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RELATÓRIO DO PROGRAMA
PILOTO DE ENSAIO DE
PROFICIÊNCIA EM ANÁLISE DE
ENDOTOXINAS
Produto: Água Sintética (apirogênica)
EMPRESA CERTIFICADA ISO 9001:2008
RELATÓRIO DE 2015
MOD01 rev13
APOIO:
ASSOCIAÇÃO REDE DE METROLOGIA E ENSAIOS DO RIO GRANDE DO SUL
AV. ASSIS BRASIL, 8787 - CEP 91140-001 PORTO ALEGRE - RS – BRASIL
FONE/FAX: 51 3347-8745 - CNPJ: 97.130.207/0001-12
e-mail: [email protected] - Internet: http://www.redemetrologica.com.br
PROGRAM A PILOTO DE ENSAIO DE PROFICIÊNCIA EM
AN ÁLISE DE ENDOTOXINAS
ÍNDICE
Introdução .....................................................................................................
03
Coordenação .................................................................................................
03
Reconhecimentos .........................................................................................
Itens de ensaio / Rastreabilidade................................................................
03
04
Preparação das amostras.............................................................................
04
Confidencialidade .........................................................................................
04
Teste de homogeneidade e estabilidade....................................................
Análise estatística dos resultados e avaliação de desempenho..............
04
05
Participantes..................................................................................................
05
Escolha do método de Ensaio.....................................................................
05
Resultados obtidos ......................................................................................
06
Testes de Homogeneidade e Estabilidade..................................................
09
Considerações finais....................................................................................
11
Referências normativas ...............................................................................
11
Procedimentos utilizados no projeto e implementação do programa ....
11
Resultados da Pesquisa de Satisfação ......................................................
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INTRODUÇÃO
O presente relatório apresenta os resultados da rodada do Programa de Endotoxinas de 2015.
Este Ensaio de Proficiência tem o propósito de:
-
determinar o desempenho individual dos participantes para os ensaios propostos;
monitorar continuamente o desempenho dos participantes;
propiciar subsídios aos participantes para a identificação e solução de problemas analíticos;
identificar diferenças interlaboratoriais;
agregar valor ao controle da qualidade dos participantes; e
fornecer confiança adicional aos clientes dos participantes.
A interpretação dos desempenhos dos participantes é realizada através do Escore Z. São seguidas
as orientação do ABNT ISO/IEC 17043 e ISO 13528. Os participantes cujos resultados apresentados
neste relatório foram enquadrados como questionáveis ou insatisfatórios devem observar com
atenção os comentários gerais no final deste documento. O modelo do EP desenvolvido é, segundo
a norma ISO/IEC 17043, Modelo 2: PEP Simultâneo.
COORDENAÇÃO
A Coordenação deste Ensaio de Proficiência foi conduzida pela Secretaria Executiva da Rede
Metrológica, com o devido apoio do Grupo Técnico de Endotoxinas da Rede Metrológica RS.
Integrantes do Grupo Técnico:
Nome
Entidade
Samanta Anunciato Zynich *
Green Lab
Helene P. Carvalho Barbosa
Lonza
E-mail
[email protected]
[email protected]
* Responsável pelo GT
Contatos na Secretaria Executiva:
Marília Rodrigues (Coordenadora dos EP ou PI)– [email protected]
Filipe Albano (Coordenador da Qualidade) – [email protected]
RECONHECIMENTOS
Certificada ISO 9001 desde 1997, a Rede Metrológica RS passou em fevereiro de 2004 por auditoria
na qual teve incluído no seu escopo de certificação o processo de provisão de programas de
comparações interlaboratoriais/ensaios de proficiência.
Isso significa dizer que os ensaios de proficiência promovidos pela Rede Metrológica RS são
realizados de acordo com um sistema da qualidade devidamente documentado e auditado. Esta
ação pioneira é mais uma demonstração do compromisso assumido da Rede Metrológica RS para a
melhoria contínua de seus processos, apoiando o aprimoramento da qualidade dos participantes.
A Rede Metrológica RS é uma das maiores provedoras da América do Sul de Ensaios de
Proficiência, cadastrada no EPTIS (European Proficiency Testing Information System) desde
novembro de 2006.
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ITENS DE ENSAIO / RASTREABILIDADE
Foram avaliados os seguintes itens de ensaios:
Parâmetro
Unidade
Endotoxina
UE/mL
As análises foram realizadas em duplicata, constando o registro dos dois resultados no relatório. A
escolha dos itens de ensaio para o presente programa foi definida pelos membros do Grupo Técnico
da Rede Metrológica RS.
Os itens adquiridos para o programa são: LAL Reagent Water - 500ml (Lot Number: 0000437688),
Endotoxin, E. coli O55:B5 (Lot Number: 0000298905) – Lonza Company.
• LOCAL DA PREPARAÇÃO DOS ITENS DE ENSAIO, OBTENÇÃO DA MATRIZ PARA
PREPARAÇÃO DOS ITENS DE ENSAIO (SUBCONTRATADO)
As amostras foram preparadas a partir da utilização de matrizes (sintéticas) e padrões, no
Laboratório Green Lab (Rua Felipe de Oliveira, 293 – Santa Cecília – Porto Alegre – RS). A obtenção
da água apirogênica e padrões foi de responsabilidade da empresa Lonza.
•
PREPARAÇÃO DOS ITENS DE ENSAIO (ADIÇÃO E FORMULAÇÃO)
A preparação das amostras é de responsabilidade da Rede Metrológica RS, contando com o apoio
do Grupo Técnico da área. Os analitos de interesse foram preparados no laboratório subcontratado e
adicionados às amostras de água reagente. As amostras foram homogeneizadas e após os frascos
foram envasados em ordem, fechados e etiquetados. Estes foram armazenados em caixas de isopor
com gelo reciclável para posterior envio, conforme o cronograma da rodada.
CONFIDENCIALIDADE
A política da Rede Metrológica RS visa manter confidencialidade sobre os participantes do Ensaio de
Proficiência. Portanto, os participantes inscritos recebem um código/senha de identificação que é
sorteado ou enviado lacrado para cada laboratório. Dessa forma a Rede Metrológica RS fica
totalmente isenta da identificação dos mesmos.
TESTES DE HOMOGENEIDADE E ESTABILIDADE (SUBCONTRATADO)
A Rede Metrológica RS executou uma análise estatística com relação à homogeneidade e à
estabilidade das amostras do programa, visando verificar se a variabilidade proveniente da eventual
falta de homogeneidade ou estabilidade não foi significante perante a variabilidade total dos ensaios.
Estes testes foram realizados durante a realização do programa. Para estas amostras, a Rede
Metrológica designou o laboratório Green Lab.
Para realização dos testes de homogeneidade e estabilidade foi escolhido o ensaio de Endotoxinas.
O teste de homogeneidade e estabilidade foi realizado conforme a norma ISO 13528:2005 Statistical methods for use in proficiency testing by interlaboratory comparisons.
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ANÁLISE ESTATÍSTICA DOS RESULTADOS E AVALIAÇÃO DE DESEMPENHO
O desempenho de cada laboratório participante deste Ensaio de Proficiência foi avaliado a partir da
análise estatística dos resultados enviados, sendo definida a estimativa do valor real (valor
designado) através de consenso, seguindo as diretrizes da norma ISO 13528:2005 - Statistical
methods for use in proficiency testing by interlaboratory comparisons.
Resultados de ensaios qualitativos:
Para os ensaios qualitativos os valores de referências foram obtidos através da moda dos resultados
dos participantes. A moda é o valor que aparece com maior freqüência em um conjunto de dados. O
desempenho de cada laboratório neste caso foi avaliado e classificado entre “Conforme” e “NãoConforme”, comparando o resultado frente ao valor de referência.
Convém lembrar que as avaliações obtidas pelos participantes em comparações interlaboratoriais,
também chamado controle externo, não atestam a competência (ou não competência) dos mesmos,
uma vez que constitui, apenas, parte da informação necessária para que, aliado a outros indicadores
e controles internos, se faça um diagnóstico preciso da situação do laboratório. Desta forma, o
objetivo deste relatório não é classificar os participantes em função dos seus resultados e sim
apresentar de forma conjunta o desempenho dos mesmos. Estas informações servirão de subsídio
para análise crítica e implementação de possíveis ações corretivas.
PARTICIPANTES
Os participantes abaixo participam deste programa de ensaio de proficiência. Os mesmos são
identificados neste relatório por um código, de conhecimento exclusivo de cada um. Como os
códigos foram sorteados no início do programa para cada participante, a Rede Metrológica RS não
tem o conhecimento dos respectivos códigos de cada participantes.
EMPRESA
CIDADE
ESTADO
CONTROLE ANALITICO ANALISES TECNICAS LTDA
OSASCO
SP
CONÁGUA AMBIENTAL LTDA
GOIANIA
GO
CORPLAB BRASIL SERVIÇOS ANALÍTICOS AMBIENTAIS LTDA.
LAURO DE FREITAS
BA
FREITAG LABORATÓRIOS LTDA
TIMBÓ
SC
GREEN LAB
PORTO ALEGRE
RS
INSTITUTO TERAPÊUTICO DELTA LTDA
INDAIATUBA
SP
MEDLAB PRODUTOS DIAGNÓSTICOS LTDA
SAO PAULO
SP
MICROAMBIENTAL LAB. COM. E SERV. EM ÁGUA LTDA.
SAO CAETANO DO SUL
SP
PHARMACONTROL
PORTO ALEGRE
RS
TOXILAB
PORTO ALEGRE
RS
ESCOLHA DO MÉTODO DE ENSAIO
Os métodos/técnicas analíticos sugeridos e equivalentes para o programa são:
Parâmetro
Endotoxinas
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Método/técnica sugerido e equivalente
- Método de Coagulação em Gel;
- Método Turbidimétrico;
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- Método Cromogênico.
ANÁLISE ESTATÍSTICA DOS DADOS – RESULTADOS
Tabela de dados estatísticos para o parâmetro em questão:
ANÁLISE DE ENDOTOXINAS (UE/mL)
Amostra: Amostra Sintética X
Rodada: Única
Número de laboratórios que forneceram resultados: 09
Ano: 2015
Desempenho Desempenho
1º Resultado 2º Resultado
Código do
Lab
1ª via
2ª via
1ª via
2ª via
1
0,376
0,432
Presença
Presença
Conforme
Conforme
Método Turbidimétrico
2
>0,25
>0,25
Presença
Presença
Conforme
Conforme
Método de Coagulação em Gel
3
0,549
0,547
Presença
Presença
Conforme
Conforme
Método Cromogênico
4
>0,125
>0,125
Presença
Presença
Conforme
Conforme
Método de Coagulação em Gel
5
>0,125
>0,125
Presença
Presença
Conforme
Conforme
Método de Coagulação em Gel
6
0,793
0,817
Presença
Presença
Conforme
Conforme
Método Cromogênico
7
> 1,0
> 1,0
Presença
Presença
Conforme
Conforme
Método de Coagulação em Gel
9
>0,25
>0,25
Presença
Presença
Conforme
Conforme
Método de Coagulação em Gel
10
0,646
0,664
Presença
Presença
Conforme
Conforme
Método Cromogênico
Métodos ou técnicas
Tabela de classificação dos resultados:
Dados Estatísticos
Valor de Referência
Percentual de resultados conformes
Percentual de Resultados não-conformes
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Valores obtidos
>0,125 (Presença)
100%
0%
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Tabela de dados estatísticos para o parâmetro em questão:
ANÁLISE DE ENDOTOXINAS (UE/mL)
Amostra: Amostra Sintética Y
Rodada: Única
Número de laboratórios que forneceram resultados: 09
Ano: 2015
Código do
Lab
1ª via
2ª via
1ª via
2ª via
Desempenho Desempenho
1º Resultado 2º Resultado
1
<0,01
<0,01
Ausência
Ausência
Conforme
Conforme
Método Turbidimétrico
2
<0,25
<0,25
Ausência
Ausência
Conforme
Conforme
Método de Coagulação em Gel
3
<0,03
<0,03
Ausência
Ausência
Conforme
Conforme
Método Cromogênico
4
<0,125
<0,125
Ausência
Ausência
Conforme
Conforme
Método de Coagulação em Gel
5
<0,125
<0,125
Ausência
Ausência
Conforme
Conforme
Método de Coagulação em Gel
6
<0,05
<0,05
Ausência
Ausência
Conforme
Conforme
Método Cromogênico
7
<0,25
<0,25
Ausência
Ausência
Conforme
Conforme
Método de Coagulação em Gel
9
<0,25
<0,25
Ausência
Ausência
Conforme
Conforme
Método de Coagulação em Gel
10
<0,005
<0,005
Ausência
Ausência
Conforme
Conforme
Método Cromogênico
Métodos ou técnicas
Tabela de classificação dos resultados:
Dados Estatísticos
Valor de Referência
< 0,125 (Ausência)
Percentual de resultados conformes
Percentual de Resultados não-conformes
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Valores obtidos
100%
0%
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OBSERVAÇÕES
Código
Observações
1
Data das análises: 12/05/2015. Para amostra Y os resultados são: Via/Análise 1: <0,01UE/mL
Via/Análise 2: <0,01UE/mL Digitei "0" pois o programa não permite digitar o resultado com símbolo.
2
Amostra X (UE/mL) Via/Análise 1: >0,25 Amostra X (UE/mL) Via/Análise 2: >0,25 Amostra Y (UE/mL)
Via/Análise 1: <0,25 Amostra Y (UE/mL) Via/Análise 2: <0,25 Data de análises: 12/05/2015
3
Análises foram realizadas em 13/05/2015 Amostra Y Via 1 e 2 apresentaram resultados <0,03.
4
As analises foram realizadas no dia 13/05/2015. Sensibilidade do reagente LAL: 0,125 UE/mL Não foi
realizada diluicao da amostra. Amostra X Analise 1: > 0,125 UE/mL (o simbolo correto é maior ou igual,
mas o site não aceita) Analise 2: > 0,125 UE/mL (o simbolo correto é maior ou igual, mas o site não
aceita) Amostra Y Analise 1: < 0,125 UE/mL Analise 2: < 0,125 UE/mL
5
Conforme orientado pela parte técnica da Rede Metrológica RS, não inserimos sinal de menor ou maior
no campo de resultados, porém os resultados encontrados foram os seguintes: Via/Análise 1 "X": >
0,125 UE/mL Via/Análise 2 "X": > 0,125 UE/mL Via/Análise 1 "Y": < 0,125 UE/mL Via/Análise 2 "Y": <
0,125 UE/mL
6
Amostra Y (UE/mL): Via/Análise 1: <0,05 Via/Análise 2: <0,05 Data de análise: 13/05/2015
7
Data do Recebimento: 12.05.2015. Preservação da amostra: entre 3 e 6°C. Data/hora da realização do
teste: 12.05.2015 - 15h. Método Semi-quantitativo. RESULTADO: Amostra “X”: Endotoxina Positiva > 1,0
UE/mL.(Resultado Superior a 1,0 UE/mL) Amostra "Y": Endotoxina Negativa < 0,25 UE/mL.(Resultado
Inferior a 0,25 UE/mL)
9
Resultados Qualitativos: Amostra X (UE/mL): Análise 1: >0,25 / Análise 2 : >0,25 Amostra Y (UE/mL):
Análise 1: <0,25 / Análise 2 : <0,25 Data da análise : 12/05/2015
10
Data de realização dos ensaios: 13/05/15. O resultado obtido para a amostra Y análise 1 e análise 2 foi
<0,00500EU/mL.
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TESTES DE HOMOGENEIDADE E ESTABILIDADE – RESULTADOS
As tabelas a seguir apresentam os resultados dos ensaios de homogeneidade e estabilidade.
TESTE DE HOMOGENEIDADE
PARÂMETRO: ANÁLISE DE ENDOTOXINAS (UE/mL)
Data da Análise:
AMOSTRA X - 12/05/2015
Método Utilizado:
Turbidimétrico
Amostras
Via 1
Via 2
Média
Amplitude
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
0,412
0,357
0,378
0,336
0,364
0,366
0,389
0,359
0,417
0,415
0,408
0,340
0,403
0,320
0,385
0,357
0,396
0,425
0,401
0,415
0,4
0,3
0,4
0,3
0,4
0,4
0,4
0,4
0,4
0,4
0,00
0,02
0,03
0,02
0,02
0,01
0,01
0,07
0,02
0,00
Média Geral do teste de hom.
Desvio das médias (s x )
0,38
0,029
Desvio dentro das amostras (s w)
0,018
Desvio entre as amostras (ss )
0,026
Desvio do grupo de laborat. do EP
0,3 * Desvio
0,311
0,093
Critério de Aceitação: Para as amostras serem consideradas homogêneas, o
desvio entre as amostras (s s ) deve ser menor do que 0,3*Desvio do grupo de
laboratórios participantes para o parâmetro que está sendo avaliado.
As amostras analisadas são consideradas homogêneas.
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TESTE DE ESTABILIDADE
PARÂMETRO: ANÁLISE DE ENDOTOXINAS (UE/mL)
Das amostras dos testes de homogeneidade, foram selecionadas 3 amostras
aleatoriamente, conforme orientações da ISO 13528, para execução dos teste de
estabilidade. Os dados abaixo são referentes ao teste de estabilidade das amostras
deste Ensaio de Proficiência.
Data da Análise:
AMOSTRA X - 26/05/2015
Método Utilizado:
Turbidimétrico
Amostra
3
7
10
Via 1
0,517
0,487
0,490
Via 2
0,502
0,469
0,540
Média
0,510
0,478
0,515
Amplitude
Média das médias do teste de estabilidade (y)
0,50
Média das médias do teste de homogeneidade (x)
0,38
Critério de Aceitação: Para as amostras serem consideradas estáveis, o módulo
da diferença das média obtidas no teste de homogeneidade e da média obtida no
Desvio robusto (do grupo de laborat. do EP)
0,3 * Desvio Robusto
0,31
0,093201
Diferença entre as médias |x-y|
0,12
As amostras apresentaram um pequeno desvio de estabilidade, sendo que o valor da
Endotoxina (UE/mL) aumentou de 0,38 para 0,50 (comparando as médias dos testes
de homogeneidade e estabilidade). Este fato não prejudicou o programa, visto que as
amostras ainda se encontravam dentro do valor designado como referência (>0,125)
para amostra X.
NOTA: As amostras Y foram testadas e todos os resultados (de 10 amostras coletadas ao longo do
lote) foram negativos (<0,125 UE/mL), garantindo a homogeneidade do procedimento de preparo.
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CONSIDERAÇÕES FINAIS
Parâmetros
Comentários sobre os
desempenhos dos
participantes
Cometários
Os laboratórios apresentaram um resultado uniforme nas
análises realizadas, uma vez que 100% dos participantes
obtiveram resultados Conformes nas amostras X e Y.
O provedor definiu uma avaliação qualitativa de desempenho,
visto que nem todos os métodos permitem uma quantificação
dos resultados (com exceção dos métodos turbidimétrico e
cromogênico).
As amostras se demonstraram adequadas ao uso pretendido,
pois os testes de homogeneidade e estabilidade apresentaram
resultados adequados em relação ao propósito do programa.
Ainda, os testes confirmaram o valor designado como referência
pelo provedor.
REFERÊNCIAS NORMATIVAS:
ABNT NBR ISO/IEC 17025 – Requisitos gerais para a competência de laboratórios de ensaio e calibração.
ABNT NBR ISO 9001 – Sistema de gestão da qualidade – Requisitos.
ABNT NBR ISO/IEC 17043 – Requisitos gerais para ensaios de proficiência
ISO 5725 – 5 – Accuracy (trueness and precision) of measurement methods ans results – Part 5: Alternative methods for
the determination of the precision of a standard measurement method.
ISO 5725 – 6 – Accuracy (trueness and precision) of measurement methods ans results – Part 6:Use in practice of accuracy
values.
ISO 13528 – Statistical methods for use in proficiency testing by interlaboratory comparisons.
ISO GUIDE 35 – Reference materials – General and statistical principles for certification.
ISO GUM – Guia para a Expressão da Incerteza de Medição.
MONTGOMERY, D.C. (2004), Introdução ao controle estatístico da qualidade. LTC: Rio de Janeiro.
PROFICIENCY TESTING AUSTRALIA (PTA). Guide to Proficiency Testing Australia. Revised July, 2012.
PROCEDIMENTOS UTILIZADOS NO PROJETO E IMPLEMENTAÇÃO DO PROGRAMA:
RM82 - Manual da Qualidade do Provedor de Ensaios de Proficiência
RM 36 - Procedimento para realização de Ensaios de Proficiência.
RM85 - Procedimento para Designação do Valor de Referencia e Calculo de Incerteza na área de Ensaios
RM72 - Cartilha para Preparação de Amostras Líquidas
______________________
Porto Alegre, 09 de junho de 2015.
Emissão autorizada por:
Revisado Tecnicamente por:
Emissão nº: 01
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Filipe A.
Samanta Z.
x
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RESTULTADOS DA PESQUISA DE SATISFAÇÃO
Nº de laboratórios que responderam a pesquisa: 03
Itens Avaliados: Relatório e Amostras Recebidas
PERGUNTAS
1. Em sua opinião o Relatório do Programa é
claro e objetivo?
ÓTIMO
BOM
REGULAR
INSATISFATÓRIO
100%
-
-
-
67%
33%
-
-
67%
33%
-
-
Comentários:
2. Os dados apresentados no Relatório
serviram como ferramenta de melhoria na
realização das análises?
Comentários:
3. Sua avaliação geral do Programa?
Comentários:
SIM
NÃO
4. O n° de parâmetros esta adequado para a
necessidade de seu laboratório?
100%
Comentários: O número de parâmetros para este ensaio está adequado, toda via, consideramos que seria
pertinente enviar amostras com especificação EX: amostra X especificação: 0,5 EU/mL.
Resposta: Agradecemos a sugestão.
5. Sugestões de novos parâmetros a serem ensaiados:
- MICROCISTINA / COLIFORMES TOTAIS/ESCHERICHIA
COLI/PSEUDOMONAS/ENTEROCOCUS/CLOSTRIDIUM.
Resposta: Agradecemos a sugestão. Informamos que Coliformes totais e E. Coli estão disponível em
nosso PEP em Análises Microbiológicas em Ágias.
6. Na sua opinião, o que poderia melhorar no Programa de Ensaios de Proficiência?
7. Comentários Gerais:
- De maneira geral, o programa de EP está adequado, quando ligamos para tirar uma dúvida fomos bem
atendidos.
Resposta: Agradecemos o retorno.
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