Universidade Federal Fluminense Departamento de Microbiologia e Parasitologia Disciplina: Virologia III Curso: Medicina Veterinária Introdução ao estudo dos Vírus Profa. Rita de Cássia Nasser Cubel Garcia • 1884 Chamberland (filtração) • 1892 Iwanowski • 1898 Beijenrinck “Vírus do mosaico do tabaco” Filtrabilidade dos vírus: material filtrado continha um veneno dissolvido de poder extraordinário ou um agente desconhecido tão pequeno que era capaz de atravessar os poros de um filtro que retinha bactérias Vírus = Latim: Veneno • 1898: Loeffler & Frosch vírus da febre aftosa • 1901: Walter Reed vírus da febre amarela www.slic2.wsu.edu 1953: W M Stanley et al. cristalizou o vírus do mosaico do tabaco Vírus ácido nucleico (DNA ou RNA) + proteínas - destituído dos sistemas essenciais para a atividade metabólica upload.wikimedia.org Replicação em célula hospedeira fig.cox.miami.edu Como “não tem vida”, os vírus permanecem excluídos da árvore da evolução. Os vírus são o resultado de genes de hospedeiros que, de alguma forma, escaparam e adquiriram um revestimento proteico. Mas os vírus trocam informações genéticas com os organismos vivos: - Alguns vírus podem permanecer no hospedeiro por longo período pois desenvolvem uma forma de evitar a detecção pelo sistema imunológico do hospedeiro. - O genoma de um vírus pode se integrar ao genoma da célula hospedeira, adicionando genes virais ao organismo invadido e até tornando-se parte fundamental de seu material genético. Acanthamoeba polyphaga Mimivirus (APMV) Vírus gigantes - Infectam amebas - São grandes como bactérias, tal como Ricktesias (750nm diam) Abrahao et al 2014 Virol J 11:120 - Tem genoma (DNA) maior que de muitas bactérias (1,2 milhões pb) - Possuem genes nunca detectados em outros vírus, que codificam enzimas (aminoacyl-tRNA synthetases) para síntese de nucleotídeos e aminoácidos - Entretanto, não carreiam genes para proteínas dependentes das do hospedeiro pra tradução protéica. - NÃO EXIBEM características reproduzem por divisão celular. implícitas no ribossomais conceito de sendo VIDA: não Sputnik virus: 50 nm diam e genoma DNA ds circular de18Kb infecta o mimivírus diminuindo em 70% a replicação viral “virofago” http://news.sciencemag.org/ Características dos vírus: • Pequenos (20 a 250 nm de diâmetro) 1 micron Bactéria (Staphyllococcus aureus) m ↓ cm ↓ mm ↓ µm ↓ nm ↓ Ǻ 10-2m 10-3m 10-6m 10-9m 10-10m Observação das partículas virais Microscópio eletrônico (A) Bacteriophage T4 vírus DNA infecta E. coli. (B) Potato virus X vírus RNA de planta filamentoso (C) Adenovirus Vírus DNA dupla fita (D)Influenza virus vírus RNA genoma segmentado Microscopia eletrônica: coloração negativa para visualização das partículas virais Características dos vírus: • Parasitas Intracelulares Obrigatórios Métodos de 1933: isolamento de vírus Influenza suíno em ovo embrionado estudo dos vírus alittleaboutvirology.blogspot.com Cultura de células: 1949: Enders et al. propagação de poliovírus em cultura primária de célula humana www.molvis.org Características dos vírus: • Constituição básica: proteína + ácido nucleico DNA ou podem ter enzimas lipídeos carboidratos RNA Características dos vírus: Possuem uma única espécie de ácido nucleico: DNA ou RNA Vírus DNA DNA dupla fita linear DNA dupla fita circular Adenovírus Papilomavírus Herpesvíus Poxvírus viralzone.expasy.org http://cmr.asm.org/content/22/1/76/F1.expansion.html DNA simples fita linear DNA simples fita circular Parvovírus Circovírus http://www.expertreviews.org/ viralzone.expasy.org galleryhip.com Características dos vírus: Vírus RNA: RNA simples fita linear polaridade (+) Picornavírus Coronavírus Flavivírus www.nature.com polaridade (-) Paramixovírus Transcriptase (RNA polimerase) Rabdovírus www.slideshare.net polaridade (+) com TR Retrovírus Transcriptase reversa Características dos vírus: Vírus RNA: RNA simples fita segmentado polaridade (-) Ortomixovírus transcriptase associada à cada fita de RNA http://www.eurosurveillance.org/ RNA dupla fita segmentado Rotavírus transcriptase associada à fita RNA negativa Capsídeo: Simetria icosaédria (cúbica) Icosaedro: 20 faces (cada face 1 triângulo equilátero) 12 vértices (cantos) pentons hexons www.web-books.com cada face 3 unidades idênticas 60 sub-unidades capsômeros Capsídeo: Simetria icosaédria (cúbica) Adenovírus Base do Penton fibra www.web-books.com Adenovírus Capsídeo: Simetria helicoidal www.erain.com Capsídeo: Simetria complexa Poxvírus www.elu.sgul.ac.uk www.poxvirus.org Bacteriófagos http://microbialuniverse.blogspot.com.br/2012/01/virology.html www.mansfield.ohio-state.edu Estrutura de um virion (partícula viral completa): Genoma DNA ou RNA NUCLEOCAPSÍDEO (todos) Capsídeo Proteínas ENVELOPE (alguns) Informação genética Infectividade Proteção do genoma União a receptores celulares Determinantes antigênicos Lipídeos Glicoproteínas virais União a receptores celulares Determinantes antigênicos Simetria do Capsídeo: Icosaédrico (cúbico) Helicoidal (espiral) Estrutura da partícula viral: • Vírus não envelopado: genoma + capsídeo nucleocapsídeo • Vírus envelopados: genoma + capsídeo + envelope com glicoproteínas Estabilidade da partícula viral: • Temperatura • pH • Solventes de lipídeos e detergentes vírus envelopados • Hipoclorito de sódio proteínas • Formaldeído proteínas • Luz UV genoma 1966 Comitê Internacional de Taxonomia Viral: Classificação dos vírus em famílias: Família: - viridae Sub – família: - virinae Gênero: - vírus Ác. Nucleico Simetria do capsídeo Envelope Tamanho Tipo Ac. Nucleico Família Virus DNA Icosaédrica Ausente 50nm fita dupla circular Papilomaviridae Papiloma Presente 100nm fita dupla linear Herpesviridae Herpes Ausente 20nm fita simples linear (+) Picornaviridae Febre aftosa 80nm fita dupla segmentado Reoviridae Rotavirus Presente 40nm fita simples linear (+) Flaviviridae Diarréia viral bovina Dengue Febre amarela Presente 100nm fita simples (+) linear diplóide Retroviridae FIV FeLV EIAV Presente 100nm fita simples linear (+) Coronaviridae Peritonite infecciosa felina 150nm fita simples linear (-) Rhabdoviridae Raiva Paramyxoviridae Cinomose Orthomyxoviridae Influenza RNA Icosaédrica Helicoidal 200nm 100nm fia simples (-) segmentado www.nlv.ch