Enzimas na Parede P d Celular C l l Prof Bernardo Dias Parede Celular celulose pectina hemicelulose Parede Celular celulose pectina hemicelulose Celulose Terminal não redutor Terminal redutor Fonte celulósica GP Avicel 120-1000 Celulose bacteriana 2100-4500 Swollen celulose 45-1300 Algodão 10000-18000 Papel de filtro 450-1700 Polpa de madeira 650-1700 Madeira natural 2000-16000 Celodextrinas 1-14 Hemicelulose Ácidos orgânicos: Acético Urônico glucurônico galacturônico Hemicelulose Materiais Lignocelulósicos Fontes: SHLESER (1994); OLSSON e HAHN-HÄGERDAL (1996), AWAFO (1997); GHOSH e SINGH (1993); COUTO e SANROMÁN (2005); CEN e XIA (1999) Pectina Pectina Pectina Celulases 1. Oxidoredutases 3.2.1.4 endo 1,4-β-glucanase 2. Transferases 3.1 Ligações éster 3.2 Glicosilases ... 3. Hidrolases 4. Liases 5. Isomerases 6 Li 6. Ligases 3.13 Ligações C-S 3.2.1. S- e O- g glicosidases 3.2.1.21 1,4-β-glicosidase 3.2.1.74 glucana 1,4-β-glicosidase 3.2.1. N-glicosidases 3.2.1.91 1,4-β-celobiosidase Celulases Domínio Catalítico Módulo de Ligação a Carboidratos Celulases N li N-glicosilação il ã O li O-glicosilação il ã Celulases DC Humicola insolens 362 aa 40,9 kDa MLC CBH Trichoderma reesei 36 aa 3,7 kDa http://www.rcsb.org/pdb/home/home.do CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Glicose CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Glicose CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA ß-glicosidases Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA ß-glicosidases Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA ß-glicosidases Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA ß-glicosidases Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA ß-glicosidases Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA ß-glicosidases Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA ß-glicosidases Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA ß-glicosidases Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA ß-glicosidases Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA ß-glicosidases Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA ß-glicosidases Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA ß-glicosidases Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA ß-glicosidases Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA ß-glicosidases Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA ß-glicosidases Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases CASTRO, AM AÇÃO SINÉRGICA ß-glicosidases Celobiohidrolase II Celobiohidrolase I Endoglucanases Celulases: Propriedades exoglucanases endoglucanases d l Propriedade Valor Propriedade Valor Massa molecular 32-100 Massa molecular 49-72 pH ótimo 2,9-6,0 pH ótimo 4,0-6,4 pI 2,86-4,55 pI 4,1-4,5 Temperatura T t ótima (ºC) 50 80 50-80 Temperatura T t ótima (ºC) 50 75 50-75 ß-glicosidases ß glicosidases Propriedade Valor Massa molecular 45-250 pH ótimo 4,0-5,6 pI p 4,2-8,1 , , Temperatura ótima (ºC) 35-70 Fonte: MAHESHWARI et al., 2000 Celulases Fungos Alternaria, Aspergillus, Chaetomium, Fusarium, Humicola, Myrothecium, Penicillium, Polyporus, Rhizopus, Sporotrichum, Talaromyces, Thermoascus, Trametes, T i h d Trichoderma, Trichothecium, Verticillium, Zygorhynchus Bactérias Acetivibrio, Acidothermus, Achromobacter, Anaerocellum, Angiococcus, Bacillus, Butyrivibrio, Caldicellulosiruptor, Caldibacillus, Callfalcicula, Cellulomonas, Cellvibrio, Clostridium, Cytophaga, Erwinia, Eubacterium, Fervidobacterium, Fib b t Fibrobacter, H Halocella, l ll P Polyangium, l i Pseudomonas, Rhodothermus, Ruminococcus, Sorangium, Sporocytophaga, p y p g , Thermotoga, g , Vibrio Actinomicetos Melanocarpus, Micromonospora, Nocardia, Streptomyces, Streptosporangium, Thermobifida Celulases Celulases Celulases Celulases Microrganismo Fonte celulósica Condições de cultivo: Forma de operação; temperatura (ºC); pH Máximas atividades (tempo de processo) T. reesei Rut C30 Salgueiro pré-tratado a vapor FS; 30; 5,5-6,0 1390 FPU.L-1; 1450 UI BG.L-1 (4 d) T. reesei QM 9414 Avicel Bagaço Bagaço tratado com álcali FS; 30; 4,8 163 UI PF.L-1 (68 h) 85 IU PF.L-1 (68 h) 90 UI PF.L-1 (44 h) Thermoascus aurantiacus IMI 216529 Palha de trigo FES; 49; 4,0 5,5 FPU.g-1; 79 UI BG.g-1; 1709 UI EG.g-1; 4 UI CBH.g-1 Cultura mista T. reesei Rut C30 e Aspergillus Phoenicis QM 329 Esterco FS;27; 5,5 1540 FPU.L-1 (10 d); 640 UI BG.L-1 (9 d) Penicillium pinophilum IBT 4186 P. persicinum IBT 13226 P. brasilianum IBT 20888 Solka Floc FS;30;5,0 FS;25;5,0 FS;30;5,0 280 FPU.L-1 (221 h) 800 FPU.L-1 (236 h) 750 FPU.L-1 (229 h) T. reesei ZU ZU-02 02 Sabugo de milho e farelo de t i trigo FES; 30; 4,5 130 FPU.g-1 (6 d) P. decumbens 1 Palha e farelo de trigo FES;30;NR 15,2 FPU.g-1 (4 d); 50,6 UI BG.g-1 (4 d) A. terreus Bagaço de cana FS;35;4,0 110 FPU.L-1 (7 d); 1200 UI EG.L-1 (7 d) T. reesei QM 9414 T. reesei Rut C30 Fibra de milho pré-tratada FS;28;4,8 280 UI PF.L-1; 9529 UI EG.L-1; 640 UI BG.L-1 350 UI PF.L-1; 9350 UI EG.L-1; 730 UI BG.L-1 (8 d) Cultura mista T. reesei LM-UC4 e A. phoenicis QM 329 Bagaço de cana FES;30;NR 14 UI PF.g-1; 80 UI EG.g-1; 17 UI BG.g-1 (120 h) Fontes:BOLLÓK e RÉCZEY, 2000; AIELLO et al., 1996; KALOGERIS et al., 2003; WEN et al., 2005; JØRGENSEN et al., 2005; XIA e CEN, 1999; MO et al., 2004; EL-NAWWI e EL-KADER 1996; LI et al 2005; GUTIERREZ-CORREA e TENGERDY 1997 Celulases Celulases Celulases Celulases Celulases Hemicelulases Hemicelulases Hemicelulases Hemicelulases Hemicelulases Hemicelulases Hemicelulases Pectinases Poligalacturonase P ti Pectinesterase t Pectina liase Pectinases Pectinases Pectinases Pectinases Pectinases Pectinases Pectinases Preparados Enzimáticos Comerciais