em volumoso, principalmente silagem de milho e capim picado. O sêmen foi obtido em diferentes frequências de coletas, em intervalos variando de 0 a 30 dias por meio da vagina artificial sendo feita as avaliações físicas como aspecto, cor, volume, turbilhonamento, motilidade, concentração e morfologia logo após a coleta. O sêmen que apresentasse 60% de motilidade foi diluído com uma concentração mínima de 20 milhões de células viáveis por dose, sendo o citrato de sódio o diluente mais usado. Entretanto, em determinadas épocas, o citrato foi substituído por lactose, leite ou Tris-gema (Tris-hidroximetil-amino metano, gema de ovo). Foram congeladas 2.700 doses de sêmen de cada touro, das quais 600 foram utilizadas no teste de progênie e as 2.100 doses restantes, estocadas na central da fazenda. 3.3. Análises Estatísticas Os touros foram agrupados em três grupos genéticos, com fração de genes de Bos taurus variando entre 5/8, 3/4 e 7/8, com 37, 74 e 45 animais, respectivamente. As observações foram agrupadas em nove classes de idade à coleta (cidtc), determinadas da seguinte maneira: cidtc 1 (≤ 660 dias), cidtc 2 (661780 dias), cidtc 3 (781-900 dias), cidtc 4 (901-1020 dias), cidtc 5 (1021-1140 dias), cidtc 6 (1141-1260 dias), cidtc 7 (1261-1500 dias), cidtc 8 (1501-1800 dias) e cidtc 9 (> 1801 dias). As classes trimestrais de coleta (ctric) foram: ctric 1 (dezembro, janeiro e fevereiro), ctric 2 (março, abril e maio), ctric 3 (junho, julho e agosto), ctric 4 (setembro, outubro e novembro). Os intervalos de dias entre as coletas (cintdiac) foram agrupados por meio das seguintes classes: cintdiac 0 (sem intervalo), cintdiac 1 (1-7 dias), cintdiac 2 (8-14 dias), cintdiac 3 (15-30 dias) e cintdiac 4 (>30 dias). 17 Conforme Martinez et al. (2000), foi calculado o número total de espermatozóides (NTZ = vol*concentração) e o número total de espermatozóides viáveis (NTZV = NTZ*motilidade), assim como as características físicas do sêmen. A motilidade e a concentração foram transformadas para foram transformados para y / 100 , o volume e o NTZV y , para que a normalidade dos dados fosse obedecida. As análises de variância foram realizadas para as variáveis volume, motilidade, concentração e número total de espermatozóides viáveis (NTZV), usando o PROC MIXED do programa estatístico SAS. O modelo incluiu os efeitos fixos de grupo genético, idade do touro na coleta, ano de coleta, classe trimestre de coleta, classe intervalo de dias entre coletas, as interações entre touro e grupo genético e o efeito aleatório do touro. As estimativas das correlações entre as variáveis as variáveis volume, motilidade, concentração e número total de espermatozóides viáveis (NTZV), foram realizadas utilizando o PROC CORR do programa estatístico SAS. 18 4. RESULTADOS E DISCUSSÃO O número de observações (N), o coeficiente de variação (CV), as médias e o desvios-padrão (DP) para as características volume (VOL), concentração (CONC), motilidade (MOT) e número total de espermatozóides viáveis (NTZV) são apresentados na Tabela 2. Os valores encontrados neste estudo, para as características, volume (4,84 mL), concentração (0,93 x109 esptz mL-1 ), motilidade (46,51%) e número total de espermatozóides viáveis (239,14 x109 esptz mL -1), podem ser considerados como regular, e provavelmente ocorreram devido a grande variação da idade neste estudo. Sendo que as médias foram influenciadas pelos valores inferiores das características seminais dos touros jovens ou dos touros com idade avançada. As coletas, assim como as avaliações laboratoriais, foram realizadas por cerca de 11 anos e por diferentes técnicos, aumentando a subjetividade dos valores encontrados, o que também pode ter influenciado negativamente os resultados. Estes resultados sugerem uma produção e qualidade seminal regular, no entanto, se tratam de valores médios. Não podemos esquecer que na avaliação andrológica, o objetivo é a avaliação individual, e que na comparação entre raças, e 19 até mesmo dentro da mesma raça, os animais apresentam diferentes resultados e atingem a maturidade sexual em diferentes épocas. Mesmo apresentando resultados regulares, estes animais seriam classificados como inaptos temporários (FONSECA, 1997), sendo necessário uma nova avaliação. Tabela 2 - Número de observações, o coeficiente de variação, as médias e o desvios-padrão para as características volume (VOL), concentração (CONC), motilidade (MOT) e número total de espermatozóides viáveis (NTZV), para o sêmen de touros leiteiros mestiços em diferentes coletas Característica N Média DP CV CV (escala (escala (variável na escala (variável na escala original) original) original) transformada) VOL (mL) 12267 4,84 1,59 33,01 16,65 CONC 9 -1 (x10 esptz mL ) 11238 0,93 0,28 30,32 26,43 MOT (%) 12197 46,51 14,24 30,61 20,70 NTZV (x109 esptz mL-1) 11235 239,14 56,64 36,24 135,46 A média do volume por ejaculado encontrado neste experimento (4,84 mL) foi menor que a encontrada em touros zebuínos e taurinos (BRITO et al., 2002a); em touros da raça Gir leiteiro (MARTINEZ et al., 2000); em touros das raças Holandesa e Pardo Suíça, mantidos em ambientes tropicais, com idade entre 27 e 63 meses (JIMÉNEZ-SEVERIANO, 2002); porém maior do que o volume encontrado por Siddiqui et al. (2008), em touros mestiços Holandês x Sahiwal com 17,9 meses de idade; em touros da raça Nelore (FONSECA, 1997). Mandal et al. (2009), avaliando touros mestiço Holandês x Sahiwal encontrou valores intermediários, menores nos touros jovens (< 30 meses), e maiores nos touros adultos (31 a 70 meses). A concentração média encontrada neste estudo (0,93 x109 esptz mL-1) foi maior que a verificada em touros das raças Holandesa e Pardo Suíça, mantidos em ambientes tropicais, com idade entre 27 e 63 meses (JIMÉNEZ-SEVERIANO, 20 2002); em touros da raça Guzerá com idade variando de 12 a 36 meses (OSORIO, 2010); porém menor que a encontrada em touros zebuínos e em touros taurinos (BRITO et al. 2002a); em touros da raça Gir leiteiro (MARTINEZ et al., 2000); e nos touros mestiços Holandês x Sahiwal (MANDAL et al., 2009). A motilidade média antes do congelamento observada neste estudo (46,51%) foi menor do que a verificada em touros da raça Nelore (FONSECA, 1997); em touros da raça Gir leiteiro (MARTINEZ et al., 2000); em touros zebuínos e taurinos (BRITO et al., 2002a); em touros mestiços Holandês x Sahiwal (MANDAL et al., 2009); porém maior que a observada em touros das raças Holandesa e Pardo Suíça, mantidos em ambientes tropicais, com idade entre 27 e 63 meses (JIMÉNEZ-SEVERIANO, 2002); e em touros da raça Guzerá com idade variando de 12 a 36 meses (OSORIO, 2010). O número total de espermatozóides viáveis (NTZV) encontrado neste estudo (239,14 x109 esptz mL-1), foi menor do que o verificado em touros da raça Gir leiteiro (MARTINEZ et al., 2000); em touros mestiços Holandês x Sahiwal (MANDAL et al., 2009); em touros zebuínos e europeus (KOIVISTO et al., 2009); porém maior que a observada em touros das raças Holandesa e Pardo Suíça, mantidos em ambientes tropicais, com idade entre 27 e 63 meses (JIMÉNEZ-SEVERIANO, 2002). Devido aos problemas de fertilidade dos touros europeus mantidos em regiões tropicais, os resultados encontrados neste estudo, demonstram a importância dos touros mestiços como uma opção para introduzir material genético de raças especializadas em ambientes tropicais. As estimativas das correlações entre as variáveis estudadas (Tabela 3), embora significativas, foram médias – altas apenas entre NTZV e as demais variáveis, o que era de se esperar, já que para o cálculo do NTZV são utilizadas as demais variáveis. A correlação média entre MOT e CONC, pode ser explicada por serem variáveis dependentes do metabolismo espermático, logo, ambas se modificam quando ocorre alteração metabólica, concordando com Folhadela (2006). A correlação muito baixa entre VOL e CONC, indica que touros mestiços que produzem maiores volumes no ejaculado apresentam uma menor concentração de 21 espermatozóides por ejaculado, resultado que já era esperado, e está de acordo com o verificado em touros leiteiros taurinos (DEEN DASS et al., 1998) e zebuínos (MARTINEZ et al., 2000). Tabela 3 – Correlação entre as características volume (VOL), concentração (CONC), motilidade (MOT) e número total de espermatozóides viáveis (NTZV) VOL ------ VOL CONC 0,02 MOT 0,25 0,03 CONC NTZV 0,64 <,0001 ------ MOT <,0001 0,31 0,50 <,0001 <,0001 ------ 0,65 <,0001 4.1. Grupo Genético As comparações entre os diferentes grupos genéticos com relação às características do sêmen (volume, concentração, motilidade e número total de espermatozóides viáveis) estão apresentadas na Tabela 4. Tabela 4 - Médias seguidas pelos erros-padrão para volume (VOL), motilidade (MOT), concentração do sêmen (CONC), e número total de espermatozóides viáveis (NTZV) em função dos grupos genéticos dos touros GG N VOL (ml) MOT (%) CONC NTZV (x109 esptz mL-1) (x109 esptz mL-1) 5/8 37 5,4962 ± 0,070 b 50,0137 ± 0,795 a 0,9082 ± 0,012 ª 282,59 ± 5,968 b 3/4 74 5,9461 ± 0,058 ª 47,4863 ± 0,650 b 0,8929 ± 0,011 ª 301,34 ± 5,123 7/8 45 5,4889 ± 0,071 b 51,2519 ± 0,796 a 0,9162 ± 0,012 ª 296,85 ± 5,940 ª a b Valores seguidos por letras distintas na mesma coluna diferem estatisticamente entre si (P<0,01) O grupo genético teve influência significativa sobre o volume do ejaculado, o NTZV e a motilidade (Tabela 4). Para a concentração espermática o efeito do grupo genético não foi significativo. Ao contrário do que foi verificado por Brito et al. (2002a), onde o efeito de grupo genético foi significativamente diferente para concentração e não para o volume, motilidade e número total de espermatozóides viáveis. 22 Os touros 7/8 apresentaram melhores resultados na concentração e na motilidade, no entanto, estes resultados não foram significativamente diferentes aos dos touros 5/8, não havendo também diferença significativa entre os touros 7/8 e 5/8 para o volume e número total de espermatozóides viáveis por ejaculado. Demonstrando desta maneira, não haver diferença na produção e na qualidade seminal entre os touros mestiços com maior fração de genes Bos Taurus (7/8), com os touros de menor fração (5/8). Os touros 3/4 tiveram um maior volume, sendo significativamente diferente dos touros 5/8 e 7/8. Também apresentaram um maior número total de espermatozóides viáveis por ejaculado, havendo diferença significativa apenas com os touros 5/8. No entanto, os touros 3/4 apresentaram um menor resultado na motilidade (significativamente diferente dos touros 5/8 e 7/8), e também na concentração (não havendo diferença significativa com os touros 5/8 e 7/8). Indicando desta maneira uma maior produção seminal, porém, com uma menor qualidade. Resultado que está de acordo com a baixa correlação entre VOL e CONC encontrada na Tabela 3. Asad et al. (2004), estudaram o efeito de sete diferentes grupos genéticos sobre as características do sêmen (volume, concentração e motilidade), e observou diferenças significativas (P<0,001), nas características seminais de touros de diferentes grupos genéticos, do cruzamento entre as raças Sahiwal x Holandesa. Brito et al. (2002b) avaliando as características de produção e qualidade seminal de touros Bos indicus, Bos taurus e mestiços (Bos indicus x Bos taurus) em três centrais de inseminação artificial no Brasil, verificaram que o efeito de grupo genético não foi significativo para produção e qualidade do sêmen. Os touros Bos indicus apresentaram um menor volume seminal, entretanto, uma maior concentração, um maior número total de espermatozóides e um maior número total de espermatozóides viáveis, do que os touros Bos taurus e que os touros mestiços. Os touros mestiços apresentaram uma maior motilidade, seguido pelos touros Bos indicus e dos touros Bos taurus, mantendo desta forma, uma produção de sêmen intermediária, porém com uma maior qualidade. Diferentemente do que foi verificado por Mathew et al. (1982), citado por Mandal et al. (2009), onde verificaram uma menor qualidade seminal nos touros mestiços Pardo Suíço x Zebu do que nos touros da raça Pardo Suíça mantidos sob um mesmo manejo e em condições climáticas tropicais na Índia, 28,3% dos touros da 23 raça Pardo Suíça foram rejeitados devido à baixa qualidade e desempenho sexual, enquanto nos touros mestiços a taxa foi de 63.9%, 73.8% e 76.9% nos touros 3/4, 5/8 e 1/2 Pardo Suíço, respectivamente. 4.2. Idade do Touro O efeito da classe de idade do touro na coleta (CIDTC) foi significativo (P<0,0001) para o volume, concentração, motilidade e NTZV (Tabela 5). Tabela 5 - Média seguidas pelos erros-padrão para volume (VOL), motilidade (MOT), concentração (CONC) do sêmen e número total de espermatozóides viáveis (NTZV) em função das classes de idade do touro na coleta de sêmen (CIDTC) CIDTC VOL (mL) 1 (≤22 meses) 4,3860 ± 0,102 MOT (%) a CONC NTZV 9 -1 9 -1 (x10 esptz mL ) (x10 esptz mL ) 36,6003 ± 1,134 a 0,7379 ± 0,018 ª 178,07 ± 8,414 ª 2 (22 -26 meses) 4,8910 ± 0,093 b 43,1005 ± 1,016 b 0,8504 ± 0,017 b 234,73 ± 7,950 b 3 (26 - 30 meses) 5,3066 ± 0,087 c 48,9034 ± 0,948 c 0,9093 ± 0,015 c 273,03 ± 7,344 c 4 (30 -34 meses) 5,6216 ± 0,086 d 51,2855 ± 0,938 d 0,9400 ± 0,015 d 302,79 ± 7,245 d 5 (34 - 38 meses) 5,9318 ± 0,088 e 53,4034 ± 0,946 de cd 323,75 ± 7,356 ef 6 (38 - 42 meses) 6,0871 ± 0,091 ef 53,1295 ± 0,978 de d 325,92 ± 7,547 ef 7 (42 - 50 meses) 6,0882 ± 0,072 ef 52,2714 ± 1,011 de cd 320,62 ± 7,753 e 8 (50 - 60 meses) 6,1720 ± 0,104 ef 9 (> 60 meses) 6,3093 ± 0,103 f 54,5990 ± 1,154 e 52,9627 ± 1,160 de 0,9346 ± 0,015 0,9411 ± 0,016 0,9385 ± 0,016 0,9557 ± 0,018 d 0,9445 ± 0,018 d 343,93 ± 8,659 f 339,51 ± 8,576 ef Valores seguidos por letras distintas na mesma coluna diferem estatisticamente entre si (P<0,05) Resultados semelhantes foram encontrados por Dairra et al. (1997), que avaliaram a influência da idade de touros da raça Holandesa sobre a qualidade do sêmen, verificaram que a idade influenciou significativamente o volume, a concentração, o número de doses e anormalidades. E por Asad et al. (2004), estudaram o efeito da idade em touros (divididos em três grupos, de 4 a 6, 6 a 9 e 9 a 12 anos) sobre as características do sêmen em sete diferentes grupos genéticos. Os autores verificaram que o volume, a concentração e a motilidade, foram significativamente diferentes (P<0,001), para as diferentes classes de idade. 24 No entanto, Brito et al. (2002b) avaliaram o efeito da idade nas características de produção e qualidade seminal de touros Bos indicus, Bos taurus e mestiços em três centrais de inseminação. Os autores verificaram que o volume (mL) e o número total de espermatozóides viáveis (NTZV), aumentaram com a idade (P<0,05), porém não houve efeito significativo da idade na concentração e na motilidade. Neste estudo, o volume aumentou com o aumento da idade e a partir da CIDTC 5 (34 - 38 meses), a diferença entre as idades deixou de ser significativa, o que também ocorreu com o NTZV. A concentração aumentou com o aumento da idade e, a partir da CIDTC 4 (30 - 34 meses), as diferenças deixaram de ser significativas. Esse comportamento também ocorreu com a motilidade, com exceção da diferença entre as CIDTC 4 e 8, onde a CIDTC 8 (50 - 60 meses), apresentou a maior motilidade. Como as diferenças encontradas para motilidade e concentração seminal deixaram de ser significativas a partir dos 30 meses, ou seja, CIDTC 4 (30 - 34 meses), e as diferenças encontradas para volume e número total de espermatozóides viáveis (NTZV), deixaram de ser significativas a partir dos 34 meses, ou seja, CIDTC 5 (34 - 38 meses), estes resultados sugerem, que esses touros tenham atingido a maturidade sexual a partir dos 34 meses idade. Fato que não pode ser desconsiderado, é que na maioria dos trabalhos, a maturidade sexual é determinada pela porcentagem de defeitos morfológicos dos espermatozóides ejaculados. Ou seja, diz-se que um touro atingiu a maturidade sexual quando além de boa motilidade e concentração espermática no ejaculado, ele tenha até no máximo 15% de defeitos maiores e não mais de 24% de menores nos espermatozóides ejaculados, e com no máximo 30% de defeitos totais (VALE FILHO, 1997). Neste estudo, somente as características físicas do sêmen foram avaliadas, e foi determinada a maturidade sexual quando as diferenças entre as idades deixaram de ser significativas, mas, analisando outros trabalhos a maturidade sexual de touros mestiços se mostra diferente. A maturidade sexual em touros das raças Holandesa, Gir e seus mestiços ocorreu aos 16,5±0,9, 20,3±2,1 e >19,0 meses, respectivamente (FRENEAU, 1992, e GUIMARÃES, 1993, citados por VALE FILHO, 1997). Estudos definiram a 25 maturidade sexual das raças Holandesa e Mestiços F1 (Holandês – Gir e Nelore) aos 18 meses (FRENEAU, 2011), aos 19 – 22,9 meses em touros Gir (SILVA et al., 2007); uma maior proporção de animais aptos à reprodução ocorreu após 24 meses de idade (FOLHADELA et al., 2006), aos 19 – 18 meses em touros Gir e Guzerá (SCHMIDT-HEBEL et al., 2000); e aos 24 meses em touros guzerá (PACHECO et al., 2007). Neste estudo, a única característica qualitativa seminal avaliada foi a motilidade, sendo inclusive utilizada como critério para diluição e preparação das doses, onde o sêmen que apresentasse 60% de motilidade foi diluído com uma concentração mínima de 20 milhões de células viáveis por dose. Testes de motilidade, morfologia e metabolismo seminal estão relacionados à fertilidade do sêmen. A avaliação da motilidade espermática é o teste mais amplamente utilizado, para avaliar a qualidade do sêmen, pois pode ser feito rapidamente, além da porcentagem de espermatozóides móveis estar relacionada à fertilidade (FOOTE, 2003); (ASAD et al., 2004). O plasma seminal bioquimicamente alterado, poderá apresentar alta concentração de espermatozóides no ejaculado com baixa patologia morfológica, no entanto, com motilidade também baixa (VALE FILHO, 1997). Visando realizar uma avaliação mais justa, a motilidade do sêmen, em porcentagem observada nas diferentes classes de idades na coleta de sêmen, em diferentes categorias, de acordo com a composição genética está apresentada na Tabela 6. Foram considerados como muito bom, os resultados que apresentassem uma motilidade maior que 60% (categoria 1), e bons resultados aqueles que apresentassem uma motilidade entre 30 a 50% (categorias 2, 3 e 4), segundo (FONSECA, 1997). Os resultados encontrados na Tabela 5 sugerem que a partir dos 34 meses de idade, os touros tenham atingido a maturidade sexual, mas ao se analisar a idade com que estes animais se tornam aptos à reprodução e com bons índices reprodutivos, (Tabela 6), pode-se verificar que 43,4% dos touros produziram sêmen com mais de 60% de motilidade com menos de 22 meses de idade, demonstrando 26 uma produção seminal com qualidade e uma boa precocidade sexual, inclusive, esta idade pode ser utilizada como critério de seleção em touros mestiços. Tabela 6 - Frequência observada para a motilidade do sêmen nas diferentes classes de idades na coleta de sêmen de touros mestiços B.taurus x B.indicus Idade Categoria 1 3/4 Categoria 2 (meses) Geral 5/8 7/8 Geral 5/8 ≤ 22 43,4 27,7 42,4 48,2 11,3 13,8 23 – 36 60,8 57,8 57,1 67,5 7,1 7,6 37 – 48 69,9 69,1 66,7 75,9 49 – 60 71,1 69,4 > 60 67,2 69,4 3/4 Categoria 3 7/8 Categoria 4 Geral 5/8 3/4 7/8 Geral 5/8 3/4 7/8 11,2 10,9 19,4 13,8 21,0 18,6 25,8 44,4 25,2 22,1 8,1 5,6 17,3 19,3 18,6 14,4 14,6 15,2 16,1 12,3 8,6 6,8 11,7 6,3 9,9 9,5 10,6 9,3 11,4 14,4 10,8 8,3 74,0 69,4 7,0 6,5 7,0 6,5 13,9 16,8 9,8 16,8 7,8 7,1 9,0 7,1 64,4 71,4 8,2 10,3 5,1 17,1 14,7 10,7 20,2 2,8 9,7 9,5 10,1 8,5 Categoria 1: motilidade ≥ 60%, Categoria 2: motilidade = 50%, Categoria 3: motilidade = 40%, Categoria 4: motilidade = 30% Valores de motilidade espermática aceitáveis são atingidos após a puberdade, na faixa de idade de 9 aos 12 meses de idade em Bos taurus taurus e, aos 20 a 25 meses, em Bos taurus indicus de várias raças (OSORIO, 2010). Fonseca et al. (1997), que avaliaram as qualidades físicas e morfológicas de 2.474 touros zebus de diferentes idades, verificaram que a motilidade foi maior na faixa etária de 18 a 24 meses (64,15%), não significativamente diferente (P<0,01), das faixas etárias de 24-36 meses (59,95%), 36-48 meses (59,30%), 48-60 meses (63,85%) e ≥60 meses (60,34%), porém significativamente diferente da faixa etária 12-18 (42,22%). Demonstrando que os touros zebus atingem a maturidade sexual mais precocemente que os touros mestiços avaliados neste estudo. Os touros 7/8 foram mais precoces e os 5/8 menos. Aos 22 meses de idade 48,2% dos touros 7/8 produziram sêmen com mais de 60% de motilidade, enquanto somente 27,7% dos touros 5/8 atingiram esta produção. Os touros 3/4 mantiveram uma precocidade sexual intermediária. Aos 22 meses de idade 42,4% dos touros 3/4 produziram sêmen com mais de 60% de motilidade, obtendo inclusive, uma maior porcentagem em relação aos touros 7/8 na faixa etária dos 49 aos 60 meses. 27 Estes resultados foram encontrados, provavelmente devido ao grau de sangue da raça holandesa, onde touros mestiços com maior fração de genes Bos Taurus (7/8 e 3/4), se mostraram sexualmente mais precoces. A porcentagem de touros em relação ao potencial reprodutivo aumentou de acordo com a idade, sendo que de forma geral, esses touros atingiram uma produção seminal com mais de 60% de motilidade entre 37 e 48 meses, concordando com a maturidade sexual sugerida pela Tabela 5. Com menos de 22 meses de idade também foram encontrados os maiores valores para as correlações entre todas as variáveis (Tabela 7). Tabela 7 – Correlação entre as características volume (VOL), concentração (CONC), motilidade (MOT) e número total de espermatozóides viáveis (NTZV) CIDTC 1 VOL (≤22 meses) CONC VOL CONC MOT NTZV ------ 0,09 0,20 0,57 ------ 0,56 0,57 ------ 0,77 0,06 0,20 0,57 ------ 0,46 0,53 MOT CIDTC 2 VOL (22 -26 meses) CONC ------ MOT CIDTC 3 VOL (26 - 30 meses) CONC ------ ------ 0,73 0,00 0,21 0,62 ------ 0,28 0,48 MOT CIDTC 4 VOL (30 -34 meses) CONC ------ ------ 0,67 0,02 0,20 0,68 ------ 0,21 0,41 MOT CIDTC 5 VOL (34 - 38 meses) CONC ------ ------ 0,68 -0,03 0,17 0,58 ------ 0,14 0,54 ------ 0,61 -0,12 0,11 0,56 ------ 0,06 0,50 ------ 0,56 -0,09 0,09 0,59 ------ 0,14 0,52 ------ 0,56 -0,10 0,19 0,58 ------ 0,20 0,59 ------ 0,47 -0,08 0,19 0,65 ------ 0,23 0,46 ------ 0,52 MOT CIDTC 6 VOL (38 - 42 meses) CONC ------ MOT CIDTC 7 VOL (42 - 50 meses) CONC ------ MOT CIDTC 8 VOL (50 - 60 meses) CONC ------ MOT CIDTC 9 VOL (> 60 meses) CONC ------ MOT 28 No entanto, as correlações médias – altas foram encontradas entre MOT e CONC e entre NTZV com VOL, CONC e MOT. A baixa correlação entre VOL e MOT e a muito baixa entre VOL e CONC, indica que touros mestiços que produzem maiores volumes no ejaculado apresentam uma menor concentração e motilidade por ejaculado, ou seja, maior produção menor qualidade. De forma geral, ocorreu uma diminuição dos valores das correlações entre as variáveis VOL x CONC, VOL x MOT e MOT x CONC com o aumento da idade dos touros. Segundo Taylor et al. (1985); Almquist e Amann, (1976), citados por Mathevon et al. (1998), touros maduros apresentam maiores volumes seminais. Porém a concentração e a motilidade diferem significativamente com a idade do touro, tendo a tendência de aumentar somente até os 22 meses de idade, concordando com os valores encontrados neste estudo. Fato que não ocorreu apenas entre NTZV e as demais variáveis, o que era de se esperar, já que para o cálculo do NTZV são utilizadas as demais variáveis. Os resultados para as correlações entre NTZV e VOL e entre NTZV e MOT encontrados neste estudo, estão e acordo com as verificadas em touros leiteiros taurinos (DEEN DASS et al., 1998); e zebuínos (MARTINEZ et al., 2000). 4.3. Época de Coleta As comparações do efeito das diferentes classes de época de coleta de sêmen sobre as características do sêmen (VOL, MOT, COM e NTZV) estão apresentadas na Tabela 8. O efeito do trimestre de coleta foi significativo sobre o volume e sobre NTZV, no entanto, não foi significativo sobre a concentração e a motilidade. Isto pode ter ocorrido devido a pouca variação das condições climáticas como, umidade relativa do ar e temperatura ambiental da região em que as coletas foram realizadas (Tabela 1). 29 Tabela 8 - Média seguidas pelos erros-padrão para volume (VOL), motilidade (MOT), concentração (CONC) do sêmen e número total de espermatozóides viáveis (NTZV) em função da época de coleta do sêmen Trimestre VOL MOT (mL) CONC 9 (%) NTZV -1 (x10 esptz mL ) 9 -1 (x10 esptz mL ) 1 (dez, jan e fev) 5,8405 ± 0,076 a 50,540 ± 0,810 a 0,9238 ± 0,014 a 309,15 ± 6,658 a 2 (março, abril e maio) 5,5529 ± 0,067 b 48,509 ± 0,720 b 0,9081 ± 0,012 ab 283,64 ± 5,798 b 3 (junho, julho e agosto) 5,4623 ± 0,063 b 49,228 ± 0,680 ab 0,8949 ± 0,011 b 278,87 ± 5,513 b 4 (set, out e nov) 5,7193 ± 0,064 a 50,057 ± 0,693 ab 0,8960 ± 0,011 b 302,71 ± 5,519 a Valores seguidos por letras distintas na mesma coluna diferem significativamente entre si (P<0,05) O trimestre 1 (dezembro, janeiro e fevereiro) e o 4 (setembro, outubro e novembro) foram os que apresentaram maior produção e maior qualidade de sêmen mesmo sendo meses mais quentes, com maior umidade e em períodos chuvosos. Provavelmente em razão do período das águas favorecer o crescimento da pastagem, melhorando o aporte forrageiro aos animais. No entanto, estes resultados não estão de acordo com a maioria dos trabalhos realizados em ambientes tropicais. Umidade excessiva durante uma época específica pode reduzir a produção de sêmen (MATHEVON et al., 1998), o que também foi observado por Fields et al. (1979), onde a produção e a qualidade do sêmen dos touros taurinos e seus mestiços mantidos em ambiente tropical diminuiu nas estações mais quentes e úmidas. Avaliando touros em centrais de inseminação artificial, Anchieta et al. (2005) verificaram que tanto os touros de raças zebuínas quanto os de raças taurinas tiveram mais ejaculados congelados na estação seca do que na estação chuvosa, o que também foi verificado por Silva et al. (2009), que constataram que o sêmen obtido nos meses mais úmidos apresentou menor qualidade. Altas temperaturas nos períodos anteriores a coleta, afetaram significativamente todas as características seminais nos touros jovens, no entanto, não influenciaram o volume e a motilidade nos touros adultos (MATHEVON et al., 1998). Segundo Koivisto et al. (2009), as características seminais variaram durante o ano entre os touros B. indicus e B. taurus. Com exceção do volume do ejaculado, os 30 touros zebuínos não foram afetados pela estação de coleta e apresentaram maiores valores na concentração e motilidade espermática comparados com os touros europeus. Neste estudo os zebuínos apresentaram uma maior motilidade durante o verão indicando uma maior resistência, que ficou comprovada, pois nos touros taurinos a motilidade diminuiu significativamente nos meses de verão 51,1% (Janeiro, Fevereiro, Março) e outono 53,7% (Abril, Maio e Junho), comparando com os meses de inverno 58,5% (Julho, Agosto e Setembro) e primavera 56,7% (Outubro, Novembro e Dezembro). Brito et al. (2002a), não verificaram efeito significativo de umidade, temperatura ambiental e de estação na produção e qualidade do sêmen. Oliveira et al. (2006), obtiveram resultados mostrando uma possível maior influência da estação nos aspectos morfológicos do que nos físicos. Os valores das médias anuais encontrados na Tabela 1, temperatura média de 21,5 ºC e umidade relativa do ar de 74,3%, e os resultados encontrados neste estudo, sugerem que, para a cidade de São Carlos, qualquer época do ano seria indicada para coleta de sêmen. 4.4. Ano de Coleta O efeito de ano da coleta foi significativo sobre o volume, a motilidade, a concentração e no número total de espermatozóides viáveis (Figura 1). No intervalo entre os anos de 1979 a 1980, houve um aumento em todas as variáveis analisadas, que se manteve até o ano de 1983, com exceção da motilidade e NTZV, onde os valores dessas características diminuíram entre os anos de 1980 a 1983. Em geral, entre os anos de 1983 a 1986, houve um aumento em todas as variáveis analisadas, com exceção da concentração do ejaculado. Este aumento foi seguido por uma oscilação em todas as variáveis analisadas até 1988. Entre os anos de 1988 a 1989, ocorreu uma diminuição nos valores, seguido por um aumento no ano de 1990, em todas as variáveis analisadas. 31 60 7,5 7 6,5 6 5,5 5 4,5 4 3,5 55 50 45 40 35 30 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 a) 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 Volume da produção de sêmen em função do ano da coleta b) 0,1 1 400,00 380,00 360,00 340,00 320,00 300,00 280,00 260,00 240,00 220,00 200,00 0,95 0,095 0,9 0,09 0,85 0,8 0,085 0,75 0,08 0,7 0,075 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 0,07 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 c) Motilidade espermática em função do ano da coleta Concentração espermática em função do ano da coleta d) Número total de espermatozóides viáveis em função do ano da coleta Figura 1: Volume da produção do sêmen (a), motilidade (b) e concentração espermática (c) e número total de espermatozóides viáveis (d), em função do ano da coleta de sêmen. Os intervalos entre os diferentes anos de coleta, podem ter interferido nos resultados das avaliações andrológicas, devido a diferenças entre os anos, no manejo nutricional, na pastagem ou silagem, nas coletas e avaliações laboratoriais (por terem sido realizadas por cerca de 11 anos e por diferentes técnicos), ou também por diferenças climáticas bruscas entre os anos. 4.5. Intervalo de Dias entre Coletas As comparações do efeito das classes de intervalo de dias entre as coletas sobre as características do sêmen (VOL, MOT, COM e NTZV) estão apresentadas 32 na Tabela 9. Tabela 9 – Médias estimadas, seguidas pelos erros-padrão para volume (VOL), motilidade (MOT), concentração (CONC) do sêmen e número total de espermatozóides viáveis (NTZV), em função do intervalo entre coletas do sêmen, para touros mestiços leiteiros Classes de intervalo de dias entre as coletas VOL (mL) MOT (%) CONC 9 -1 (x10 esptz mL ) NTZV 9 -1 (x10 esptz mL ) 0 (sem intervalo) 5,1129 ± 0,052 a 48,393 ± 0,570 a 0,8488 ± 0,010 a 254,27 ± 4,770 a 1 (1-7 dias) 5,4324 ± 0,050 b 51,537 ± 0,552 b 0,9397 ± 0,009 b 301,45 ± 4,396 b 2 (8-14 dias) 5,7566 ± 0,065 c 3 (15-30 dias) 5,7612 ± 0,097 c 48,920 ± 0,903 ac 0,8893 ± 0,019 c 4 (>30 dias) 6,1557 ± 0,096 d 48,649 ± 0,902 ac 0,9170 ± 0,018 bc 50,419 ± 0,657 c 0,9340 ± 0,012 bc 309,81 ± 5,802 b 300,35 ± 9,195 302,09 ± 8,961 b b Valores seguidos por letras distintas na mesma coluna diferem entre si (P<0,05) O efeito do intervalo entre coleta foi significativo sobre o volume, concentração, motilidade e NTZV. A classe 0, ou seja, duas coletas diárias, apresentou os piores resultados em todas as características avaliadas. Ejaculações frequentes não resultam somente em um baixo volume, mas afetam também a qualidade do sêmen, e quando são feitas duas ejaculações consecutivas no mesmo dia, a segunda usualmente apresenta um menor volume e qualidade (ASAD et al., 2004). Somente o volume aumentou com o aumento no intervalo entre as coletas. A classe 4 (intervalo >30 dias) apresentou a maior média do volume seminal e foi significativamente diferente das outras classes. As diferenças entre todas as classes foram significativas com exceção das classes 2 (intervalo de 8 a 14 dias) e 3 (intervalo de 15 a 30 dias). Na concentração a classe 1 (intervalo de 1 a 7 dias) também apresentou a maior média, porém sem diferença significativa com as classes 2 (intervalo de 8 a 14 dias) e 4 (intervalo >30 dias). Diferentemente que o verificado por Mathevon et al. (1998), onde a duração do intervalo entre coletas afetou significativamente as características seminais de touros jovens e maduros, e para ambas as categorias, o volume e a concentração de espermatozóides em uma ejaculação foram maiores, geralmente, usando um intervalo de 4 a 7 dias nos touros jovens e, de 5 dias para os touros maduros. 33 Na motilidade a classe 1 (intervalo de 1 a 7 dias) apresentou o maior resultado sendo significativamente diferente das outras classes. O número total de espermatozóides viáveis foi maior na classe 2 porém sem ser significativamente diferente das classes 1, 3 e 4. Como o objetivo principal das centrais de coleta de sêmen, é maximizar a produção de espermatozóides móveis, por unidade de tempo, afim de determinar qual intervalo produz mais espermatozóides por mês (MATHEVON et al., 1998). Neste estudo, o menor intervalo entre coletas, classe 1, produziu ejaculados com uma maior motilidade, maior concentração e um maior número total de espermatozóides viáveis por ejaculado, sendo assim o mais indicado para touros mestiços. 34 5. CONCLUSÃO Este estudo sugere que a avaliação e a seleção andrológica em touros mestiços devem iniciar antes dos 22 meses de idade, diminuindo os custos de produção, reduzindo o intervalo entre gerações, aumentando o ganho genético e a produtividade. Os touros 7/8 foram mais precoces, os 3/4 mantiveram uma precocidade sexual intermediária e os 5/8 menos precoces. Estes touros apresentaram maior produção de sêmen nos meses mais quentes e em períodos chuvosos, demonstrando desta maneira, uma boa capacidade adaptativa em ambientes tropicais. Os touros 7/8 e 5/8 apresentaram uma maior qualidade seminal, no entanto, os touros 3/4 uma maior produção. Os resultados encontrados neste estudo demonstram a importância e a capacidade dos touros mestiços, como uma opção para introduzir material genético de raças especializadas em ambientes tropicais. 35 36 6. REFERÊNCIAS AMARAL, T.B. et al. Touros Melhoradores ou Inseminação Artificial: Um Exercício de Avaliação Econômica. Documentos 140. ISSN 1517-3747. Dezembro, 2003. ANCHIETA, M.C. et al. Descarte e congelabilidade do sêmen de touros de raças zebuínas e taurinas em central de inseminação artificial no Brasil. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v.57, n.2, p.196-204, 2005. ARRUDA, R.P. et al. Importância da Qualidade do Sêmen em Programas de IATF e TETF. In: Anais do Simpósio Internacional de Reprodução Animal Aplicada. 2004. ASAD, L. et al. Genetic and non-genetic factors affecting the semen quality of bulls. Pakistan Journal of Biological Sciences, v. 7(11), p.1903-1907, 2004. ASBIA - ASSOCIAÇÃO BRASILEIRA DE INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL. Relatório estatístico de importação, exportação e comercialização de sêmen, p.19, 2010. BARBOSA, P.F. Avaliação do desempenho do gado mestiço leiteiro da Embrapa Pecuária Sudeste. Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento. ISSN 1981-2078. Dezembro, 2006. BARBOSA, R.T. et al. Como calcular a proporção touro:vaca para a estação de monta de bovinos de corte. Circular Técnica 53. ISSN 1981-2086. Dezembro, 2007. BRITO, L.F.C. et al. Effects of environmental factors, age and genotype on sperm production and semen quality in Bos indicus and Bos taurus AI bulls in Brazil. Animal Reproduction Science, v.70, p.181–190, 2002a. 37 BRITO, L.F.C. et al. Effect of age and genetic group on characteristics of the scrotum, testes and testicular vascular cones, and on sperm production and semen quality in AI bulls in Brazil. Theriogenology, v.58, p.1175-1186, 2002b. BRITO, L.F.C. et al. Effects of scrotal insulation on sperm production, semen quality, and testicular echotexture in Bos indicus and Bos indicus x Bos taurus bulls. Animal Reproduction Science, v.79, p.1-15, 2003. BRITO, L.F.C. et al. Sexual development in early- and late-maturing Bos indicus and Bos indicus x Bos taurus crossbred bulls in Brazil. Theriogenology, v.62, p.1198– 1217, 2004. CPPSE-EMBRAPA. Condições meteorológicas estação da embrapa pecuária sudeste coordenadas geográficas da estação meteorológicas. São Carlos. Disponível em: http://www.cppse.embrapa.br/dados-meteorologicos>. Acesso em: 20 novembro. 2011. CHENOWETH, P.J. et al. Breed and other Effects on Reproductive traits and Breeding Soundness Categorization in Young Beef Bulls in Florida. Theriogenology, v.46, p.1159-l 170, 1996. DAIRRA, M.S. et al. Genetic and environmental factors affecting semen quality of young Holstein bulls. Canadian Journal Animal Science, v.77, n.1, p.77-85, 1997. DeJARNETTE, J.M. et al. Sustaining the Fertility of Artificially Inseminated Dairy Cattle: The Role of the Artificial Insemination Industry. Journal of Dairy Science, v. 87(Suplemento), p. E93–E104, 2004. DEN DAAS, J.H.G. et al. The Relationship between the Number of Spermatozoa Inseminated and the Reproductive Efficiency of Individual Dairy Bulls. Journal of Dairy Science, v. 81, p. 1714–1723, 1998. FACÓ, O. et al. Análise do desempenho produtivo de diversos grupos genéticos Holandês x Gir no Brasil. Revista Brasileira de Zootecnia, v.31, n.5, p.1944-1952, 2002. FIELDS, M.J. et al. Age, season and breed effects in young beef bulls. Journal of Animal Science, v.48, n.6, 1979. FOLHADELLA, I.M. et al. Características andrológicas de touros da raça Gir. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v. 58, n.5, 2006. FONSECA, V.O.et al. Classificação andrológica de touros zebus (Bos taurus indicus) com base no perímetro escrotal e características morfo-físicas do sêmen. Revista Brasileira de Reprodução Animal, v.21, n.2. 1997. FONSECA, V.O. O touro no contexto da fertilidade do rebanho em reprodução. In: II Simpósio Internacional de Produção de Gado de Corte, p. 383-390. 2000. 38 FOOTE, R.H.; Fertility estimation: a review of past experience and future prospects. Animal Reproduction Science, v.75, p.119–139, 2003. FORDYCE, G. et al. Bull selection and use in Northern Australia 5. Social behaviour and management. Animal Reproduction Science, v.71, p.81-99, 2002. FRENEAU, G.E. Aspectos da morfologia espermática em touros. Revista Brasileira de Reprodução Animal, v.35, n.2, p.160-170, 2011. GALINA, C.S.; ARTHUR G.H. Review of cattle reproduction in the tropics. Part 6. The male. Animal Breed Abstract , v.59, p.403-412, 1991. GALLOWAY, D.B. Factors affecting fertility in bulls. Revista Brasileira de Reprodução Animal, v1, suplemento, p.27-46. 1989. GRESSLER, S.L. et al. Estudo das Associações Genéticas entre Perímetro Escrotal e Características Reprodutivas de Fêmeas Nelore. Revista Brasileira de Zootecnia, v. 29(2), p.427-437, 2000. JIMÉNEZ-SEVERIANO, H. Sexual development of dairy bulls in the Mexican tropics. Theriogenology, v.58, p.921-932, 2002. KOIVISTO, M.B. et. al. The effect of season on semen characteristics and freezability in Bos indicus and Bos taurus bulls in the southeastern region of Brazil. Reproduction Domestic Animal, v.44, p.587–592, 2009. MACKINNON, M.J. et al. Genetic variation and covariation in beef cow and bull fertility. Journal of Dairy Science. 68(5): p.1208-1214, 1990. MADALENA, F.E. Critérios para o Desenvolvimento de Raças de Gado Tropical Leiteiro: O Programa MLB. Informe Agropecuário, v.16, n.177, p.50-53, 1992. MANDAL, D. K. et al. Effect of age on spermiogram of Holstein Friesian x Sahiwal crossbred bulls. Animal, 4:4, p. 595–603, 2009. MARTINEZ, M.L. et al. Correlações entre características da qualidade do sêmen e a circunferência escrotal de reprodutores da raça Gir. Revista Brasileira de Zootecnia, v. 29, p. 700-706, 2000. MATHEVON, M. et al. Environmental, Management, and Genetic Factors Affecting Semen Production in Holstein Bulls. Journal of Dairy Science, v. 81, no.12, 1998. MENEGASSI, S.R.O. Aspectos Bioeconômicos da Avaliação Andrológica em Touros de Corte. Dissertação (Mestrado em Zootecnia) – UFSM, p.137. 2010. OLIVEIRA, K.M. et al. Influencia das Estações Seca e Chuvosa sobre as características seminais de touros das raças Nelore, Gir e Holandês Criados a pasto. Veterinária Notícias, v. 12, n. 2, p. 145-151, ago.-dez. 2006. 39 OSORIO, J.P. Características reprodutivas dos seis aos 36 meses de idade de machos da raça guzerá criados a pasto na região do cerrado mineiro. Dissertação (Doutorado em Ciência Animal). UFMG, p. 82, 2010. PACHECO, A. et al. Efeito da idade e de fazenda sobre as características seminais e perímetro escrotal em touros da raça Guzerá criados no norte e noroeste do Rio de Janeiro/Brasil. Asociación Latino Americana de Producción Animal, v. 15, n.4, p.157-164, 2007. PARKINSON, T.J. Evaluation of fertility and infertility in natural service bulls. Review. The Veterinary Journal, v.168, p.215–229, 2004. PEZZINI, T.G. et al. Características seminais de touros Curraleiros e Holandeses submetidos à insulação escrotal. Pesquisa Agropecuária Brasileira, v.41, n.5, p.863-868, 2006. PIMENTEL, C.A. Avaliação da fertilidade masculina em bovinos. In: 1 SIMPÓSIO DE REPRODUÇÃO EM BOVINOS – Palestras. Editado por Pegoraro, L.M.C. Pelotas: Embrapa Clima Temperado, 66p. 2008. PINEDA, N.R. Como agregar valor ao touro nelore. Revista Brasileira de Reprodução Animal, v.21, n.2. 1997. PIRES, A.V. Bovino Cultura de Corte. Piracicaba. Fealq. V1, 760p. 2010. SALVADOR, D.F. Perfis andrológicos, de comportamento sexual e desempenho reprodutivo de touros nelore desafiados com fêmeas em estro sincronizado. Dissertação (Mestrado em Zootecnia) – Escola de Veterinária, UFMG, p.53, 2001. SANTANA JÚNIOR, M.L. et al. Parâmetros genéticos de características reprodutivas de touros e vacas Gir leiteiro. Revista Brasileira de Zootecnia, v.39, n.8, p.17171722, 2010. SAS System for Windows®. Version 9.1, 2002, 2003. SAS Inst., Cary, NC, USA. SCHMIDT-HEBBEL, J. et al. Caracteristicas fisicas e morfologicas de sêmen de touros jovens das raças Gir, Guzerá, Nelore (Bos taurus indicus) e Caracu (Bos taurus taurus). Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v.52, n.5, p.461-467. 2000. SIDDIQUI, M.A.R. et al. Crossbred bull selection for bigger scrotum and shorter age at puberty with potentials for better quality semen. Reproduction Domestic Animal, v. 43, p. 74–79, 2008. SILVA, A. R. et al. Efeito da idade do touro e do período de colheita de sêmen sobre as características físicas e morfológicas do sêmen de bovinos de raças européias e zebuínas. Revista Brasileira de Zootecnia, v.38, n.7, p.1218-1222, 2009. 40 SILVA, A.S.F. Maturidade Sexual e Congelabilidade do Sêmen de Tourinhos Gir Leiteiro, Sob Manejo Alimentar Estratégico. TESE, UFMG – Escola de Veterinária 2007. SILVA, M.V.G.B. et al. Programa de Melhoramento Genético da Raça Girolando – Teste de progênie: Sumário deTouros 2011. Documentos 148. ISSN 1516-7453, p.46, 2011. SILVEIRA, T.S. et al. Maturação sexual e parâmetros reprodutivos em touros da raça Nelore criados em sistema extensivo. Revista Brasileira de Zootecnia, v.39, n.3, p.503-511, 2010. SINGH, B.K. Compêndio de Andrologia e Inseminação Artificial em Animais de Fazenda. Editora Andrei, p.331. 2006. TOELLE, V.D.; ROBISON, O.M. Estimates of genetic correlations between testicular measurements and female reproductive traits in cattle. Journal of Animal Science, v.60, n.1, p.89-100, 1985. TORRES-JUNIOR, J.R. S; HENRY, M. Sexual development of Guzera (Bos taurus indicus) bulls raised in a tropical region. Animal Reproduction, v.2, n.2, p.114-121, April/June, 2005. VALE FILHO, V.R. Andrologia no touro: Avaliação genital, exame do sêmen e classificação por pontos. Revista Brasileira de Reprodução Animal, v.21, n.3. 1997. VALENTIM, R. et al. Biometria testicular de touros Nelore (Bos taurus indicus) e touros cruzados Nelore-europeu (Bos taurus indicus x Bos taurus taurus) aos 20 e 24 meses de idade. Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science, v. 39, n. 3, p. 113-120. 2002. VILLARES, J.B. et al. Climatologia zootécnica. VIII. Possibilidades do Zebu na produção de leite em São Paulo. Boletim de Indústria Animal, v.9, n.1-2, p.3-31, 1947. 41