Avaliação da resistência às drogas
tuberculostáticas no LACEN-PR em
2008
SESA/SVS/LACEN-PR
Andressa Sprada
Maio de 2009
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DA TUBERCULOSE NO LACEN/PR:
-BACILOSCOPIA
*** Coloração de Ziehl-Neelsen
-CULTURA
*** Meio sólido: Lowenstein Jensen
*** Descontaminação : Método de Petroff
-CULTURA
• Se POSITIVO (Após 42 dias de incubação) → Desenvolvimento de
BAAR
• Se for solicitada a identificação da espécie → Niacina / PNB / TCH
/ PCR (NaCL 5%, tween 80, telurito, nitrato, urease,...)
OBS.: NIACINA: Produzida por todas as micobactérias, mas apenas
algumas espécies se detecta “in vitro” (M. tuberculosis, M.
africanum, M. simiae, M. chelonae, M. marinum)
- CULTURA
•
Se for solicitado o Teste de Sensibilidade:
1.
A cultura deverá ser positiva;
2.
A identificação é feita simultaneamente à realização do
teste de sensibilidade.
-TESTE DE SENSIBILIDADE
*** Método utilizado: Método das proporções em LJ – teste
indireto (Descrito em 1963 por Canetti, Rist e Grosset)
OBS.: Para assegurar a precisão do método utilizado é importante
observar todas as etapas do processo com muito cuidado e
atenção (cepa padrão H37RV)
*** Princípio: Detectar a proporção de bacilos resistentes
contidos em uma amostra de M. tuberculosis frente a uma
concentração da droga que é capaz de inibir o desenvolvimento
das células sensíveis, mas não o das células resistentes
(concentração crítica).
Para cada droga foi definida uma proporção de mutantes
resistentes em uma população bacilar, igual ou acima da qual a
amostra é considerada resistente (proporção crítica).
• Incubar à 36  1°C,
24-48 horas deitados e
com tampa frouxa;
• Incubar até 42 dias
(28 dias).
-TESTE DE SENSIBILIDADE
DROGA
CONC. CRÍTICA (µg/mL)
PROPORÇÃO CRÍTICA (%)
Etionamida (ETH)
20
10
Isoniazida (INH)
0,2
1
Rifampicina (RFP)
40
1
Etambutol (EMB)
2
1
Estreptomicina (SM)
4
1
Pirazinamida (PZA)
100
10
- TESTE DE SENSIBILIDADE
-TESTE DE SENSIBILIDADE
*** Quando solicitar:
- Retratamento após falência bacteriológica ao esquema 1;
- Recidiva da doença;
- Reinício após abandono;
- Pacientes com suspeita de resistência primária;
- Contatos de um caso de tuberculose resistente;
- Vigilância epidemiológica.
OBS.: Definido em 2004 no II Congresso Brasileiro de
tuberculose......Mas cada Estado pode acrescentar detalhes
aos seus PECT
-MECANISMOS DE RESISTÊNCIA :
•Exclusivamente por mutações espontâneas – A mutação
ocorre no gene que codifica a proteína para o alvo da droga,
desta forma, é possível:
*** Inibir enzima que transforma a droga que é inativa em
droga ativa contra o bacilo;
*** Diminuir o acúmulo da droga dentro da célula por
dificultar sua entrada ou por acelerar sua remoção da célula.
OBS.: No caso de outras micobactérias (MNT) a maioria
apresenta uma resistência natural a todas as drogas,
provavelmente devido à estrutura da parede celular.
-DADOS ESTATÍSTICOS DE 2008
*** Total de TS realizados → 214 testes
Material
8%
92%
Escarro
Outros
- DADOS ESTATÍSTICOS DE 2008
*** Do total de 214 testes:
Teste de sensibilidade a drogas tuberculostáticas
8%
22%
70%
Sensível
Multirresistente
Monorresistente
- MATERIAL:
*** Outros (LCR, LBA, Biopsia, Lavado gástrico) = 17 (8%)
14 → M. tuberculosis → Sensível a todos
1 → MAC (Complexo M. avium-intracellulare) → Resistente a RFP, INH,
SM → LBA
1 → M. Kansasii → Resistente a INH, PZA, SM → LCR
1 → M. tuberculosis → Resistente a SM → Biopsia pleural
-Material:
*** Escarro = 197 (92%)
6 MAC → Resistente a todas as drogas testadas
191 M. tuberculosis :
136 → Sensível a todas
34 → Resistente a RFP, INH
3 → Resistente a EMB, INH, RFP
5 → Resistente a RFP
11 → Resistente a INH
1 → Resistente a RFP, INH, EMB, SM
1→ Resistente a ETH e PZA
- ENVIO DE ISOLADOS PARA CENTRO DE REFERÊNCIA:
*** Quando o paciente é conhecidamente infectado por
um bacilo multirresistente;
*** Quando é uma micobactéria não tuberculosa
resistente às drogas testadas no LACEN/PR
EX.: M. Kansasii (testar também amicacina, claritromicina,
cipro...além da RFP, INH, EMB,...)
M. massiliense (testar claritromicina, amicacina,...)
OBRIGADA!!!!