Técnico em Biotecnologia Módulo I ! ! ! Biologia Celular Aula 3 - Membrana Plasmática (Estrutura e Transporte) Prof. Leandro Parussolo Introdução Membrana Plasmática (celular) ! • separa meio intracelular do extracelular; ! • Principal responsável pelo controle da penetração e saída de substâncias da cell. ! • Não é visível ao microscópio óptico (apenas eletrônico); • Existência conhecida antes do microscópio eletrônico ! emprego de técnicas indiretas; Observação que o volume das cells se altera de acordo com a [soluções] em que são colocadas. Composição química ● A membrana plasmática e as demais membranas celulares são constituídas principalmente por: ! ● Lipídios ● Proteínas ● Hidratos de carbono ligados aos lipídios e proteínas Composição Química ● A proporção desses componentes varia muito, conforme o tipo de membrana: ! ● Ex: !Membranas de mielina (recobrem as fibras nervosas) ! papel isolante elétrico ! aprox. 80% lipídios; ! !Membranas mitocondriais internas (metabolicamente muito ativas) ! 25% lipídios ! predomínio de proteínas responsáveis pelo alto metabolismo. Lipídios das Membranas ● Moléculas longas com: ! ● extremidade hidrofílica (solúvel em meio aquoso) ● extremidade hidrofóbica (insolúvel em água) ! anfipáticas; ! ● Lipídios frequentes: ● fosfoglicerídeos; esfingolipídios; colesterol ! ● Fosfoglicerídeos e Esfingolipídios ! contém o radical fosfato e são chamados ! fosfolipídios • Glicolipídios ! outro constituinte anfipático das membranas celulares. ! ! ! todos lipídios que contém hidratos de carbono, com ou sem radicais fosfato. ! ! • Membranas das cells animais ! contém colesterol, o que não acontece nas cells dos vegetais, que possuem outros esteróis. ! ! • Qto maior a [esteróis] ! menos fluida a membrana; ! ! • Membranas de cells procariontes ! não contém esteróis (salvo raras exceções); Figura esquemática da Membrana Celular Membrana – estrutura lipoprotéica fluída Organização básica: ! ! • 2 camadas lipídicas fluidas e contínuas onde estão inseridas moléculas protéicas ! mosaico fluido. ! • Esse modelo (mosaico fluido) explica todos os dados experimentais conhecidos; ! ! • É válido para todas membranas celulares: mitocôndrias, cloroplastos, R.E., aparelho de Golgi, lisossomos, endossomos, vesículas de secreção, peroxissomos, envelope nuclear, membrana plasmática e outras. • As moléculas de camada dupla de lipídios estão organizadas com suas cadeias apolares (hidrofóbicas) – interior da membrana ! • As cabeças polares (hidrofílicas) – voltadas para o meio extracelular ou para o citoplasma (meios aquosos) ! • Membrana ! constituída por 1 camada hidrofóbica média; 2 camadas hidrofílicas – 1 interna (lado citoplasmático) e outra externa. Proteínas da Membrana Plasmática ! • Atividade metabólica - depende principalmente das proteínas; ! • M.P. ! grande variedade de proteínas ! ! podem ser divididas em 2 grandes grupos: integrais ou intrínsecas periféricas ou extrínsecas • Proteínas Integrais ! firmemente associadas aos lipídios ! ! só podem ser separadas da fração lipídica por meio de técnicas drásticas – ex: emprego de detergentes. ! 70% das proteínas de membrana são integrais: incluem as enzimas da membrana, as glicoproteínas responsáveis pelos grupos sanguíneos M-N, proteínas transportadoras, receptores para hormônios, drogas e lectinas. ! • Proteínas Periféricas ! podem ser isoladas facilmente, livres de lipídios, pelo emprego de soluções salinas; Obs: Apesar de morfologicamente parecidas, as unidades de membrana não são iguais – nem na morfologia, nem nas funções. ! ! Embora a organização molecular básica das membranas seja a mesma, elas variam muito na composição química e nas propriedades biológicas. GLICOCÁLICE • A superfície externa da membrana plasmática apresenta uma região rica em hidratos de carbono ligados a proteínas ou lipídios – denominada glicocálice ! ! Transporte através da membrana • Substâncias ! relação direta entre sua solubilidade nos lipídios e sua capacidade de penetração nas cells. ! • Compostos hidrofóbicos (solúveis nos lipídios) ! atravessam facilmente a membrana (ácidos graxos, hormônios esteróides e anestésicos) ! • Compostos hidrofílicos (insolúveis nos lipídios) ! penetram nas cells com mais dificuldade (dependendo do tamanho da molécula e de suas características químicas) Mecanismos de transporte de substâncias Permeabilidade à água: ! • M. C. ! muito permeável à água; ! • Solução hipotônica – cells aumentam de volume devido à penetração de água; ! • Aumento de volume muito acentuado – M.P. se rompe (lise celular) ! • Solução Hipertônica – cells diminuem de tamanho devido a saída de água; • Soluções Isotônicas – volume e forma da cell não se alteram. • Cells de plantas Fenômeno semelhante ao das cells animais – consequências diferentes devido à parede celular; ! • Solução hipertônica – cell veg. perde água e diminue volume (citoplasma se separa da parede celular – rígida) - plasmólise ! • Solução hipotônica – cell veg. aumenta de tamanho (não se rompe devido a parede de celulose) - desplasmólise Solução Hipertônica Solução Isotônica Solução Hipotônica Obs: A membrana também é muito permeável à água e as certas substâncias hidrófilas e insolúveis em lipídios, como uréia e glicerol – devido a proteínas transmembrana. ! ! Formam “poros funcionais” – caminhos hidrofílicos pelos quais passam muitos íons e moléculas que não conseguem atravessar a barreira lipídica Difusão passiva • Moléculas entram e saem das cells por difusão passiva. ! • Distribuição de soluto tende a ser uniforme em todos os pontos do solvente ! o soluto penetra na cell quando sua [menor] no interior da cell do que no meio externo - sai da cell no caso contrário. ! • Força que impulsiona o soluto para dentro ou fora da cell ! agitação térmica das moléculas de soluto ! • Processo físico de difusão à favor de um gradiente Transporte ativo • Há consumo de energia fornecida por ATP; ! Mediado por proteínas carreadoras. ! • Substância pode ser transportada de um local de baixa [ ] para um outro de alta [ ]. ! • O soluto na difusão ativa é transportado contra um gradiente BOMBA DE Na+ e K+ • Um dos sistemas de transporte ativo mais importantes; ! • Estabelece as diferenças nas [de Na+ e K+] entre o interior da cell e o líquido extracelular, por isso é responsável pela manutenção do potencial elétrico da MP; ! ! cell transporta íons sódio (Na+) do citoplasma - [ ] para meio extracelular - [ ] – deve ser vencido um obstáculo químico (conc. elevada de íons sódio) e um obstáculo elétrico (cargas positivas de íons sódio). Na+ K+ - ATPase ou bomba de Na+ K+ MEIO EXTRACELULAR MEIO INTRACELULAR Difusão facilitada • Numerosas substâncias, como glicose e alguns aa, penetram nas cells por difusão facilitada, sem gasto de energia. ! • Difusão se processa a favor de um gradiente – velocidade maior que na difusão passiva ! • A velocidade da difusão facilitada é proporcional à [soluto], exceto em [ ] muito baixas. ! • Elevando –se gradativamente a [ ] da molécula ! chega-se a um ponto de saturação, além do qual a velocidade de penetração não aumenta mais. ! • Penetração facilitada ! a substância penetrante se combina com uma molécula transportadora ou permease localizada na membrana plasmática. Difusão facilitada Transporte em quantidade ! • Cells também são capazes de transferir para seu interior, grupos de macromoléculas (proteínas, polissacarídeos, polinucleotídeos) e até mesmo bactérias e outros microrganismos - (visíveis ao microscópio óptico). ! • De dentro para fora ! ENDOCITOSE ! FAGOCITOSE PINOCITOSE ! • Sentido inverso: (citoplasma ! meio extracelular) - EXOCITOSE Fagocitose • Nos mamíferos – a fagocitose é feita por cells especializadas na defesa do organismo – neutrófilos e macrófagos. Pinocitose ! • Captação ativa de macromoléculas em solução; ! • Cells emitem delgadas expansões do citoplasma que englobam gotículas; ! • Pinocitose não-seletiva ! vesículas englobam todos os solutos que estiverem presentes no fluido extracelular; • Pinocitose seletiva ! (maioria das cells) ! realizada em 2 etapas: ! • 1ª ! substância a ser incorporada adere a receptores da superfície celular; ! • 2ª ! membrana se afunda e o material a ela aderido passa para uma vesícula ! Essa se destaca da superfície celular e penetra no citoplasma Hemácias humanas foram imersas em duas soluções das substâncias I e II, marcadas com um elemento radioativo, para estudar a dinâmica de entrada dessas substâncias na célula. Os resultados estão apresentados no gráfico abaixo. ! Com base nesses resultados, pode-se concluir que as substâncias I e II foram transportadas para dentro da célula, respectivamente, por (A) transporte ativo e difusão passiva. (B) difusão facilitada e transporte ativo. (C) difusão passiva e transporte ativo. (D) fagocitose e pinocitose. (E) osmose e difusão facilitada. Explicação da questão ! • Transporte mediado por carreadores (Difusão facilitada ou transporte ativo) ! • Com o aumento da concentração de solutos a velocidade de transporte aumenta somente até o ponto de saturação (Vmáx); ! • Nesse ponto, todos os carreadores presentes na membrana estão participando no transporte da substância em questão. Referências Bibliográficas JUNQUEIRA, L. C.; CARNEIRO, J. Biologia Celular e Molecular. 8ª ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2005. 332p. Capítulo 5 ! CARVALHO, H. F.; PIMENTEL, S. S. R. A célula. 2ª ed. São Paulo: Manole, 2007. 380p. ! DE ROBERTIS, E. M. F. Bases da Biologia Celular e Molecular. 4ª ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2006. 389p.