64º Congresso Nacional de Botânica Belo Horizonte, 10-15 de Novembro de 2013 ANÁLISE MORFOLÓGICA DE SEMENTES DE Encholirium spectabile (BROMELIACEAE) DE DIFERENTES TAMANHOS 2 3 3 Pâmela C. M. Silva¹*, Marlene F. Figueiredo , Francisco Carlos B. Nogueira , Sebastião M. Filho ; Maria 4 Izabel Gallão 1 2 3 Aluna de IC do curso de Ciências Biológicas/UFC; Profa. Curso de Biologia/UVA/BPI/FUNCAP; Laboratório de 4 Análise de Sementes Professora do Dpt de Biologia/UFC Universidade Federal do Ceará, Departamento de Biologia/Laboratório de Biologia Celular Vegetal. *[email protected] Introdução Encholirium spectabile Mart. ex Schult. & Schult. f. (Bromeliaceae), é uma espécie endêmica do Brasil, conhecida popularmente como macambira-de-flecha, e encontra-se restrita aos afloramentos rochosos em regiões do semiárido do Nordeste brasileiro [2]. É utilizada na confecção artesanal de objetos decorativos e na farmacologia, onde o extrato fenólico tem atividade protetora da mucosa gástrica. As sementes caracteristicamente apresentam tamanhos variáveis, sem dormência e germinação do tipo epígea criptocotiledonar. O objetivo do presente trabalho foi caracterizar a morfologia interna da semente de macambira (E. spectabile) considerando seus diferentes tamanhos. escuras) formando uma cruz, chamada de “Cruz de Malta” (Fig. 1D). O amido é sintetizado em plastídeos e é uma das principais formas de reserva de carbono para a semente, sendo utilizada em fases posteriores para o desenvolvimento da plântula. Metodologia As sementes foram selecionadas por classes de tamanho através de peneiras, sendo caracterizadas por grandes (sementes com comprimento ≥ 2,50 mm), médias (sementes com comprimento < 2,50 mm e > 1,63 mm) e pequenas (sementes com comprimento < 1,63 mm). Para visualização microscópica, as sementes foram cortadas transversalmente e colocadas em solução fixadora de Karnovsky por 24 horas [1]. Após esse período o material fixado foi desidratado em bateria crescente de álcool etílico, e em seguida incluído em Historesin Leica. Os cortes obtidos foram submetidos às seguintes colorações: Azul de Toluidina (AT) pH 4,0, utilizado para identificar radicais aniônicos; Xylidine Ponceau (XP) pH 2,5 utilizado para a visualização de proteínas citoplasmáticas; PAS utilizada para identificação de polissacarídeos neutros, o Lugol e a luz polarizada para detecção da presença de amido. Resultados e Discussão Nas três classes de sementes, o AT revelou a presença de tegumento formado por três camadas de células com presença de material fenólico (Fig. 1A) apresentando coloração esverdeada. Compostos fenólicos possuem ação antioxidante e tem um grande poder farmacológico como por exemplo, inibindo o crescimento de Salmonella choleraesuis, Shigella sp. e Staphylococcus aureus nas concentrações do extrato de E. spectabile entre 0,078 e 0,62 mg/mL [3]. Nas células do cotilédone e no endosperma, foi observada intensa coloração com o XP, revelando a presença de glóbulos de proteína (Fig.1B) que podem desempenhar papéis importantes, como reserva de carbono e nitrogênio, estruturação e proteção para a semente. Através da Reação do PAS, que é especifica para polissacarídeos neutros foram observados glóbulos arroxeados no citoplasma, sendo esses glóbulos identificados como amido com a utilização do Lugol (Fig. 1C) e através da luz polarizada (Fig 1D). Algumas características microscópicas dos grãos de amido é presença hilo e lamenas (zonas claras e Figura 1. Corte transversal de sementes de Encholirium spectabile. A) Corte corados com AT pH 4,0; B) Cortes corados com XP pH 2,5; C) Corte corados com Lugol; D) Cortes submetidos à luz polarizada. TEG- Tegumento; COT- Cotilédone; END- Endosperma; G.A- Grãos de Amido; C.M- Cruz de Malta. Conclusões Sementes de macambira-de-flexa independentemente do tamanho possui como material de reserva amido, proteínas e carboidratos, além de material fenólico no tegumento confirmando sua ação farmacológica. Agradecimentos CNPQ e FUNCAP Referências Bibliográficas [1] KARNOVSKY,M.J.A. Formaldehyde-Gluteraldehyde fixative of high osmolality for use in electron microscopy. Journal of Cell Biology, v.27, p.137-138, 1995. [2] RAMALHO, M.; BATISTA, M. A.; SILVA. M. Xylocopa (Monoxylocopa) abbreviata Hurd & Moure (Hymenoptera: Apidae) e Encholirium spectabile (Bromeliaceae): uma associação estreita no semiárido do Brasil Tropical. Neotropical Entomology, v. 33, n. 4, p.417-425, 2004. [3] MACÊDO, L. A. R. et al. Atividade antibacteriana do extrato etanólico bruto das folhas de Encholirium spectabile (Bromeliaceae). http://www.ufrgs.br/spmb2012 (acesso em 27/08/2013). Bento Gonçalves, 2012. Rio Grande do Sul.