CÓDIGO: DATA DE APROVAÇÃO: SUBSTÂNCIAS REDUTORAS NAS FEZES PT-LB-PA-005 1. 23/10/2015 Ver: 07 Pg.: CONTROLE DE COPIA: 1/6 INTRODUÇÃO / FINALIDADE DO MÉTODO O teste é utilizado para avaliar a absorção de monossacarídeos como a glicose e a galactose e dissacarídeos como a sacarose e a lactose, sendo que estas substâncias estarão presentes nas fezes em decorrência de uma má absorção por parte do sistema digestivo. A deficiência enzimática mais comum é a da lactase, que pode ser primária ou secundária. A deficiência primária de lactase é comum em todo o mundo, predominando em indivíduos índios norte-americanos, afroamericanos e asiáticos. Apenas 5 a 15% dos caucasianos têm deficiência de lactase. Qualquer doença que lese o eritrócito pode resultar em deficiência secundária de lactase. A deficiência de sacarase é extremamente rara. A má absorção de monossacarídeos (glicose e galactose) é um distúrbio raro presente desde o nascimento. Todos os açúcares metabolizados para glicose e galactose não podem ser tolerados. A terapia consiste em usar a frutose como açúcar. 2. NOME DO TESTE E SINONÍMIAS Substância redutora nas fezes, lactose nas fezes, sacarose nas fezes. 3. ABRANGÊNCIA Setor de Parasitologia. 4. PRINCÍPIO DO MÉTODO O sacarídeo detectado irá reduzir o íon cúprico a íon cuproso em meio alcalino à temperatura de aproximadamente 100 oC. CuSO4 + Substância redutora Δ → CuOH + Cu2O + Substância oxidada + H2O Meio alcalino O aparecimento de uma coloração marrom indica que a reação ocorreu, ou seja, os produtos Cu2O e CuOH foram formados e, isto, por sua vez, revela que houve a presença da substância redutora (sacarídeo) na amostra fecal. 5. APLICAÇÃO CLÍNICA Os indivíduos com deficiência de lactase são intolerantes ao leite, sofrendo de distensão, cólicas abdominais e diarréia. A lactose existente no leite não pode ser hidrolisada a glicose e galactose. Permanece na luz intestinal, onde é fermentada por bactérias, produzindo ácidos orgânicos, que elevam a carga osmótica, induzindo desvios de água para o trato intestinal. O resultado é a distensão intestinal e a diarréia. 6. AMOSTRA ELABORADOR: APROVADOR: VALIDAÇÃO DA QUALIDADE: Luiz Artur Krause Anderson Alvim Márcia Patrícia ESTE DOCUMENTO É UMA COPIA CONTROLADA, SOMENTE VÁLIDO NA FORMA ELETRÔNICA CÓDIGO: DATA DE APROVAÇÃO: SUBSTÂNCIAS REDUTORAS NAS FEZES PT-LB-PA-005 23/10/2015 Ver: Pg.: 07 CONTROLE DE COPIA: 2/6 a) Tipo de amostra Fezes colhidas por evacuação espontânea. b) Quantidade mínima de amostra necessária Aproximadamente 5 gramas de fezes c) Restrições e critérios para rejeição de amostras Presença de contaminação por terra, urina, água e/ou secreções e amostras obtidas com conservantes. d) Condições de acondicionamento das amostras inclusive seu período de guarda A amostra deve ser coletada em um frasco-coletor limpo, seco, e provido de tampa. É estável por 6 horas à temperatura ambiente e 72 horas de 2 a 8 °C. e) Procedimentos de tratamento ou pré-tratamento da amostra Não se aplica f) Preparo do paciente Conforme descrito no Pop Orientações de Preparo e Coleta de Amostras Biológicas (Cód. PO-LB-CO-005). g)Transporte da amostra Vide o PO Manuseio de Transporte de Amostras Biológicas (cód. PO-LB-CO-006). 7. BIOSSEGURANÇA Para esta atividade é necessário a utilização de luvas, jaleco, touca e máscara, conforme descrito no PO Orientações de Biossegurança em vigor (cód. PO-LB-CQ-001). 8. MATERIAIS E EQUIPAMENTOS a) Equipamentos Centrífuga b) Materiais Palitos de Picolé ou similar Tubo de ensaio ELABORADOR: APROVADOR: VALIDAÇÃO DA QUALIDADE: Luiz Artur Krause Anderson Alvim Márcia Patrícia ESTE DOCUMENTO É UMA COPIA CONTROLADA, SOMENTE VÁLIDO NA FORMA ELETRÔNICA CÓDIGO: DATA DE APROVAÇÃO: SUBSTÂNCIAS REDUTORAS NAS FEZES PT-LB-PA-005 23/10/2015 Ver: Pg.: 07 CONTROLE DE COPIA: 3/6 Pipeta graduada de 5 ou 10 mL Pera Isqueiro ou palito de fósforo Lamparina ou bico de Bunsen Garra ou pinça Cronômetro ou relógio c) Reagentes: Reagente de Benedict. 1 OBS: Os reagentes são estáveis à temperatura ambiente até a data de expiração. 9. CALIBRAÇÃO Não se aplica. 10. CONTROLE DE QUALIDADE a) Controle de Qualidade Interno Conforme descrito no Plano da Qualidade do Setor (cód. PQ-LB-PA-001). b) Controle de Qualidade Externo Conforme descrito no Plano da Qualidade do Setor (cód. PQ-LB-PA-001). 11. PROCEDIMENTO TÉCNICO • Colocar, com o auxílio do palito de picolé ou similar, cerca de 2,5 g de fezes (equivale a 2 vezes um caroço de feijão) e dissolver em 50 mL de água. • Centrifugar o material a 3000 RPM por 5 min a fim de utilizar o sobrenadante. • Pipetar 2,5 mL do reagente de Benedict para outro tubo e adicionar 0,5 mL do sobrenadante. • Ferver o tubo por 2 minutos e observar se haverá mudança de cor. a) Limites de Detecção/Sensibilidade: Não se aplica. b) b) Linearidade: Não se aplica. c) Intervalo reportável (CRR): Não se aplica. d) Valores críticos: Não se aplica. ELABORADOR: APROVADOR: VALIDAÇÃO DA QUALIDADE: Luiz Artur Krause Anderson Alvim Márcia Patrícia ESTE DOCUMENTO É UMA COPIA CONTROLADA, SOMENTE VÁLIDO NA FORMA ELETRÔNICA CÓDIGO: DATA DE APROVAÇÃO: SUBSTÂNCIAS REDUTORAS NAS FEZES PT-LB-PA-005 Ver: 23/10/2015 07 Pg.: CONTROLE DE COPIA: 4/6 e) Especificidade: Não se aplica. f) Carryover: Não se aplica. 12. CÁLCULOS Não se aplica. 13. REGISTROS DOS RESULTADOS Os resultados são anotados em folha de trabalho e posteriormente digitados no sistema SMART. 14. PROCEDIMENTOS EM CASO DE RESULTADOS ANORMAIS Não se aplica. 15. VALORES DE REFERÊNCIA Não reagente. 16. INTERFERÊNCIAS Contaminação das fezes com terra, urina, água e/ou secreções; conservantes de fezes (formol). 17. DOCUMENTOS DE REFERÊNCIA a) Bibliografia Tietz, N.W. Clinical guide to laboratory teste, 3 Ed., 1995, Phyladelphia : W.B. SaundersComp. David S. Jacobs e col.; Laboratory test handbook- Lexi - Comp INC , 1996 b)Documentos Complementares Plano da qualidade do setor da Parasitologia (cód. PQ-LB-PA-001) Orientação de Preparo e Coleta de Amostras Biológicas (cód. PO-LB-CO-005). PO Manuseio de Transporte de Amostras Biológicas (cód. PO-LB-CO-006). Atribuições Operacionais do Setor Adm do Laboratório (cód. PO-LB-CA-004) PO de Orientações de Biossegurança (cód. PO-LB-CQ-001) ELABORADOR: APROVADOR: VALIDAÇÃO DA QUALIDADE: Luiz Artur Krause Anderson Alvim Márcia Patrícia ESTE DOCUMENTO É UMA COPIA CONTROLADA, SOMENTE VÁLIDO NA FORMA ELETRÔNICA CÓDIGO: DATA DE APROVAÇÃO: PT-LB-PA-005 18. SUBSTÂNCIAS REDUTORAS NAS FEZES Ver: 23/10/2015 07 Pg.: CONTROLE DE COPIA: 5/6 HISTÓRICO DAS REVISÕES Pg. 1 Natureza da Revisão Alteração no tempo de estabilidade da amostra 1/2 Data da Revisão 30/07/2005 Versão Responsáveis 01 Vitor Almeida 02 Luiz Artur Krause 02 Luiz Artur Krause Correção de erro de digitação 06/09/2008 1 Alteração do texto do tópico Aplicação e Significado Clínico 06/09/2008 1 Alteração do texto Princípio do Método 06/09/2008 02 Luiz Artur Krause 1 Alteração no tempo de estabilidade da amostra 06/09/2008 02 Luiz Artur Krause 2 Mudança do tópico Cálculos e Liberação dos Resultados para Interpretação dos Resultados 06/09/2008 02 Luiz Artur Krause 2 Mudança do valor crítico 06/09/2008 02 Luiz Artur Krause 2 Mudança na quantidade de Reagente de Benedict no tópico Procedimento Detalhado 06/09/2008 02 Luiz Artur Krause 2 Descrição do procedimento de Controle Interno 06/09/2008 02 Luiz Artur Krause 2 Alteração do tópico Controle de Qualidade 26/02/2009 03 Luiz Artur Krause 2 Controle de Qualidade 01/07/2011 04 Luiz Artur Krause 2 Controle de Qualidade 16/08/2013 05 Luiz Artur Krause 16/08/2013 05 Ana Regina e Márcia Patrícia 1-4 Pop recodificado, codificação anterior PT-LB-PA-133 1-6 Procedimento adequado para atender ao item 5.3 da Norma PALC, versão 2013 01/08/2014 06 Luiz Artur 1-6 Procedimento adequado para atender ao item 5.3 da Norma PALC, versão 2013 Após Pré auditoria. 18/11/2014 07 Luiz Artur Krause 1-6 Procedimento revisado e sem alterações. 23/10/2015 07 Luiz Artur Krause 19. REGISTRO DE TREINAMENTO DATA NOME COMPLETO ASSINATURA ELABORADOR: APROVADOR: VALIDAÇÃO DA QUALIDADE: Luiz Artur Krause Anderson Alvim Márcia Patrícia ESTE DOCUMENTO É UMA COPIA CONTROLADA, SOMENTE VÁLIDO NA FORMA ELETRÔNICA CÓDIGO: PT-LB-PA-005 DATA DE APROVAÇÃO: SUBSTÂNCIAS REDUTORAS NAS FEZES 23/10/2015 Ver: 07 Pg.: CONTROLE DE COPIA: 6/6 ELABORADOR: APROVADOR: VALIDAÇÃO DA QUALIDADE: Luiz Artur Krause Anderson Alvim Márcia Patrícia ESTE DOCUMENTO É UMA COPIA CONTROLADA, SOMENTE VÁLIDO NA FORMA ELETRÔNICA