CARACTERIZAÇÃO QUÍMICA DA Maytenus ilicifolia E SEU
EFEITO PROTETOR NO ENDOTÉLIO VASCULAR
Marcela Malinoski Munoz
PIBIC/CNPq
Marcello Iacomini, Yanna D. Rattmann, Nessana Dartora, Lauro M. de Souza, Thales R.Cipriani
Introdução
Objetivos
Resultados e Discussão
A
10
30
100
***
***
30
100
300
eNOS
25
50
75
B
***
+ Endotélio
- Endotélio
100
0,3
1
3
10
30
100 300
SEI (µg/mL)
500
#
400
***
***
300
200
100
0
Fig. 1. Efeito vaspdilatador, dependente do endotélio,
induzido pelo SEI em anéis de artérias coronárias de
porco.CE50=61,5 (44,2- 68,8) µg/mL; Emax=95,3%
Método
Relaxation (%)
0
SEI 0,3 – 300 µg/mL
3
p-eNOS
(Ser1177)
Nivel de p-eNOS
(unidades relativas)
Relaxamento (%)
Investigar
os
efeitos
do
sobrenadante etanólico da infusão
das folhas da (SEI) da M. ilicifolia
sobre o relaxamento arterial de
anéis de artéria coronária de porco e
sobre a ativação da enzima eNOS
das células endoteliais de artéria
coronárias humanas.
SEEA (g/mL)
C
0
C
3
10
300
SEEA (g/mL)
Fig. 3. O SEI ativa a produção do NO por meio da
fosforilação da Ser 1177 da eNOS em linhagem de
células endoteliais de artéria coronária humana. AImunoblots representativos; B – Análise densitométrica
das bandas para p-eNOS
25
50
***
75
+Endotélio
L-NA
Artéria Coronária
Krebs -> carbogênio ->
Sistema computadorizado
de Porco
aquecimento -> 5g de tensão
100
Exemplo de registro
0,3
1
3
10
30
100 300
SEI (µg/mL)
Fig. 2. Efeito vasodilatador do SEI em presença do
L-NA (100µM), inibidos da produção do mediador
endotelial oxido nitrico (NO). Inibição: ~83%
Cultivo Celular – Artéria Coronária Humana
Western Blot
Fig. 4. Os picos 1 e 2 corresponderam a 1 (epi)-galocatequina e
os picos 3 e 5 foram identificados como catequina e epicatequina,
respectivamente. Os picos 7 e 8, foram identificados como
provenientes da (epi)-afzelequina
Conclusão
• o SEI (0,3 – 300 µg/mL) causa vasodilatação dependente do endotélio
Referências
CIPRIANI, T. R. et al. Extração, purificação e caracterização estrutural de
polissacarídeos de Maytenus ilicifolia (espinheira-santa). 81f. Dissertação (Mestrado em Ciências Bioquímica) - Setor de Ciências Biológicas, Universidade Federal do Paraná, Curitiba, 2003.
RATTMANN, Y. D. et al. Participação do Óxido nítrico no efeito vasorrelaxante de
extratos e frações semi-purificadas da Maytenus ilicifolia Mart. ex. Reissek
(espinheira-santa). Dissertação (Mestrado em Ciências - Farmacologia) - Setor de Ciências Biológicas,
Universidade Federal do Paraná, Curitiba, 2004.
vascular e do NO em artérias coronárias de porco;
• Em cultura de células endoteliais de coronária humana, o SEI ativa a
eNOS por meio da fosforilação na Ser 1177;
• A Maytenus ilicifolia é potencialmente benéfica para o tratamento da
disfunção endotelial e patologias relacionadas (ex: aterosclerose). Além
disso é rica em polifenois, reconhecidos como cardioprotetores.