Reunión de los Centros Colaboradores de la OPS/OMS y Laboratorios
Nacionales de Referencia para Dengue en la Región de las Américas
10 al 12 de junio de 2008
Ciudad del Saber, Panamá
Ana Cecilia Ribeiro Cruz
INSTITUTO EVANDRO CHAGAS – IEC/SVS / MS
[email protected]
Centro Colaborador de la OPS/OMS para Investigación,
Diagnóstico, Referencia y Entrenamiento en Arbovirus.
Diretor
Adminis
tración
Recepción,
Registro y
Distribuición
de la muestra
biológicas
Laboratório
cultivo de
células y
Aislamiento
Laboratório
Aislamiento
en
animales
Serología I
(IH, FC NT)
Producción
de
Sueros y
antígenos
Biotério
Serología II
(ELISA)
Producción
de
antígenos
Biologia
Area de
Molecular
Desinfección,
RT-PCR,
Entomologia
lavado y
Clonagem
esterilización
secueciación
Las Investigaciones de
ARBOVIRUS en BRASIL
1954/2007: 11.000 aislamientos/ 196 tipos de
vírus/ 161 aislados por primeira vez en Brasil/
100 nuevos para la ciência/ 34 asociados con
las enfermadades en los seres humanos.
ARBOVÍRUS AISLADOS EN IEC
0º
DEN1 e 4; Alto Alegre,
Cantá
Serra do Navio,
Araguari, Amapari,
Ieri, Cupixi
176
diferentes
arbovírus
(DEN 2 e3,
Ilheus, SLE,
FA, Grupo C,
Oropouche,
Mayaro, Una,
EEE, WEE,
etc.)
AP
RR
Rio Preto,
Balbina e
Uatuma
AM
PA
TO
AC
10º S
RO
Oceano
Atlântico
Ariquemes
Região Norte
América do Sul
Minaçu
Brasil
70º W
60º W
At
la
nt
ic
O
ce
an
Iaco,
Moriche,
Purus, Sena
Madureira,
Xiburema
50º W
0
Fonte: IEC, SEARB
Fonte: IEC, SEARB
500
Kilometers
1,000
1954 – A partir de los estudios: 30 arbovírus se
describe ao mundo;
Hoy: 534 diferentes arbovírus registrados, 196
aislados en IEC (34%)
Family
B unyaviridae
Reo viridae
Rhabdo viridae
To gaviridae
( nº )
(70)
(65)
(15)
Flaviviridae
(09)
(08)
A renaviridae
(03)
P ico rnaviridae
Herpesviridae
(03)
(02)
P o xviridae
(01)
Ortho myxo viridae (01)
P aramyxo viridae (01)
Co ro naviridae
(01)
Unclassified
(01)
Sorotipos Circulantes no Brasil, 2008
RR
AP
AM
CE
MA
PA
RN
PB
PE
PI
AC
TO
RO
BA
MT
GO
MG
ES
MS
SP
PR
SC
RS
Fonte: SVS/MS
RJ
AL
SE
Evolución de las areas de Riesgo de
Fiebre Amarilla en Brasil, 1997-2007
1997
2001
2007
Áreas de riesgo de FA en Brasil
Endemica
Libre, con riesgo potencial
Transición
Libre
Fonte:
MS/SVS/DEVEP/CGDT/COVEV
Distribución de municipios con registros de muertes de monos, epizootias
por fiebre amarilla selvática y casos humanos (dez/07 a mar/08)
EPIDEMIAS DE FEBRE DO OROPOUCHE, 1980 - 2006
Novo Airao (1996)
Barcelos (1980)
Oriximina (1996)
Panamá
Mazagão (1980)
Vitória do Xingu,
Brasil Novo (1996)
Mag. Barata, Ig.
Açú, Maracanã e
Vizeu(2006)
Roraima
Bejuco (1989)
Amapa
Serra Pelada (1994)
Porto Franco (1988)
Iquitos
Para
Maranhao
Amazonas
(1992-93-94-95-97-98)
Tocantinópolis (1988)
América do Sul
Acre
Rondonia
Peru
Tocantins
Mato Grosso
Puerto Maldonado (1993)
Goias
Brasil
So
ut
h
ic
Oc
ea
n
nt
Ariquemes ,
Ouro Preto do Oeste (1991)
At
la
Manaus (1980-81)
Parauapebas
(2003)
South
Porto de Moz (2004)
Pacific Ocean
Xapuri, 1996
0
500
Kilometers
1,000
MAYARO BROTES EN REGIÓN AMAZONIA
1955-2008
Belterra (1978)
Guama (1955)c
Santa Barbara (2008)
Amapa
Roraima
Benevides (1991)
Conceicao do Araguaia (1981)
Para
c
Amazonas
Maranhao
South America
Peru
Acre
Tocantins
Peixe (1991)
Mato Grosso
Tumbes(1995)
Brazil
So
ut
h
ic
Oc
ea
n
South
Itaruma (1987)
nt
Huanuco(1995)
At
la
Aucayacu (1995)
Pacific Ocean
Goias
0
500
Kilometers
1,000
Flujo del diagnóstico
Avaliação clínica
Avaliação
epidemiológica
Diagnóstico final
seguro
Avaliação Laboratorial
>5 dias i.s.
0-5 dias i.s.
Isolamento /RT-PCR
Sorologia
HI (Ig total);IgG ELISA
FC
HI +;IgG +
Detecção
de
antígenos
virais
Sequenciamento
HI -IgG
Análise
MAC-ELISA(IgM)
IgM +
NT
IgM -
NS1
IF
Imuno
Histoquímica
2007
2008
Amostras Inoculadas
4613
2987
Positivos
677
337
DEN-1
62
26
DEN-2
320
190
DEN-3
295
110
-
11
Febre Amarela
2007
2008
Amostras testadas
694
515
Positividade
148
48
DEN-1
14
3
DEN-2
45
45
DEN-3
89
0
Produción y Distribución de Antigenos (mL)/2007
800
700
600
337
160
500
400
206
300
200
461
408
265,5
20
107
100
0
VDEN1
VDEN2
Antígenos (mL) Producidos
VDEN3
VFA
Antígenos (mL) Distribuído
La Capacidade Técnica
Personal
Permanente (37)
Total: 62
Estudantes (15)
Contratados e Terceirizados (10)
Termos de referências
Entrenamiento en pruebas serológicas y
aislamientos para arbovirus.
Brasil:
• 27 personas de los estados en serología (MAC ELISA
para Dengue y Fiebre amarilla);
Otros países de las América:
• Bolivia, Venezuela, Francés Guayana y Colombia, se
ofrecieron formación en serología. Colombia fue tan bien
capacitados en otras pruebas como producción de los
antígenos e inhibición de la hemaglutinación.
• Pruebas de neutralización mediante la reducción de
placas (PRNT).
Entrenamiento en RT-PCR, secuenciación y
estudios moleculares
Brasil:
• 1 profesional do Estado de Pernambuco (RT-PCR);
• 1 investigadora da universidade do Maranhão (RT-PCR
y secuenciación);
• 4 estudiantes da universidade do Pará (RT-PCR y
secuenciación);
• 4 profesionales da Fiocruz e Adolfo Lutz (RT-PCR y
secuenciación – FNO)
Investigación de brotes y epidemias
Fiebre Amarilla :
• Región Amazonia;
• Centro Brasil (Góias y Distrito Federal);
Virus Dengue:
• Región Amazonia (Pará, Amazonas, Amapá, Tocantins
y Roraima);
• Nordeste Brasil (Maranhão, Piauí, Bahia e Rio Grande
do Norte);
• Centro Brasil (Goiás y Distrito Federal);
Vírus Oropouche:
• Norte de Brasil (Pará)
Otras investigaciones (Pará e Rio Grande do Norte).
Caracterizacione de nuevas cepas de
arbovirus
Brasil:
• 8 cepas fueran caracterizadas:
Breu Branco - Reoviriade
Curionópolis – Rhabdoviridae
Tacaiúnas – Rhabdoviridae
Minaçú – Reoviridae
Juruaçá, Alto Alegre y Canta ( en investigaciónes).
Caracterizacione biológica, físico-químico e molecular. Se
hicieron estudios experimentales con algunos virus
antes mencionado.
La formación en entomología (A fin de apoyar las
actividades epidemiológicas. Identificación
epidemiológica de la fauna, los métodos de captura,
identificación de insectos capturados y los intentos de
establecer colonias de insectos hematófagos principal)
Brasil:
• Varios entomologista de los diferentes Estados de Brasil (Tocantins,
Goiás, Mato Grosso y Distrito Federal);
•
Francés Guayana:
• Uno entomólogo ( Colaboracione com INPA) .
En junio de 2008 un programa de capacitación está
prevista en dos actividades: la entomología y
captura de los monos. Esto será coordinado por el
Ministerio de Salud de Brasil
La producción de antisuero y antígenos para arbovirus de
importancia para la salud pública (Actividad para el desarrollo de
arbovirus estudios en diferentes laboratories.To mejorar la
capacidad de cada laboratorio en la identificación de arbovirus
enfermedades producidas por el más común arbovirus especies
en la región)
•
•
•
•
Distribución para toda la red brasileño
Laboratório Central de Paraguay: Contra el flavivirus Conjugado 6B6C-1;
peroxidasa sustrato; antígenos de dengue 1, dengue 2, dengue 3 y dengue
4, y los anticuerpos monoclonales a los cuatro serotipos de virus dengue
Laboratorio central de Colombia: Normal antígeno para ser utilizados en
pruebas de ELISA; antígenos de dengue 1, dengue 2, dengue 3 y dengue
4, y un conjunto de anticuerpos monoclonales a los cuatro serotipos de
dengue virus, antígenos de virus de la fiebre amarilla. El protocolo de IgM
ELISA para la fiebre amarilla también fue el envío.
Laboratorio central de Costa Rica: anticuerpos monoclonales y
policlonales para la fiebre amarilla, y también antígenos de la fiebre
amarilla. El protocolo de IgM ELISA para la fiebre amarilla es también fue el
envío.
Fiebre Amarilla
Red de Laboratórios
RR
AP
AM
Instituto Evandro Chagas - IEC/PA
Laboratório de Referência Nacional
Centro Colaborador da OMS
PA
CE
MA
RN
RN
PB
PE
PI
AC
RO
TO
SE
MT
BA
DF
GO
MG
AL
FLUXO DE AMOSTRAS:
9Isolamento Viral
9Exames Histopatológico
9Imunohistoquímica
9Controle de Qualidade
ES
MS
SP
PR
RJ
Instituto Oswaldo Cruz - FIOCRUZ-RJ
Laboratório Colaborador.
SC
RS
Instituto Adolfo Lutz - IAL/SP
Laboratório Colaborador.
Biología molecular caracterización de arbovirus (Para
mejorar la capacidad de arbovirus-IEC para la secuenciación
de las cepas de varios arbovirus)
•
15 cepas de VDEN1 (Genotipo IV)
•
11 cepas de VDEN2 (Genotipo III)
•
10 cepas de VDEN3 (Genotipo III)
•
•
•
20 cepas de Oropouche (Genotipos I, II y III)
•
2 cepas los virus Melao
3 cepas los virus Breu Branco
Estudios experimentales sobre la patogénesis de
algunos arbovirus (Para comprender el potencial de
virulencia y patogenicidad de algunos arbovirus)
•
•
•
•
•
•
Fiebre Amarilla: Hamster
Virus Melao: Hamster y Raton
Virus Minaçu: Hamster y Raton
Virus Itacaiunas: Raton
Virus Curionopólis: Raton
Virus Breu Branco: Hamster
Todos fueron analizados por: Biologia Molecular, Histopatologia,
Mircroscopia Eletronica de transmición.
Conclusione y Perspectivas
1) Intensificación de la cooperación con los
laboratorios nacionales de las Américas
2) Continúe colaborando con las actividades
desarrolladas por la OPS y OMS
3) Ayudar a los países que necesiten asistencia
durante los brotes y epidemias causadas por
arbovirus
4) El aumento de ayuda financiera para los centro
colaboradores
Colaboración
•
NACIONALES:
Fiocruz, FMT-TO, UFBA, Univ. de São Paulo, UFPA.
•
INTERNACIONALES:
• UTMB
• CDC/Fort Collin-USA
• INEVH (Pergamino, Argentina)
• Instituto Pasteur de Cayenne (Cayenne, French Guyana) y Paris
(France)
El apoyo financiero de las actividades: El apoyo financiero a las
actividades de la OMS CC en IEC se ha obtenido del Ministerio de
Salud y el Instituto Evandro Chagas, así como de proyectos específicos
de investigación.
Laboratory Staff
Dr. Pedro F.C. Vasconcelos (Diretor)
Dra. Sueli G. Rodrigues
Dra. Elizabeth Salbé
Dr. Márcio Nunes
Dra. Nazaré Segura
Dra. Daniele Medeiros
Dra. Livia Caricio Martins
Dra Lívia Casseb
Dra. Eliana Silva
Dra. Tarciana
Dra. Raimunda do Socorro
Dr. José Antonio P. Diniz
Financiadores
SVS - MS
CNPq
FAPESPA –Pa
UTMB – NIH
Comunidade Européia
Campus Belém
IEC- 1936
www.iec.pa.gov.br
Campus Ananindeua
(Nuevo)