Área: CV ( X ) CHSA ( ) ECET ( ) MINISTÉRIO DA EDUCAÇÃO E CULTURA – MEC UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAUÍ – UFPI PRÓ-REITORIA DE PESQUISA E PÓS-GRADUAÇÃO – PRPPG COORDENADORIA GERAL DE PESQUISA – CGP Campus Universitário Ministro Petrônio Portela, Bloco 06 – Bairro Ininga Cep: 64049-550 – Teresina-PI – Brasil – Fone (86) 215-5564 – Fone/Fax (86) 215-5560 E-mail: [email protected]; [email protected] MICROBIOTA DE CANAIS RADICULARES DE DENTES QUE FORAM SUBMETIDOS A TRATAMENTO ENDODÔNTICO COM PASTA CTZ. Heloísa Clara Santos Sousa (bolsista do PIBIC/CNPq), Lúcia de Fátima Almeida de Deus Moura (Orientadora, Depto de Patologia e Clínica Odontológica – UFPI) Introdução: A doença cárie dentária está polarizada em grupos populacionais menos favorecidos economicamente. Com a progressão das lesões, pode haver o comprometimento pulpar (FABRIS, NAKANO, AVILA-CAMPOS, 2014). Alternativas foram desenvolvidas para tratamento endodôntico de dentes decíduos, preconizando a utilização de pastas antibióticas que dispensam a fase de preparo químico-mecânico e promovem desinfecção dos canais radiculares à distância e reparo tecidual (PINKY, SHASHIBHUSHAN, SUBBAREDDY, 2011). Nesse contexto, destaca-se a Pasta CTZ, composta por Cloranfenicol, Tetraciclina, Óxido de Zinco e Eugenol (CAPIELLO, 1964). O objetivo deste estudo foi identificar a microbiota de canais radiculares de dentes decíduos submetidos a tratamento endodôntico com pasta CTZ. Metodologia: Estudo observacional transversal conduzido na clínica odontológica infantil da UFPI e Laboratório de Microbiologia da UESPI. O projeto foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da UFPI (CAAE nº17803813.7.0000.5214). Pacientes na faixa etária de 7 a 11 anos, com dentes decíduos submetidos a tratamento endodôntico com pasta CTZ, foram selecionados de um banco de dados da clínica odontológica infantil da UFPI. Aqueles dentes que apresentavam restaurações satisfatórias e o sucessor permanente apresentasse radiograficamente 2/3 ou mais de raízes formadas, foram selecionados. Um estudo piloto envolvendo dois pacientes, que não foram incluídos na amostra, foi conduzido para avaliação da metodologia proposta. 32 pacientes foram avaliados e 5 dentes decíduos foram incluídos na amostra. Os dentes selecionados foram anestesiados e isolados com dique de borracha, seguido de desinfecção do campo operatório. Foi feita a abertura coronária e remoção de material do interior dos canais com pontas de papel absorvente estéreis. As pontas foram depositadas em meio de transporte reduzido (Ringer Pras, 2 ml, contendo 5 a 7 pérolas de vidro de 3mm). Em seguida foi realizada exodontia e hemostasia, seguindo o protocolo adotado na clínica odontológica infantil da UFPI. Os tubos com as amostras foram agitados em vórtex por 2 minutos e submetidos a diluição seriada até 10-3. As diluições foram inoculadas e incubadas a 350C em atmosferas de aerobiose (meios Triptic Soy Agar– TSA – e Saborraud Dextrose Agar), microaerofilia (TSA) e anaerobiose (Ágar Sangue, Brucella Agar e TSA), 2, 3 e 5 dias, respectivamente. A contagem e a interpretação foram realizadas como unidades formadoras de colônias por mililitro (UFC/mL). Culturas puras foram obtidas e congeladas. Foram realizados testes de atmosfera, coloração de Gram e inoculação em meios seletivos, para identificação dos respectivos gêneros e/ou espécies. A tabulação dos dados foi realizada através do programa Microsoft Office Excel®, para Windows. Foi realizada análise estatística descritiva dos mesmos. Resultados e Discussão: O microambiente torna-se propício a colonização microbiana após necrose pulpar. O sucesso do tratamento endodôntico depende da eliminação ou redução dos microorganismos presentes no sistema de canais radiculares (SOUSA et al., 2011). Diante da impossibilidade de esterilização dos canais radiculares, pastas compostas por antibióticos, dentre elas a pasta CTZ, tem sido preconizadas com o objetivo de reduzir a microbiota remanescente em canais de dentes decíduos com polpas necrosadas (CAPIELO, 1964; PINKY, SHASHIBHUSHAN, SUBBAREDDY, 2011). Infecções endodônticas são polimicrobianas e mais de 468 espécies bacterianas já foram identificadas (SOUSA et al., 2011). Em dentes decíduos a microbiota tem sido pouco investigada, entretanto, evidências têm demonstrado semelhança a encontrada em dentes permanentes. As espécies mais comumente relatadas são Enterococcus spp. (50%), Porphyromonas gingivalis (49%), Fusobacterium nucleatum (25%) e Prevotella nigrescens (11,4%) (ITO et al., 2011, FABRIS, NAKANO, AVILA-CAMPOS, 2014). TABELA 1: Gêneros obtidos de canais radiculares de dentes decíduos submetidos a tratamento endodôntico com pasta CTZ, através da técnica de cultura convencional. Gênero e/ou Espécie Coloração de Gram Intervalo das UFC/mL Candida spp Levedura (1.102 - 1,6.104) Enterococcus spp Cocos Gram-positivos (1.102 - 1.104) Streptococcus spp Cocos Gram- positivos (1.102 - 1.104) Lactobacilus spp Bacilos Gram-positivos (1.102 - >105) O perfil microbiano pós-tratamento convencional tem sido apontado como uma infecção prevalentemente bacteriana Gram-positiva (SOUSA et al., 2011). Os resultados de dentes tratados com pasta CTZ suportam esse achado, cuja justificativa provável é a capacidade de modificar as exigências nutricionais, mecanismo que permite sobrevivência durante longos períodos (SOUSA et al., 2011). (TABELA 1). A cultura microbiana (n= 5; 10 canais radiculares) apontou a predominância de cocos Gram-positivos (50%) seguidos de bacilos Gram-positivos (25%) e leveduras (25%) A presença de sinais e sintomas clínicos tem sido associada a presença de bactérias Gram-negativas e consequentes teores mais elevados de endotoxinas. No presente estudo nenhum paciente apresentou manifestações clínicas de infecção. Nos canais de dentes tratados com pasta CTZ foi observada redução do número total comparada a contaminação relatada para infecções primárias em dentes decíduos (ITO et al., 2011) (TABELA 1). No entanto a prevalência de amostras positivas para a presença de microorganismos não se alterou. O mesmo foi observado por ITO et al. (2011), após instrumentação e curativo com pasta de hidróxido de cálcio com clorexidina gel 1%. Os dentes tratados com pasta CTZ se diferem pela redução dos morfotipos. Não foram isolados bacterioides de pigmentação negra e aeróbios, sendo este um parâmetro de controle para contaminação. No presente estudo duas espécies do gênero foram isoladas. Dos micro-oganismos encontrados 82,35% eram anaeróbios facultativos e 17,65% anaeróbios estritos. Streptococcus spp. foram encontrados em todas as amostras, Enterococcus spp em quatro das cinco e Candida albicans em duas. Candida tropicalis e Lactobacillus spp. em apenas uma. Embora Candida albicans tenha sido relatada como uma levedura resistente ao uso de antimicrobianos, COSTA et al., 2013 relataram bons resultados com o uso de cimentos a base de Óxido de Zinco e Eugenol. GRÁFICO 1: Crescimento médio das UFC/mL obtidas em cada amostra de canais radiculares de dentes decíduos submetidos a tratamento endodôntico com pasta CTZ. Amostra 1 50000 8,05.103 Amostra 2 5.102 Amostra 3 9.10 2 Amostra 4 5,05.103 Amostra 5 1,5.105 0 Média UFC/mL Valores médios de UFC/mL foram obtidos por SOUSA et al., (2011) em seu estudo, que comparou a microbiota inicial, pós preparo químico mecânico e pós medicação intracanal a base de hidróxido de cálcio. Com exceção de uma das amostras pós CTZ que revelou semelhança a encontrada após medicação; os demais resultados foram inferiores, mais próximos aos encontrados após instrumentação (GRÁFICO 1). Estudos microbiológicos não são capazes de reproduzir, com fidelidade, a microbiota presente em canais radiculares (SOUSA et al., 2011). Limitação adicional se refere ao reduzido tamanho da amostra, em virtude da dificuldade de recrutamento, dados os critérios de inclusão/exclusão. Faz-se necessário, portanto, a continuação desse estudo. Conclusão: Dentes decíduos tratados com pasta CTZ apresentaram reduzida diversidade microbiana, com predomínio de cocos Gram-positivos, seguidos de bacilos Gram positivos e leveduras. Os micro-organismos remanescentes apresentaram baixa virulência, no entanto é necessário a realização de ensaio clínico randomizado. Palavras-chave: Tratamento endodôntico. Material obturador de canais radiculares. Dente decíduo. Apoio: PIBIC/CNPq Referências: CAPIELLO, J. Tratamientos pulpares en incisivos primarios. Revista de la Asociación Odontológica Argentina, v.52, n.4, p. 139-145, 1964. FABRIS A.S., NAKANO V., AVILA-CAMPOS M. J. Bacteriological analysis of necrotic pulp and fistulae in primary teeth. Journal of Applied Oral Science, v.22, n.2, p.118-24, 2014. ITO, I. Y.; et al. Microbial culture and checker board DNA–DNA hybridization assessment of bacteria in root canals of primary teeth pre- and post-endodontic therapy with a calcium hydroxide⁄chlorhexidine paste. International Journal Paediatric Dentistry, v.21, p.353–60, 2011. PINKY, C; SHASHIBHUSHAN, K. K.; SUBBAREDDY V. V. Endodontic treatment of necrosed primary teeth using two diferente combinations of antibacterial drugs: Na in vivo study. Journal of Indian Society of Pedodontics and Preventive Dentistry, v.29, n.2, p.121-7, 2011. SOUSA, D. L. S.; et al. Antibacterial Effects of Chemomechanical Instrumentation and Calcium Hydroxide in Primary Teeth with Pulp Necrosis. Pediatric Dentistry v.33, n.04, p.307-12, 2011.