Efeitos Morfofuncionais do AVE
0991 em Corações Isolados de Ratos
Tratados com Isoproterenol
Aluna: Thauana Luiza de Oliveira
Orientador: Prof. Dr. Anderson José Ferreira
PAD-Morfologia
Laboratório de Biologia do Desenvolvimento
Introdução
RENIN-ANGIOTENSIN SYSTEM
Angiotensinogen
Renin
Angiotensin I
ACE
Chymase
ACE 2
PEP, NEP
Angiotensin II
Angiotensin III
AMP
Angiotensin IV
ACE, NEP
Angiotensin-(1-7)
ACE2, PEP,
PCP
AMP
Angiotensin-(1-9)
ACE
Angiotensin-(1-5)
AVE 0991
 Agonista não-peptídico do receptor
Mas da ANG-(1-7);
 Estimula liberação de NO pelas células
endoteliais de aorta bovina e compete
com a 125I-ANG-(1-7) pela ligação ao
receptor Mas (Wiemer et al., 2002);
AVE 0991
 Efeito similar ao da ANG-(1-7) em
camundongos que receberam sobrecarga
hídrica e liberação de NO por células CHO
que expressam o receptor Mas (Pinheiro et al.,
2004);
 Estimula a liberação de NO e promove
vasodilatação dependente do endotélio em
segmentos de aorta de camundongos, e
essas ações são completamente abolidas por
antagonistas do receptor Mas ou por sua
deleção (Lemos et al., 2005).
Isoproterenol
Um modelo de hipertrofia e insuficiência cardíaca
 Agonista β-adrenérgico nãoseletivo: vasodilatação periférica e
aumento da freqüência cardíaca;
 Aumento do consumo de
oxigênio predispõe o coração a
danos isquêmicos (Grimm et al., 1998);
 Edema, infiltrado celular e fibrose:
déficit de contratilidade (Beznak et al., 1963);
 Acentuada necrose dos cardiomiócitos:
insuficiência cardíaca (Grimm et al., 1998).
Objetivos
Objetivo geral :
• Estudar os efeitos morfofuncionais do
AVE 0991 em corações isolados de
ratos tratados com isoproterenol.
Objetivos específicos :
• Determinar os efeitos do agonista do
receptor Mas da ANG-(1-7), AVE 0991,
na função cardíaca de ratos tratados
com isoproterenol.
• Avaliar o papel do NO na ação do AVE 0991
na função cardíaca de ratos tratados com o
isoproterenol.
• Analisar
qualitativamente
o
colágeno
perivascular e intersticial em ventrículo
esquerdo de corações de ratos controle,
tratados
com
isoproterenol
e
com
isoproterenol + AVE 0991 utilizando -se a
coloração Picro Sírius;
• Analisar
qualitativamente
o
colágeno
perivascular e intersticial em ventrículo
esquerdo de corações de ratos controle,
tratados
com
isoproterenol
e
com
isoproterenol + AVE 0991 utilizando-se a
coloração Tricrômico de Masson;
Metodologia
Salina Água Isoproterenol AVE 0991
0,1 ml/Kg 0,5 ml
i.p.
gavagem
Grupo 1
n=9
Grupo 2
n=5
Grupo 3
n=5
X
2,0 mg/Kg
i.p.
1,0 mg/Kg
gavagem
X
X
X
X
X
Grupo 4
n=8
Grupo 5
n=5
Salina
Água
Isoproterenol
0,1 ml/
Kg
i.p.
0,5 ml
gavagem
2,0 mg/Kg
i.p.
X
X
AVE
0991
1,0 mg/Kg
gavagem
L-NAME
10 mg/Kg
gavagem
X
X
X
X
Sistema de Perfusão
Registros
•
•
•
•
Tensão máxima e tensão mínima
dT/dt máxima e dT/dt mínima
Pressão de Perfusão
Freqüência Cardíaca
Transdutor de
Pressão
Transdutor de
Força
Resultados
EFEITOS FUNCIONAIS DO AVE 0991 EM
CORAÇÕES ISOLADOS DE RATOS
TRATADOS COM ISOPROTERENOL
Tensão Máxima
gramas (g)
15
10
***
5
*#
***
0
0
10
20
min
Controle
Isoproterenol
AVE 0991
Isoproterenol + AVE 0991
30
40
* p<0,05, **p<0,001
e ***p<0,0001
(comparado ao
controle); # p<0,001
(comparado ao
isoproterenol).
Tensão Mínima
gramas (g)
1.2
***
**
0.8
0.4
0
10
20
min
30
Controle
Isoproterenol
AVE 0991
Isoproterenol + AVE 0991
40
**p<0,001 e
***p<0,0001
(comparado ao
controle)
dT/dt Máxima
250
gramas/seg
200
***
150
*#
***
100
50
0
0
10
20
30
min
Controle
Isoproterenol
AVE 0991
Isoproterenol + AVE 0991
40
* p<0,05 e
***p<0,0001
(comparado ao
controle); #
p<0,001
(comparado ao
isoproterenol)
dT/dt Mínima
250
gramas/seg
200
***
150
*#
***
100
50
0
0
10
20
min
Controle
Isoproterenol
AVE 0991
Isoproterenol + AVE 0991
30
40
* p<0,05 e
***p<0,0001
(comparado ao
controle); #
p<0,001
(comparado ao
isoproterenol)
Pressão de Perfusão
100
mm Hg
75
**
** #
50
25
0
0
5
10
15
20
25
min
Controle
Isoproterenol
AVE 0991
Isoproterenol + AVE 0991
30
35
* p<0,001
,**p<0,0001
(comparado ao
controle); #
p<0,05
(comparado ao
isoproterenol)
Freqüência Cardíaca
250
#
200
bpm
*
150
100
0
10
20
min
30
Controle
Isoproterenol
AVE 0991
Isoproterenol + AVE 0991
40
* p<0,0001
(Controle
comparado ao
isoproterenol) e
# p<0,05
(Controle
comparado ao
Isoproterenol +
AVE 0991)
PAPEL DO ÓXIDO NÍTRICO NOS
EFEITOS FUNCIONAIS AVE 0991 EM
CORAÇÕES ISOLADOS DE RATOS
TRATADOS COM ISOPROTERENOL
Tensão Máxima
gramas (g)
15
***
*
**
***
10
5
0
0
10
20
30
min
Controle
L-NAME
Isoproterenol
Isoproterenol+AVE0991
Isoproterenol+AVE0991+L-NAME
40
***p<0,0001
(comparado ao
controle); **p<0,001
(comparado ao
isoproterenol), *p<0,01
(comparado ao
isoproterenol + AVE
0991)
Tensão Mínima
1.1
gramas (g)
1.0
***
0.9
0.8
#
0.7
0.6
0
10
20
30
min
Controle
L-NAME
Isoproterenol
Isoproterenol+AVE0991
Isoproterenol+AVE0991+L-NAME
40
***p<0,0001
(comparado ao
controle) e #p<0,05
(comparado ao
isoproterenol + AVE
0991)
dT/dt Máxima
250
gramas/seg
200
***
#
*
***
150
100
50
0
0
10
20
30
min
Controle
L-NAME
Isoproterenol
Isoproterenol+AVE0991
Isoproterenol+AVE0991+L-NAME
40
***p<0,0001 (comparado ao
controle); *p<0,001
(comparado ao
isoproterenol); #p<0,001
(comparado ao isoproterenol
+ AVE 0991)
dT/dt Mínima
gramas/seg
200
***
##
150
*
100
***
50
0
10
20
30
min
Controle
L-NAME
Isoproterenol
Isoproterenol+AVE0991
Isoproterenol+AVE0991+L-NAME
40
***p<0,0001 (comparado
ao controle); *p<0,001
(comparado ao
isoproterenol) e
##p<0,0001 (comparado
ao isoproterenol + AVE
0991)
Pressão de Perfusão
120
mmHg
95
***
70
#
**
*
45
20
0
10
20
30
min
Controle
L-NAME
Isoproterenol
Isoproterenol+AVE0991
Isoproterenol+AVE0991+L-NAME
40
***p<0,0001 e
**p<0,001
(comparado ao
controle); *p<0,05
(comparado ao
isoproterenol);
#p<0,0001(comparad
o ao isoproterenol +
AVE 0991)
Freqüência Cardíaca
240
bpm
220
*
***
200
180
0
10
20
30
40
min
Controle
L-NAME
Isoproterenol
Isoproterenol+AVE0991
Isoproterenol+AVE0991+L-NAME
***p<0,0001 e
* p<0,05
(comparado ao
controle)
ANÁLISE QUALITATIVA DO COLÁGENO
PERIVASCULAR EM VENTRÍCULO
ESQUERDO DE CORAÇÕES DE RATOS
B
A
C
Fotomicrografias evidenciando colágeno perivascular de
ventrículo esquerdo de ratos controle (A), isoproterenol (B) e
isoproterenol + AVE 0991 (C). Coloração: Picro Sírius. Aumento
de 40x.
B
A
C
Fotomicrografias evidenciando colágeno perivascular de ventrículo
esquerdo de ratos controle (A), isoproterenol (B) e isoproterenol + AVE
0991(C). Coloração: Tricrômico de Masson. Aumento de 10x.
ANÁLISE QUALITATIVA DO COLÁGENO
INTERSTICIAL EM VENTRÍCULO
ESQUERDO DE CORAÇÕES DE RATOS
B
A
C
Fotomicrografias evidenciando colágeno intersticial do ventrículo
esquerdo de rato controle (A), isoproterenol (B) e isoproterenol + AVE
0991 (C). Coloração: Tricrômico de Masson. Aumento de 40x.
Conclusões
O
AVE
0991
apresentou
efeito
cardioprotetor, atenuando a insuficiência
cardíaca induzida pelo isoproterenol. Essa
ação foi independente do NO.
 O efeito vascular do AVE 0991 em vasos de
corações de ratos tratados com isoproterenol
foi dependente da liberação de NO.
 O AVE 0991 exerceu atividade anti-fibrótica
em corações de ratos tratados com o
isoproterenol.
Muito Obrigada!